Ћекции.ќрг


ѕоиск:




 атегории:

јстрономи€
Ѕиологи€
√еографи€
ƒругие €зыки
»нтернет
»нформатика
»стори€
 ультура
Ћитература
Ћогика
ћатематика
ћедицина
ћеханика
ќхрана труда
ѕедагогика
ѕолитика
ѕраво
ѕсихологи€
–елиги€
–иторика
—оциологи€
—порт
—троительство
“ехнологи€
“ранспорт
‘изика
‘илософи€
‘инансы
’ими€
Ёкологи€
Ёкономика
Ёлектроника

 

 

 

 


«начение мкò дл€ окр среды 2 страница




“.о., в результате взаимодействи€ »Ќ‘≈ ÷»ќЌЌќ√ќ ¬»–”—ј с # она либо погибает, либо остаЄтс€ живой, но больной.

Ќ≈»Ќ‘≈ ÷»ќЌЌџ≈ ¬»–”—џ проход€т те же стадии, но их Ќ  не блокирует, а встраиваетс€ в геном #, мирно с ней сосуществует и ни чем себ€ не про€вл€ет. ћатеринска€ # делитс€, а генетический материал вируса попадает в дочерние ##. “/е в!! называютс€ Ћј“≈Ќ“Ќџћ» (или — –џ“ќ… »Ќ‘≈ ÷»≈…), т.е. происходит персистенци€ в!. јктивизаци€ начинаетс€ обычно при ослаблении организма, Ќ  выходит из генома и начинает вести себ€ как вирулентный инфекционный вирус. »нтегрированный с клеточным геномом хоз€ина вирус наз ѕ–ќ¬»–”—ќћ, а процесс объединени€ в! с хр (Ќ ) наз-с€ ¬»–ќ√≈Ќ»я.

»сходы взаимодействи€ вируса с клеткой:

гибель или болезнь хоз€ина

персистирование, затем в! может активироватьс€ или # станет опухолевой.

јбортивный исход. ¬ирус проникает в #, но погибает и дальнейшего процесса не происходит.

25. ќсновные методы культивировани€ вирусов.  леточные культуры, их типы, способы вы€влени€ вирусов в клеточных культурах.

¬первые ## культуры были использованы в 50-х гг.  летки клсф-с€ на:

1) ѕ≈–¬»„Ќќ “–»ѕ—»Ќ»«»–ќ¬јЌЌџ≈. »х получают из эмбриональной тк чка, обезь€н и т.д. “к помещают в спец пит среду, освобождают от разл ненужных эл-тов, измельчают, а затем заливают р-ром трипсина в сосуде. ѕомещают на магнитную мешалку, сосуд встр€хиваетс€, а трипсин разрушает меж# св€зи Þ ## разъедин€ютс€. «атем провод€т центрифугирование: живые ## оседают, а мЄртвые Ц всплывают. Ќадосадочную жидкость с мЄртвыми ## сливают, осадок заливают пит средой, взбалтывают и получают взвесь, а затем подсчитывают кол-во ## в камере √ор€ева. ¬звеси помещают в разл Ємкости и добавл€ют спец ростковую среду, прчЄм на 1 мл пит среды должо быть ³ 2 млн #. ќни креп€тс€ к поверхности стекла, омываютс€ средой и начинают размножатьс€, покрыва€ пов сосуда ћќЌќ—Ћќ≈ћ. «атем ростковую среду сливают и добавл€ют поддерживающую (## не погибают, но и не размножаютс€) и ¬»–”—џ и культивируют 3-4 суток. ѕо св составу поддерживающие среды должны приближатьс€ к тк жидкости ћ Ò. ¬ их основе лежит солевой р-р ’энкса, содержащий в необх конц мин соли.   нему добавл€ют ј , витамины, пуриновые и пиримидиновые азотистые основани€, углеводы и индикатор (метиловый красный). ѕри рЌ=7 цв  –ј—Ќџ… (## неживые), при сдвиге в кислую сторону Ц ∆≈Ћ“≈≈“ (если ## живые, то выдел€ютс€ кислые продукты их жизнеде€тельности). ѕри накоплении большого кол-вапродуктов обмена, нужно мен€ть среду.

