Ћекции.ќрг


ѕоиск:




 атегории:

јстрономи€
Ѕиологи€
√еографи€
ƒругие €зыки
»нтернет
»нформатика
»стори€
 ультура
Ћитература
Ћогика
ћатематика
ћедицина
ћеханика
ќхрана труда
ѕедагогика
ѕолитика
ѕраво
ѕсихологи€
–елиги€
–иторика
—оциологи€
—порт
—троительство
“ехнологи€
“ранспорт
‘изика
‘илософи€
‘инансы
’ими€
Ёкологи€
Ёкономика
Ёлектроника

 

 

 

 


¬ыделение вирусов и методы их индикации в культуре клеток




ƒл€ заражени€ используютс€ чувствительные к данному вирусу культуры с хорошо развитым монослоем клеток, наход€щиес€ в пробирках (флаконах).

ѕеред заражением клеток питательную среду удал€ют и в каждую пробирку (лунку планшета или флакон) внос€т по 0,1-0,2мл взвеси испытуемого материала, предварительно обработанного антибиотиками. ѕосле 30 - 60 мин. контакта вируса с клетками удал€ют избыток материала, внос€т по 1,0 - 1,5мл на пробирку поддерживающей среды и оставл€ют в термостате до вы€влени€ признаков репродукции вирусов.

 

‘≈Ќќћ≈Ќџ, ѕќ«¬ќЋяёў»≈ ¬џя¬»“№ ¬»–”— ¬  ”Ћ№“”–≈  Ћ≈“ќ 

1. ÷итопатический эффект (действие) Ц (÷ѕЁ или ÷ѕƒ), который €вл€етс€ следствием поражени€ клеток под действием размножающегос€ в них вируса.

÷ѕƒ может быть трех основных типов:

а) кругло- или мелкоклеточна€ дегенераци€;

б) образование гигантских много€дерных клеток - симпластообразование;

в) образование внутри€дерных или цитоплазматических включений вирусспецифических или неспецифических.

‘еномен гемадсорбции (–√адс)

ѕринцип метода: контакт клеток с эритроцитами приводит к адсорбции эритроцитов на поверхности клеток, пораженных вирусом с гемагглютинирующими свойствами. Ёффект можно увидеть при малом увеличении микроскопа (х80).    
положительна€ отрицательна€

 

ќбразование бл€шек - феномен ƒюльбекко

ѕринцип метода: монослой клеток после заражени€ вирусомзаливаютслоем полужидкого агара, в состав которого входит питательна€ среда и краситель нейтральный красный. ¬ тех зонах моносло€, где происходит размножение цитопатического вируса, группы разрушенных клеток не закисл€ют среду, выгл€д€т на розовом фоне прозрачными п€тнами.

‘еномен интерференции

ѕринцип метода: феномен интерференции используетс€ дл€ обнаружени€ вирусов, не дающих отчетливого ÷ѕƒ в культуре клеток. »сследуемую культуру повторно заражают вирусом, регул€рно вызывающим ÷ѕƒ. »ндикаторным €вл€етс€ ¬¬— - вирус везикул€рного стоматита. ѕри наличии в исследуемом материале нецитопатогенного вируса ÷ѕƒ у индикаторного ¬¬— также будет отсутствовать (клетка "зан€та" исследуемым вирусом).

 

3) ЋјЅќ–ј“ќ–Ќџ≈ ∆»¬ќ“Ќџ≈

»спользуют преимущественно новорожденных белых мышей, хом€ков, морских свинок, крыс€т. «аражение животных проводитс€ по принципу цитотропизма вируса: пневмотропные вирусы ввод€тс€ интраназально, нейротропные - интрацеребрально, дерматотропные - на кожу. »ндикаци€ вируса основана на про€влении признаков заболевани€ у животных, их гибели, патоморфологических изменени€х в ткан€х и органах, а также на положительной реакции гемагглютинации с экстрактами из органов.

