ПЕРЕЧЕНЬ КОНТРОЛЬНЫХ ВОПРОСОВ
1. Вирусы, природа и происхождение. История открытия. Этапы развития вирусологии. Понятие о вирионе, его структура. Химический состав и свойства вирусов.
2. Принципы классификации вирусов - критерии. Семейства РНК и ДНК-содержащих вирусов (контрольная).
3. Тропизм вирусов. Взаимодействие вирусов с чувствительными клетками - фазы.
4. Культивирование вирусов. Индикация и идентификация вирусов при культивировании их на клеточных культурах и курином эмбрионе. Клеточные культуры, линии клеток, получение, условия культивирования.
5. Классификация вирусных инфекций: а) на уровне клетки; б) на уровне организма.
6. Методы лабораторной диагностики вирусных инфекций. Прямые методы исследования клинического материала (обнаружение вирусов, вирусных антигенов или вирусных НК). Вирусологический метод диагностики. Серодиагностика вирусных инфекций.
7. Противовирусный иммунитет - факторы. Видовая резистентность. Неспецифические факторы антивирусной защиты (ингибиторы, интерферон, комплемент, фагоцитоз). Приобретенный иммунитет (гуморальные и клеточные механизмы).
8. Принципы специфической профилактики и терапии вирусных инфекций: вакцины, иммунные сыворотки (иммуноглобулины), интерфероны, этиотропная химиотерапия.
ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА
ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА ВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ
| Методы | Принцип |
| 1. Экспресс-диагностика | Выявление антигена вируса в исследуемом материале с помощью диагностических противовирусных сывороток в реакциях: РИФ, ИФА, РИА, встречного иммуноэлектрофореза (ВИЭФ), реакции пассивной гемагглютинации (РПГА), реакции торможения гемагглютинации (РТГА) и др.; |
| 2. Вирусологический метод | Культивирование вирусов в культурах клеток, куриных эмбрионах, лабораторных животных |
| 3. Серодиагностика | Выявление антител против вируса в сыворотке крови пациента с помощью диагностикумов, содержащих вирусы или их антигены в реакциях: ИФА, непрямой РИФ или в парных сыворотках в РН, РТГА, РПГА, РСК. |
1. Для ЭКСПРЕСС-ДИАГНОСТИКИ используют:
а) определение вирусного антигена в исследуемом материале с помощью диагностических противовирусных сывороток в реакциях: РИФ, ИФА, РИА, встречного иммуноэлектрофореза (ВИЭФ), реакции пассивной гемагглютинации (РПГА), реакции торможения гемагглютинации (РТГА) и др.;
| б) обнаружение включений в пораженных клетках макроорганизма с помощью световой или люминесцентной микроскопии; | 
| Тельца Бабеша-Негри в срезе гиппокампа. Окраска по Муромцеву. Увеличение х600 Streptococcus pyogenes (чистая культура) Окраска по Граму Увеличение _____________ |
в) обнаружение вирионов в патологическом материале с помощью электронной микроскопии или ИЭМ.
г) обнаружение геномов вируса молекулярно-генетическими методами: ПЦР; молекулярная гибридизация нуклеиновых кислот с помощью меченых зондов.
ВИРУСОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД
Основные этапы:
1. Забор исследуемого материала.
2.Выбор по принципу цитотропизма и получение чувствительной тест-системы, определение ее жизнеспособности.
3. Заражение выбранной системы.
4.Индикация вируса на основании обнаружения его нуклеиновой кислоты, антигенов, гемагглютинина, ЦПД, включений.
5. Идентификация и титрование вируса проводится на основании:
а) определения антигенов вируса с помощью иммунологических реакций (РИФ, ИФА, РПГА, РСК, РН, ВИЭФ и др.); б) патогистологического исследования органов и тканей; в) ЦПД; г) клинических симптомов, биологических проб (кератоконьюнктивальная и др.).
ВИРУСОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД (схема)
|
 |
Примечание: титрование и идентификация вируса проводится с использованием одного и того же феномена.
Культивирование вирусов
Вирусы - облигатные внутриклеточные паразиты, не способные размножаться ни в одной из бесклеточных сред. Для их культивирования используются: 1) куриные эмбрионы; 2) культуры клеток (тканей, органов); 3) лабораторные животные.
Куриный эмбрион (КЭ)
Обозначьте на рис. структурные элементы КЭ:
а) хорионаллантоисная оболочка (за скорлупой);
б) аллантоисная полость (игла в ней;
в) амнион (вокруг эмбриона);
г) желточный мешок (напротив эмбриона).
| Методы заражения куриных эмбрионов: | Материал вводят, вскрывая или не вскрывая скорлупу, в желточный мешок, на ХАО, в аллантоисную, амниотическую полости, тело эмбриона или эмбриону внутривенно. |
| Феномены, позволяющие выявить вирус в курином эмбрионе: | 1.Недоразвитие или 2. Гибель (выявляются при овоскопии). 3.Изменение оболочек (вирусы оспы, герпеса). 4.Обнаружение включений вирусов в световом, электронном микроскопах, антигенов в ИЭМ, РИФ и др. 5.РГА с амниотической, аллантоисной жидкостью. |