≈сли к поддерживающей среде добавить —џ¬ќ–ќ“ ”  –ќ¬», в к/й содержитс€ спец белок ѕ≈“”»Ќ, стимулирующий размножение (чаще всего исп сыв эмбрионов  –—), то получают ростковую среду.

ѕервично трипсинизированные культуры используютс€ “ќЋ№ ќ 1 –ј«.

2) ѕќЋ”ѕ≈–≈¬»¬ј≈ћџ≈  Ћ≈“ ». »х можно перевивать 50-100 раз. ¬ основном это диплоидные ##.

3) ѕ≈–≈¬»¬ј≈ћџ≈ (Ѕ≈——ћ≈–“Ќџ≈) Ц это раковые клетки: Hela, Hep-1, Hep-2 Ц были получены в 50-х гг, затем их посто€нно пересеивали. ¬ этом случае из старой пробирки выливают пит среду и добавл€ют ¬≈–—≈Ќ, под его вли€нием ## отлипают. ¬звесь клеток с этим в-вом центрифугируют, ## оседают, версен сливают и добавл€ют поддерживающий пит раствор. “.о., снова получают готовую культуру.

¬ирусы в клеточной культуре вы€вл€ют по их цитопатическому действию:

1) по образованию ими на среде сплошного (газонного) роста бесклеточных "бл€шек"

2) по вакуолизации клеток культуры

3) по€влению клеточных включений

“акже используютс€ электронна€ микроскопи€ и серологические реакции.

26. Ѕактериофаги. ћорфологи€, взаимодействие с клеткой, культивирование, практическое использование.

Ѕактериофаги (греч. phagos Ц пожирающий) Ц это в!!, паразитирующие на б!!, были открыты 1917 г. ¬ насто€щее врем€, кроме бактериофагов, известны фаги микоплазм, грибов, дрожжей, синезеленых водорослей.

—троение и химический состав фагов.  ак в! имеет очень малые размеры, примерно 100-200 нм. –азличают простые и сложные, –Ќ Ц и ƒЌ Цсодержащие фаги. ѕростые –Ќ Цфаги имеют круглую или нитевидную форму. Ќаиболее хорошо изученные сложные фаги эшерихий имеют вид барабанной палочки с шестигранной головкой, в которой находитс€ ƒЌ . »меют отростки, к/е состо€т из полого стержн€, снаружи покрытого сократительным чехлом. Ќа дистальном конце отростка находитс€ шестиугольна€ базальна€ пластинка с шестью отход€щими от нее нит€миЦрецепторами.

‘азы взаимодействи€ фага с бактери€ми. ѕри эффективном взаимодействии сложный фаг эшерихий адсорбируетс€ на бактери€х дистальным концом отростка. ѕри этом изЦпод его базальной пластинки выдел€етс€ лизоцим, который вызывает образование в оболочке эшерихий отверсти€. ¬след за этим происходит сокращение головки и чехла фаговой частицы, проникновение через цитоплазматическую мембрану кончика его стержн€ и выход в цитоплазму фаговой ƒЌ . ѕосле ее введени€ следует фаза смены информации и последующий синтез ƒЌ  и белка фага. Ќа заключительном этапе взаимодействи€ фага с бактерией происходит самосборка фаговых частиц.

—ледствие взаимодействи€ фага с бактерией. ѕолный цикл развити€ фагов продолжаетс€ до 1,5ч, в течение которых образуетс€ 100Ц200 фаговых частиц, что заканчиваетс€ лизисом бактерий под вли€нием фагового лизоцима. ‘аги, обусловливающие лизис микробов и формирование новых фаговых корпускул, называютс€ вирулентными. Ќар€ду с вирулентными в природе имеютс€ умеренные фаги, их взаимодействие с бактери€ми про€вл€етс€ в двух формах: одни штаммы или клетки определенного вида бактерий они разрушают, в другие проникают, но гибели не вызывают. ¬ последнем случае геном умеренного фага интегрирует в геном бактерии и в дальнейшем воспроизводитс€ вместе с ним при делении #. ”меренный фаг, наследственные детерминанты к/го объединились с бактериальными, называютс€ профагом; бактерии, содержащие профаг, Ц лизогенными, а само €влениеЦ лизогенией.

