Лабораторно-практические занятия

Взятие крови для исследования на бруцеллез.

Кровь у животных берут из яремной вены (у свиней — из ушной или хвостовой, у лисиц и песцов — из бедренной вены, у норок — путем отсечения подушечки среднего пальца задней лапы или кончика хвоста) в стерильные пробирки по 5-7 мл (от пушных зверей — по 1-2 мл).

Стерильные пробирки с ватными пробками готовят заранее. На все пробирки для закрепления этикеток с надписями надева­ют резиновые кольца. Заранее готовят и иглы для взятия крови. У лошадей и рогатого скота кровь берут иглами Ананьева, Сайковича, Боброва, Каспера, а у мелких животных — инъекцион­ными иглами. Есть и специальные приборы для взятия крови. Иглы перед взятием крови стерилизуют кипячением. Для каждо­го животного берут стерильную иглу.

У крупного рогатого скота и лошадей удобнее брать кровь с левой стороны. Волосы в месте взятия крови выстригают, опера­ционное поле дезинфицируют 3%-ным раствором фенола. По­мощник фиксирует животное, а оператор левой рукой зажимает яремную вену. Можно перетянуть шею животного резиновым жгутом. После наполнения вены правой рукой вводят в нее иглу — под острым углом к поверхности кожи по направлению к голове животного. Струю крови пускают по стенке пробирки, не допуская вспенивания. Не следует набирать кровь каплями. После взятия крови на пробирке закрепляют этикетку и надпи­сывают ее (простым карандашом), указывая номер пробы и ин­вентарный номер (кличку) животного.

При массовом взятии крови у овец оборудуют раскол, у кото­рого выкапывают яму глубиной 0,5-0,7 м. Оператор, встав в эту яму, сможет не нагибаться во время работы. Шерсть у овец обычно не выстригают, а раздвигают, вену пережимают пальцем.

Свиней обычно фиксируют за верхнюю челюсть с помощью веревочной или кожаной петли. Кровь чаще берут из хвостовой вены, прокалывая ее или обрезая кончик хвоста. Предварительно хвост обмывают и дезинфицируют, а после взятия крови прижи­гают рану настойкой йода. При необходимости перевязывают хвост.

Для свертывания крови и отстаивания сыворотки пробирки с кровью в течение 30-60 мин выдерживают при 20-30 °С, сгус­ток крови отделяют от стенок стальной спицей, а затем пробир­ки выдерживают при 4-10 °С. Через 20-24 ч отстоявшуюся сы­воротку сливают в сухие стерильные пробирки и направляют на исследование. В теплое время года сыворотки следует консерви­ровать. Для этого используют 5%-ный раствор фенола (на каж­дый миллилитр сыворотки — по одной капле при постоянном перемешивании) или сухую борную кислоту (2-4% к объёму сыворотки).

Кровь можно отправить на исследование и в цельном виде при условии быстрой доставки и предохранения от встряхива­ния. Пробирки увязывают по десяткам в соответствии с описью и укладывают в ящик в вертикальном положении. На дно ящика кладут слой ваты или насыпают опилки. В зимнее время необхо­димо предотвратить замерзание крови. Пробы направляют с со­проводительным документом, составленным по узаконенной форме.

Применение бруцеллина ВИЭВ для аллергической диагностики бруцеллеза у свиней. Аллергический метод основан на выявлении развивающейся у больных бруцеллезом животных повышенной чувствительности замедленного типа к специфическому аллерге­ну — бруцеллину ВИЭВ.

Для введения бруцеллина используют иглы для внутрикожных инъекций и шприцы, снабженные бегунком, вместимостью 1 или 2 мл. Можно применять безыгольные инъекторы. Шприцы и иглы перед использованием стерилизуют путем 30-минутного кипячения в дистиллированной или кипяченой воде без добавле­ния дезсредств. Во время исследования иглы меняют перед каж­дым наполнением шприца бруцеллином, а в промежутках между инъекциями иглу держат в ватном тампоне, смоченном 70%-ным спиртом. Бруцеллин в дозе 0,2 мл вводят внутрикожно с наруж­ной стороны ушной раковины, ближе к основанию уха. Кожу предварительно протирают ватой, смоченной спиртом или 3%-ным раствором борной кислоты. Правильность внутрикожного введения препарата подтверждается образованием бугорка разме­ром с горошину.

Реакцию на бруцеллин учитывают два раза: через 24 и 48 ч после введения аллергена — путем осмотра и пальпации места инъекции. У больных бруцеллезом свиней в месте введения бру­целлина развивается воспалительная реакция. Образуется плот­ная или тестоватая припухлость, обычно хорошо заметная при осмотре. Она может быть гиперемированной, а иногда с темно-красным пятном в центре отека (кровоизлияние). Если реакция недостаточно ясно выражена, место введения бруцеллина паль­пируют и сравнивают с кожей основания другого уха. Реакцию признают положительной, если выявляется хотя бы небольшое различие. У здоровых животных местная реакция не возникает.

Реагирующих животных метят и изолируют. Проведение ис­следования оформляют актом с приложением описи реагировав­ших животных (указывают инвентарный номер, пол и возраст животного, характер реакции на аллерген). После применения бруцеллина у животных можно в любые сроки брать кровь для исследования на бруцеллез серологическими методами.

