Титрование гемолитической сыворотки: т ип реакции Реакция иммунного гемолиза
Титр гемолитической сыворотки - максимальное ее разведение, обеспечивающее полный гемолиз эритроцитов в присутствии комплемента. Рабочая доза гемолитической сыворотки в 3-4 раза выше титра.
Ингредиенты РСК: 1. исследуемая сыворотка 2. антиген - взвесь убитых бактерий 3. комплемент (сыворотка кролика или морской свинки 4. гемолитическая система состоящая из: а) гемолитической сыворотки (сыворотка кролика, иммунизированного эритроцитами барана) б) эритроцит антигена - 3% взвеси эритроцитов барана
ОСНОВНОЙ ОПЫТ РСК (изучить схему постановки)
| Ингредиенты, мл | пробирки | ||||||
| опыт | Полж. к-ль | Отр. к-ль | К-ль сывор | К-ль антг. | К-ль компл | К-ль ГC | |
| Испытуемая сыворотка в разведении 1:5 | 0,2 | - | - | 0,2 | - | - | - |
| Положительная сыворотка | - | 0,2 | - | - | - | - | - |
| Отрицательная сыворотка | - | - | 0,2 | - | - | - | - |
| Антиген | 0,2 | 0,2 | 0,2 | - | 0,2 | - | - |
| Изотонический раствор хлорида натрия | - | - | - | 0,2 | 0,2 | 0,4 | 0,6 |
| Комплемент (в рабочей дозе) | 0,2 | 0,2 | 0,2 | 0,2 | 0,2 | 0,2 | - |
| Инкубация на холоде при t - 0-4 0С в течение 18-20 час. или при t-37 0С в течение 30 минут | |||||||
| Гемолитическая система | 0,4 | 0,4 | 0,4 | 0,4 | 0,4 | 0,4 | 0,4 |
| Инкубация при 370С в течение 20-30мин. (до гемолиза в контроле) | |||||||
| Результат | 
Гем-
|
Гем-
| 
Гем+
| 
Гем+
|
Гем+
|
Гем+
|
Гем-
|
Вывод: Исследуемая сыворотка содержит антитела против используемого антигена
Цель применения РСК: 1. для экспресс диагностики выявления микробных антигенов (обнаружения бактерий) в материале от больного (например при диагностике гонореи исследуется моча, секрет предстательной железы, гнойные выделения из шейки матки; 2 для выявления антител (диагностики заболеваний) в сыворотке крови больного (например при диагностике сыпного тифа);
Применение РСК в экспресс-диагностике для выявления микробных антигенов (гонорея).
Исследуемый материал: гнойные выделения больного, содержит микробные антигены(гонококков)
Диагностические препараты: 1. антититела против бактерий (полученные иммунизацией животных)
2. комплемент (сыворотка кролика или морской свинки 3. гемолитическая сыворотка (сыворотка кролика, иммунизированного эритроцитами барана) 4. 3% взвесь эритроцитов барана
Применение РСК в серодиагностике сыпного тифа.
Исследуемый материал: кровь больного, содержит антитела против риккетсий Провачека – возбудителя сыпного тифа
Диагностические препараты: 1. риккетсиозный корпускулярный антиген 2. комплемент (сыворотка морской свинки) 3. гемолитическая сыворотка (сыворотка кролика, иммунизированного эритроцитами барана) 4. 3% взвесь эритроцитов барана