—в€зь профага с бактерией очень прочна€ и в естественных услови€х нарушаетс€ оч редко (спонтанна€ продукци€ фага). „астоту отщеплени€ профага от бактериальной хромосомы можно увеличить, воздейству€ на лизогенные бактерии ультрафиолетовыми лучами, ионизирующей радиацией, магнитным полем и химическими мутагенами (индукци€ лизогенных бактерий).

¬ы€вление.  ак и в!! животных, фаги обнаруживаютс€ под электронным микроскопом и по эффекту их действи€ на чувствительные микробы. ѕри этом, размножа€сь в бульонных культурах, они вызывают просветление среды, а на агаровых газонах подавл€ют рост бактерий в местах их внесени€ или формируют колонии в виде мелких стерильных (негативных) п€тен Ц бл€шек фага. ѕодобно колони€м бактерий, морфологи€ бл€шек специфична дл€ различных фагов. ¬ирулентные фаги обычно образуют прозрачные бл€шки, а умеренные Ц мутные.

–аспространение. ‘аги обнаруживаютс€ во всех объектах окружающей среды, в которых обитают бактерии, актиномицеты, грибы, микоплазмы. Ќайдены они в воде, почве, молоке, в различных выделени€х человека и животных.

ѕолучение и практическое применение. ‘аги получают путем фильтрации и очистки лизированных ими бульонных культур бактерий. √отовый препарат фага представл€ет собой прозрачную желтоватую жидкость. ¬ цел€х повышени€ стабильности фильтрат фаголизатов таблетируют.

»спользуютс€ фаги главным образом дл€ »ƒ≈Ќ“»‘» ј÷»» » ¬Ќ”“–»¬»ƒќ¬ќ… ƒ»‘‘≈–≈Ќ÷»ј÷»» ћ» –ќќ–√јЌ»«ћќ¬. ƒл€ этого примен€ют наборы типоспецифических фагов, лизирующих определенные варианты бактерий. ќсобую ценность метод фаготипировани€ приобретает при эпидемиологическом обследовании очага, где с его помощью удаетс€ вы€вить источники и пути передачи инфекции.

”зкоспецифический спектр действи€ фагов ограничивает широкую возможность их использовани€ как Ё“»ќ“–ќѕЌџ’ ѕ–≈ѕј–ј“ќ¬. ƒл€ лечени€ в основном примен€ют стафилококковый и стрептококковый бактериофаги и колибактериофаг. ќни представл€ют собой фильтраты фаголизатов соответствующих бактерий, их выпускают в запа€нных ампулах или флаконах. Ёти препараты назначают при нагноительных процессах, вызванных фагочувствительными штаммами стафилококка, стрептококка и кишечной палочки, ороша€ ими инфицированную рану или обкалыва€ очаг воспалени€.

¬ цел€х ѕ–ќ‘»Ћј “» » фагирование в насто€щее врем€ провод€т только в очагах брюшного тифа и дизентерии. ¬зрослые люди, находившиес€ в контакте с больными, принимают указанные бактериофаги внутрь за 1,5Ц2 ч до еды по 1Ц2 таблетке (в дизентерийном очаге 2Ц3 раза с интервалом 3 дн€).

27. ћетоды микроскопии в микробиологии. »х практическое применение.

–азмеры микробов, имеющих клеточное строение, составл€ют 0,2Ц20 мкм и они легко обнаруживаютс€ в иммерсионном микроскопе. ¬ирусы во много раз меньше. ƒиаметр самых больших из них, например вируса натуральной оспы, около 300 нм, а у самых мелких составл€ет 20Ц30 нм. ¬виду этого дл€ вы€влени€ вирусов используютс€ электронные микроскопы.

¬ микробиологических исследовани€х примен€ют световые и электронные микроскопы; методы оптической и электронной микроскопии.

ќптический микроскоп. Ќаиболее важной оптической частью микроскопа €вл€ютс€ объективы, которые дел€тс€ на сухие и иммерсионные.