 

—≈–ќЋќ√»„≈— »… ћ≈“ќƒ.

а). ƒл€ ранней диагностики заболевани€ определ€ют наличие IgM в сыворотке с помощью »‘ј или непр€мой –»‘.

б). ¬ серодиагностике вирусных инфекций используют подход Ђпарных сыворотокї, что позвол€ет определить нарастание титра (прирост антител) за определенный период заболевани€ с помощью набора вирусных диагностикумов. ѕарные сыворотки - две сыворотки, вз€тые от одного больного в начале заболевани€ и через 1-4 недели. —ерологические реакции (–ѕ√ј, –— , –“√ј, –Ќ, »‘ј и др.) став€т одновременно с двум€ сыворотками дл€ определени€ и сравнени€ их титров.

ƒиагностически значимым считают нарастание титра в 4 и более раз.

 

ќ—Ќќ¬Ќџ≈ —≈ћ≈…—“¬ј ¬»–”—ќ¬ (контрольна€)

ƒЌ - содержащие

ѕростые (без оболочек) ƒЌ - содержащие вирусы 1.јденовирусы Adenoviridae 2-х нитчата€ ƒЌ  2.ѕапилломавирусы Papillomaviridae 2-х нитчата€ ƒЌ  3.ѕолиомавирусы Poliomaviridae 2-х нитчата€ ƒЌ  4. ÷ирциновирусы Circinoviridae 1- нитчата€ ƒЌ  5.ѕарвовирусы Parvoviridae 1- нитчата€ ƒЌ  —ложные (с оболочками) ƒЌ - содерж. вирусы * ѕоксвирусы Poxviridae 2-х нитчата€ ƒЌ  * √ерпесвирусы Herpesviridae 2-х нитчата€ ƒЌ  * √епаднавирусы Hepadnaviridae 2-х нитчата€ кольцева€ ƒЌ  с 1 нитчатым участком

–Ќ - содержащие

ѕростые (без оболочек) –Ќ - содержащие вирусы 1.ѕикорнавирусы Picornaviridae 1-нитчата€ –Ќ  2. алицивирусы - Caliciviridae - 1-нитчата€ –Ќ  3.јстровирусы - Astroviridae - 1-нитчата€ –Ќ  4.–еовирусы - Reoviridae - 2-нитчата€ –Ќ  фрагментированна€ —ложные (с оболочками) –Ќ - содержащие вирусы *ќртомиксовирусы Orthоmyxoviridae 1-нитч.–Ќ  *ѕарамиксовирусы Paramyxoviridae 1-нитч. –Ќ  *“огавирусы Togaviridae 1-нитчата€ –Ќ  *–абдовирусы Rhabdoviridae 1-нитчата€ –Ќ  *‘иловирусы Filoviridae 1-нитчата€ –Ќ  *‘лавивирусы Flaviviridae 1-нитчата€ –Ќ  *–етровирусы Retroviridae 1-нитчата€ –Ќ  *јренавирусы Arenaviridae 1-нитчата€ –Ќ  * оронавирусы Coronaviridae 1-нитчата€ –Ќ  *Ѕунь€вирусы Bunyаviridae 1-нитчата€ –Ќ 

 

ƒ≈ћќЌ—“–ј÷»» —реды дл€ культивировани€ клеток: среда 199, раствор ’енкса, сыворотка, гидролизат лактальбумина, трипсин, раствор ¬ерсена, лейкоцитарный интерферон.





ѕоделитьс€ с друзь€ми:


ƒата добавлени€: 2015-11-05; ћы поможем в написании ваших работ!; просмотров: 1022 | Ќарушение авторских прав


ѕоиск на сайте:

Ћучшие изречени€:

Ћюди избавились бы от половины своих непри€тностей, если бы договорились о значении слов. © –ене ƒекарт
==> читать все изречени€...

1602 - | 1407 -


© 2015-2024 lektsii.org -  онтакты - ѕоследнее добавление

√ен: 0.011 с.