Составление плана оздоровительных мероприятий в хозяйстве, неблагополучном по бруцеллезу. Комплексные планы мероприятий по оздоровлению поголовья животных в хозяйствах (населенных пунктах), неблагополучных по бруцеллезу, разрабатывают комис­сионно, с участием представителей государственной ветеринар­ной службы, местных органов санитарно-эпидемиологической службы, специалистов и руководителей неблагополучных хо­зяйств (владельцев животных). Конкретная база для разработки плана — результаты предварительного эпизоотологического и эпидемиологического обследования хозяйства (населенного пунк­та). Главные цели обследования — выяснение особенностей воз­никшего эпизоотического очага, выявление источников и путей заноса возбудителей бруцеллеза, путей распространения болезни в условиях данного хозяйства (населенного пункта). Уточняется ди­намика эпизоотического процесса, дается оценка степени распро­страненности и характеру течения болезни в обследуемом стаде, выявляются условия, способствующие перезаражению животных и создающие опасность заражения людей. Результаты эпизоотоло­гического обследования позволяют уточнить границы эпизооти­ческого очага, определить характер и степень угрозы для других животноводческих хозяйств, ферм, населенных пунктов данного района.

При проведении обследования учитывают, что одной из ос­новных причин возникновения новых очагов бруцеллеза являет­ся ввод в благополучные стада скрытых бруцеллоносителей, осо­бенно иммунотолерантного молодняка из хозяйств, которые ранее были неблагополучными. Активными источниками возбу­дителя инфекции могут стать зараженные быки, бараны, хряки-производители. Опасны контакты с неблагополучным поголо­вьем на пастбищах, при водопое, на скотопрогонных трассах, возможно заражение при использовании кормов, заготовленных в неблагополучной местности. Известна опасность молока, полу­ченного от больных животных. После возникновения первых случаев бруцеллеза перезаражение животных активизируется в период массовых отелов (ягнения, опоросов), поскольку при абортах и после них имеет место особенно обильное выделение бруцелл во внешнюю среду.

Соответственно при эпизоотологическом обследовании уточ­няют порядок комплектования стада, выясняют, откуда и когда поступали в хозяйство животные, подвергались ли они профи­лактическому карантинированию и контрольным исследованиям. При этом учитывают эпизоотическую обстановку в соседних хо­зяйствах и районе в целом, в других районах, с которыми под­держивались хозяйственно-экономические связи. Выясняют по­рядок первичной переработки и реализации продуктов животно­водства (в первую очередь молочной продукции), получают данные о вывозе животных и животноводческой продукции, о вывозе заготовленных в хозяйстве кормов (куда и когда).

Выясняют состояние кормовой базы хозяйства, организацию заготовки кормов (их происхождение), порядок использования пастбищ и водопоев, состояние пастбищ и водоисточников. Не менее важны сведения о системе содержания животных (общее, индивидуально-стойловое, пастбищное, лагерное, стойлово-пастбищное), системе выращивания молодняка, состоянии животно­водческих помещений, наличии ветеринарно-санитарных объек­тов и их состоянии, системе уборки и обеззараживания навоза и сточных вод, уборки последов, абортированных плодов, проведе­нии дезинфекционных работ.

Получают и анализируют данные о динамике эпизоотического процесса: даты и методы исследований животных, число выяв­ленных случаев болезни по половозрастным группам скота, число и даты учтенных абортов бруцеллезной этиологии и других клинических проявлений болезни, данные о передержке больных животных в общем стаде и т.д.

Использование комплекса данных, полученных при эпизоото­логическом обследовании, их анализ позволяют конкретизиро­вать основные элементы плана оздоровительных мероприятий, которые должны быть направлены на обеспечение купирования эпизоотического очага (предупреждение выноса возбудителя), на выявление и немедленное устранение источников возбудителя (больных животных), исключение возможности дальнейшего перезаражения поголовья и риска заражения людей, обеспечение уничтожения возбудителя в объектах внешней среды.

Перечень и основное содержание этих мероприятий определены соответствующими директивными документами (инструкции и на­ставления), но необходим учет местных природных и хозяйственно-экономических условий, учет особенностей эпизоотической обста­новки, сложившейся в неблагополучном хозяйстве и данном районе.

В план включают все необходимые ограничительные и оздо­ровительные мероприятия с обязательным указанием срока ис­полнения, ответственных лиц и непосредственных исполнителей.

В целях быстрого купирования возникшего эпизоотического очага предусматривают полный запрет на вывод и ввод воспри­имчивых животных, провоз и прогон животных по территории неблагополучного хозяйства, прекращение заготовки грубых кор­мов для вывоза в другие хозяйства и районы. Предусматривают также немедленную изоляцию и последующую сдачу на убой всех животных, реагировавших при исследованиях на бруцеллез, абортировавших или имеющих другие клинические признаки бо­лезни. Отдельными пунктами плана вводят учет всех случаев абортов, преждевременных родов, задержания последа, проведе­ние отелов (окота) в оборудованных отдельных помещениях. Оп­ределяют порядок уничтожения абортированных плодов, после­дов, проведения дезинфекции.

Предусматривают порядок переработки и обеззараживания молока и другой продукции животноводства. При оздоровлении неблагополучного стада с использованием противобруцеллезных вакцин определяют сроки вакцинации, ревакцинации и кон­трольных исследований. В случае сдачи всего неблагополучного поголовья на убой уделяют главное внимание санации животно­водческих помещений, прифермской территории, пастбищ, убор­ке и обеззараживанию навоза.

Очень важны организационно-хозяйственные мероприятия, такие, как строительство и реконструкция необходимых живот­новодческих, бытовых помещений и ветеринарно-санитарных объектов, приобретение спецодежды, спецобуви, предметов лич­ной гигиены, дезсредств. Обязательно предусматривают медико-санитарные мероприятия по профилактике заражения людей.