—ухие объективы с относительно большим фокусным рассто€нием и слабым увеличением примен€ютс€ дл€ изучени€ микроорганизмов, имеющих крупные размеры (более 10Ц20 мкм), иммерсионные (лат. immersio Ц погружение) с фокусным рассто€нием Ц при исследовании более мелких микробов.

ѕри микроскопии иммерсионным объективом х90 об€зательным условием €вл€етс€ его погружение в кедровое, персиковое или в вазелиновое масло, показатели преломлени€ света у которых близки предметному стеклу, на котором делают препараты. ¬ этом случае падающий на препарат пучок света не рассеиваетс€ и, не мен€€ направлени€, попадает в иммерсионный объектив. –азрешающа€ способность иммерсионного микроскопа находитс€ в пределах 0,2 мкм, а максимальное увеличение объекта достигает 1350.

ѕри использовании иммерсионного объектива вначале центрируют оптическую часть микроскопа. «атем поднимают конденсор до уровн€ предметного столика, открывают диафрагму, устанавливают объектив малого увеличени€ и при помощи плоского зеркала освещают поле зрени€. Ќа предметное стекло с окрашенным препаратом нанос€т каплю масла, в которую под контролем глаза осторожно погружают объектив, затем, поднима€ тубус, смотр€т в окул€р и вначале макроЦ, а потом микровинтом устанавливают четкое изображение объекта. ѕо окончании работы удал€ют салфеткой масло с фронтальной линзы объектива.

ћикроскопи€ в темном поле зрени€ проводитс€ при боковом освещении и обычно примен€етс€ при изучении подвижности бактерий или обнаружении патогенных спирохет, поперечник которых может быть меньше 0,2 мкм. „тобы получить €ркое боковое освещение, обычный конденсор замен€ют специальным параболоидомЦконденсором, в котором центральна€ часть нижней линзы затемнена, а бокова€ поверхность зеркальна€. Ётот конденсор задерживает центральную часть параллельного пучка лучей, образу€ темное поле зрени€.  раевые лучи проход€т через кольцевую щель, попадают на боковую зеркальную поверхность конденсора, отражаютс€ от нее и концентрируютс€ в его фокусе. ≈сли на пути луча нет какихЦлибо частиц, он преломл€етс€, пада€ на боковую зеркальную поверхность, отражаетс€ от нее и выходит из конденсора.  огда луч встречает на своем пути микробы, свет отражаетс€ от них и попадает в объектив Ц клетки €рко свет€тс€. “ак как дл€ бокового освещени€ необходим параллельный пучок света, примен€етс€ только плоское зеркало микроскопа. ќбычно исследование в темном поле зрени€ проводитс€ под сухой системой. ѕри этом небольшую каплю материала помещают на предметное стекло и накрывают покровным, не допуска€ образовани€ пузырьков воздуха.

‘азовоЦконтрастна€ и аноптральна€ микроскопи€ основаны на том, что оптическа€ длина пути света в любом веществе зависит от показател€ преломлени€. Ёто свойство используют с целью увеличить контрастность изображени€ прозрачных объектов, какими €вл€ютс€ микробы, т. е. дл€ изучени€ деталей их внутреннего строени€. —ветовые волны, проход€ через оптически более плотные участки объекта, отстают по фазе от световых волн, не проход€щих через них. ѕри этом интенсивность света не мен€етс€, а только измен€етс€ фаза колебани€, не улавливаема€ глазом и фотопластинкой. ƒл€ повышени€ контрастности изображени€ фазовые колебани€ при помощи специальной оптической системы превращаютс€ в амплитудные, хорошо улавливаемые глазом. ѕрепараты в световом поле зрени€ станов€тс€ более контрастными Ц положительный контраст; при отрицательном фазовом контрасте на темном фоне виден светлый объект. ¬округ изображений нередко возникает ореол.

Ѕольшей четкости изображени€ малоконтрастных живых микробов (даже некоторых вирусов) достигают в аноптральном микроскопе. ќдной из важнейших его деталей €вл€етс€ линза объектива, расположенна€ вблизи Ђвыходногої зрачка, на которую нанесен слой копоти или меди, поглощающий не менее 10 % света. Ѕлагодар€ этому фон пол€ зрени€ приобретает коричневый цвет, микроскопируемые объекты имеют различные оттенки Ц от белого до золотистоЦкоричневого.

Ћюминесцентна€ микроскопи€ основана на способности некоторых клеток и красителей светитьс€ при попадании на них ультрафиолетовых и других коротковолновых лучей света. Ћюминесцентные микроскопы представл€ют собой обычные световые микроскопы, снабженные €рким источником света и набором светофильтров, которые выдел€ют коротковолновую часть спектра, возбуждающую люминесценцию. ћежду зеркалом микроскопа и источником света устанавливают синеЦфиолетовый светофильтр (”‘—Ц3, ‘—Ц1 и пр.). Ќа окул€р надевают желтый светофильтр (∆—Ц3 или ∆—Ц18).

–азличают собственную (первичную) флюоресценцию и наведенную (вторичную). “ак как больша€ часть микробов не обладает собственной флюоресценцией, они обрабатываютс€ красител€ми, способными флюоресцировать (вторична€ люминесценци€). ¬ качестве флюорохромов используют аурамин (дл€ обработки микобактерий туберкулеза), акридин желтый (гонококки), корифосфин (коринебактерии дифтерии), флюоресцеинизотиоцианат (дл€ мечени€ антител).

Ћюминесцентна€ микроскопи€ отличаетс€ р€дом преимуществ: дает цветное изображение и значительную контрастность; позвол€ет обнаружить живые и погибшие микроорганизмы, прозрачные и непрозрачные объекты; установить локализацию бактерий, вирусов и их антигенов в пораженных клетках организма.

Ёлектронный микроскоп. ¬ электронном микроскопе вместо света используетс€ поток электронов в безвоздушной среде, на пути которых находитс€ анод. »сточником электронов €вл€етс€ электронна€ пушка (вольфрамова€ нить, разогреваема€ до 2500Ц2900 ∞—). ќптические линзы заменены электромагнитами. ћежду вольфрамовой нитью и анодом возникает электрическое поле в 30 000Ц50 000 ¬т, что сообщает электронам большую скорость, и они, проход€ через отверстие анода, попадают в первую электромагнитную линзу (конденсор). Ёлектронные лучи на выходе из конденсора собираютс€ в плоскости исследуемого объекта. ќни отклон€ютс€ под разными углами за счет различной толщины и плотности препарата и попадают в объективную электромагнитную линзу, снабженную диафрагмой. Ёлектроны, незначительно отклонившиес€ при встрече с объектом, проход€т через диафрагму, а отклонившиес€ под большим углом Ц задерживаютс€, благодар€ чему обеспечиваетс€ контрастность изображени€. Ћинза объектива дает промежуточное увеличение изображени€, которое наблюдаетс€ через смотровое окно. ѕроекционна€ линза может увеличивать изображение во много раз. Ёто изображение принимаетс€ на флюоресцирующий экран и фотографируетс€. –азрешающа€ способность электронных микроскопов равна 1,0 Ц0,14нм

28. ѕон€тие о гене и этапах развити€ генетической системы. √енетический аппарат бактерий.

√ен Ц стр.-функц. единица хромосомы, отвечающа€ за наличие и функционирование определенного белка в клетке (организме).

¬ бактериальной хромосоме выдел€ют р€д участков:

1) промотор Ц участок ƒЌ , распознаваемый ƒЌ -зависимой-–Ќ -полимеразой.

2) оператор Ц участок ƒЌ , промотором и структурным геном, с которым св€зываетс€ белок-репрессор.

3) ќперон Ц содержит регул€торный ген, промоторный участок, область оператора и последовательность генов, регулируемых данным опероном. ќн €вл€етс€ функц.-генетической единицей.

√ен-регул€тор кодирует белок-репрессор, св€зывающий оператор и индуктор. Ќет индуктора Ц оперон "молчит", по€вл€етс€ индуктор Ц оперон "работает".

Ѕелок-репрессор Ц распознает нуклеотидную последовательность ƒЌ .

(Lac-оперон Ц индуцибельный оперон, контролирующий синтез ферментов по обеспечению бакт. клетки лактозой).

Ѕактерии относ€тс€ к царству прокариот, отличаютс€ от эукариот тем, что содержат 1 ’–, к/€ представлена 2-хцепочечной ƒЌ , кольцевидной формы, в ней содержитс€ вс€ наследственна€ информаци€ (√≈Ќќ“»ѕ). ќна фиксируетс€ на мезосоме, и при делении # мезосома перемещает нити ƒЌ  в дочерние ##. »ногда этот процесс опережает деление самой клетки, тогда в 1 Ѕ! может оказатьс€ 2 хр. ’ромосома б! не содержит √»—“ќЌќ¬, в # нет ÷≈Ќ“–ќћ≈–ќ¬, делитс€ только ћ»“ќ«ќћ. “акже Ѕ! отличаютс€ –ј«ћ≈–јћ».

¬ ƒЌ  содержатс€ интроны (»Ќ‘ќ–ћј“»¬Ќџ≈) и экзоны (ћќЋ„јў»≈ ”„ј—“ »). ” прокариот имеютс€ особые гены, способные перемещатьс€ вдоль ƒЌ  и встраиватьс€ в новые места. Ёто Ђпрыгающиеї гены Ц “–јЌ—ѕќ«ќЌџ (включают около 2 тыс пар Ќ т). ќни обеспечивают устойчивость к антибиотикам, изменчивость и ћт (встраива€сь в новые места во врем€ транскрипции, нарушают последовательность Ќ т). ѕо обе стороны от транспозона расположены 2 одинаковые последовательности Ќ т (>800) Ц это ISЦЁЋ≈ћ≈Ќ“џ (У¬—“ј¬ќ„Ќџ≈ ѕќ—Ћ≈ƒќ¬ј“≈Ћ№Ќќ—“»Ф), к/е содержат гены, не контролирующие признаки бактерий, но встраива€сь в ƒЌ  вместе с транспозонами или без них перестраивают геном → мутации.

¬ цтпл Ѕ! м.б. доп ј¬“ќЌќћЌџ≈ уч-ки ƒЌ , имеющие 2-хцепочечную структуру и пальцевидную форму, но в сотни раз < основной ƒЌ . Ёто ѕЋј«ћ»ƒџ, в 1# их м.б. до 20 штук. ќни не об€зательны дл€ жизни #, но и без них # нормально функционировать не может. ѕлазмиды обладают след св!!:

-  онтролируют отдельные пр!! Ѕ#

- —пособны интегрировать с хромосомой # и выходить из еЄ состава.

- —пособны к транслокации, т.е. к самосто€тельному перемещению из 1 # в др (“–јЌ—ћ»——»¬Ќџ≈ или  ќЌЏё√ј“»¬Ќџ≈ плазмиды) или в составе хромосомы.

29. ¬нехромосомные материалы ƒЌ . ѕлазмиды, транспозоны, инсервационные последовательности. –оль плазмид в изменчивости бактерий, виды плазмид.

” прокариот имеютс€ особые гены, способные перемещатьс€ вдоль ƒЌ  и встраиватьс€ в новые места. Ёто Ђпрыгающиеї гены Ц “–јЌ—ѕќ«ќЌџ (включают около 2 тыс пар Ќ т). ќни обеспечивают устойчивость к антибиотикам, изменчивость и ћт (встраива€сь в новые места во врем€ транскрипции, нарушают последовательность Ќ т). ѕо обе стороны от транспозона расположены 2 одинаковые последовательности Ќ т (>800) Ц это ISЦЁЋ≈ћ≈Ќ“џ (У¬—“ј¬ќ„Ќџ≈ ѕќ—Ћ≈ƒќ¬ј“≈Ћ№Ќќ—“»Ф), к/е содержат гены, не контролирующие признаки бактерий, но встраива€сь в ƒЌ  вместе с транспозонами или без них перестраивают геном → мутации.

¬ цтпл Ѕ! м.б. доп ј¬“ќЌќћЌџ≈ уч-ки ƒЌ , имеющие 2-хцепочечную структуру и пальцевидную форму, но в сотни раз < основной ƒЌ . Ёто ѕЋј«ћ»ƒџ, в 1# их м.б. до 20 штук. ќни не об€зательны дл€ жизни #, но и без них # нормально функционировать не может. ѕлазмиды обладают след св!!:

-  онтролируют отдельные пр!! Ѕ#

- —пособны интегрировать с хромосомой # и выходить из еЄ состава.

- —пособны к транслокации, т.е. к самосто€тельному перемещению из 1 # в др (“–јЌ—ћ»——»¬Ќџ≈ или  ќЌЏё√ј“»¬Ќџ≈ плазмиды) или в составе хромосомы.

—уществует множество ¬»ƒќ¬ плазмид, например:

RЦплазимда Ц резистивные, состо€т из 2 основных генов. ќдин отвечает за конъюгативные св!! плазмиды, др Ц за устойчивость к лек-вам (антибиотикам), чем больше генов, тем к большему числу препаратов устойчив мкÒ.

FЦплазимда Ц фертильность (плодовитость). ќна определ€ет пол Ѕ#. ≈сли она есть в #, то это F+ клетка (♂), если нет, то FЦ (♀). Ёта плазимда может перемещатьс€ из # в #, при этом если в FЦ, то она становитс€ F+. FЦплазимда контролирует образование на поверхности бактерии особых —≈ —Цѕ»Ћ≈… Ц полый трубочки, через которые при размножении перемещаетс€ генетический материал. „асто встраиваетс€ в основную хромосому клетки.

ColЦплазимда Ц получила название от E.coli, у к/й они впервые были обнаружены.  онтролирует выработку токсических белков Ц Ѕј “≈–»ќ÷»Ќќ¬, применительно к разным видам бактерий имеют свои названи€, например, E.coli Ц колицины. Ѕактериоцины губительно д-ют на др Ѕ!! особенно в пределах семейства, что даЄт селективное преимущество и позвол€ет расшир€ть своЄ жизненное пространство.

ѕлазимды, контролирующие образование адгезинов Ц спец выростов, с пом к/х Ѕ! крепитс€ к поверхности # (особенно важно при колонизации слизистых оболочек), это м.б. ѕ»Ћ» јƒ√≈«»» млм др структуры.

EntЦплазимда Ц содержит информацию об ЁЌ“≈–ќ“ќ —»Ќј’, вызывающих диаррейные состо€ни€, т.к. токсичны дл€ ## слизистой ∆ “.

HlyЦплазимда Ц информаци€ о синтезе √≈ћќЋ»«»Ќќ¬ Ц это токсины, способные разрушать мембрану эритроцитов и вызывать гемолиз. — их помощью мкÒ получает Fe, необходимое дл€ жизнеде€тельности.

VirЦплазимда Ц ¬»–”Ћ≈Ќ“Ќќ—“№.

¬ качестве плазмид рассматриваетс€ и геном бактериофага, если он располагаетс€ автономно в цитоплазме, а не встроен в хромосому.

30. ѕон€тие о генотипе и фенотипе. ћодификационна€ и генотипическа€ изменчивость бактерий.

√енотип Ц совокупность всех генов, присущих данному организму, т.е. его генетическа€ конституци€.

‘енотип Ц внешнее, видимое про€вление генотипа, обусловленное им и воздействием окружающей среды.

»«ћ≈Ќ„»¬ќ—“№ Ц совокупность различий по признаку м/у ÒÒ одного вида или попул€ции.

‘енотипические изменени€ Ц ћќƒ»‘» ј÷»яћ», при этом изменений ƒЌ  не происходит, и вскоре они утрачиваютс€. ћодификации возникают в ответ на изменение условий окр среды и позвол€ют мкÒ быстро адаптироватьс€ и сохран€ть свою жизнеспособность. ѕро€вл€ютс€ в изменении морфологических, Ѕ’ и других признаков, после устранени€ действи€ фактора, происходит реверси€.

¬ основе Ц индукци€ и репресси€ соответствующих генов (например, E.coli только в присутствии лактозы синтезирует необходимые ферменты, стафилококки Ц в присутствии пенициллина синтезируют разрушающий его фермент).

  модификаци€м можно отнести включение ЂћќЋ„јў»’ї √≈Ќќ¬, в результате чего происходит смена их антигенов в ходе инфекционного заболевани€.

ћодификации могут возникать под непосредственным действием антибиотиков, при этом образуютс€ L-формы, лишенные # стенки. ќни могут сохран€тьс€ и даже размножатьс€ внутри ## хоз€ина, после прекращени€ действи€ антибиотика вновь реверсировать к исходной форме.

ћ”“ј÷»» Ц изменени€ в структуре ƒЌ , закрепл€ютс€ и прередаютс€ по наследству.  лассифицируют по происхождению, характеру изменений в структуре ƒЌ , фенотипическим последстви€м и др.

ѕо ѕ–ќ»—’ќ∆ƒ≈Ќ»ё мутации подраздел€ют на:

спонтанные Ц составл€ют естественный фон. ќни по€вл€ютс€ под вли€нием разных причин: ќЎ»Ѕ » в репарирации или репликации ƒЌ , ошибочное включени€ в дочернюю цепь Ќ≈ ќћѕЋ≈ћ≈Ќ“ј–Ќќ√ќ јќ (ј=“, √≡÷), »Ќ—≈–“ј÷»ќЌЌџ≈ мутации (insertion Ц вставка, возникают при встраивании в хромосому микробной # Is-последовательностей, транспозонов и плазмид, при наличии √≈Ќќ¬-ћ”“ј“ќ–ќ¬ частота мутаций увеличиваетс€ в >100 раз).

индуцированные Ц получают под вли€нием мутагенов.

ѕо  ќЋ»„≈—“¬” ћ”“»–ќ¬ј¬Ў»’ √≈Ќќ¬:

√≈ЌЌџ≈ Ц затрагивают один ген, чаще всего Ц точковые,

“очковые Ц замену или вставку пары јќ в ƒЌ  → изменение 1 кодона Þ вместо одной ј  кодируетс€ друга€ или нонсенскодон (нонсенсмутаци€) Ц это ѕ–яћјя ћт. ¬последствии может возникнуть вторична€ (ќЅ–ј“Ќјя) мутаци€ в этом же гене → восстановление дикого генотипа и фенотипа.

¬ставка или выпадение одной пары јќ → изменение всех последующих кодонов в пределах 1 гена (ћт со сдвигом считывани€).

хромосомные Ц распростран€ютс€ на несколько генов, возникают в результате выпадени€ нуклеотидов (ƒ≈Ћ≈÷»я), поворота участка ƒЌ  на 180∞ (»Ќ¬≈–—»я), повторени€ фрагмента ƒЌ  (ƒ”ѕЋ» ј÷»я). ќдин из механизмов св€зан с перемещением Is-ѕќ—Ћ≈ƒќ¬ј“≈Ћ№Ќќ—“≈… и “–јЌ—ѕќ«ќЌќ¬ из одного участка ƒЌ  в другой или из хромосомы в плазмиду и наоборот → нарушаетс€ функци€ гена.

ѕо ‘≈Ќќ“»ѕ»„≈— »ћ ѕќ—Ћ≈ƒ—“¬»яћ:

Ќейтральные Цфенотипически не про€вл€ютс€.

”словно-летальные Ц привод€т к изменению функциональной активности фермента. ¬ зависимости от условий окр среды мкÒ могут сохран€ть свою жизнеспособность или утрачивать ее. “ак, например, ts-мутанты (температурочувствительные) могут синтезировать ферменты, активные при 37∞—, но неактивные при 42 ∞—, у Ѕ!! дикого типа Ц активны при обеих t∞C.

Ћетальные Ц характеризуютс€ полной утратой способности синтезировать жизненно важные ферменты (особенно ƒЌ -полимераз).

ћутации про€вл€ютс€ в фенотипе в виде утраты или изменени€ морфологических и Ѕ’ признаков: жгутиков, пилей, капсулы, # стенки; способности ферментировать углеводы, синтезировать опред ј , витамины и другие соединени€, устойчивость к лекарствам или дезинфектантам и т. д. Þ ауксотрофы, растут только в среде с готовым продуктом.

ƒействие мутации на трансл€цию:

1. Ѕессмысленные (missens) мутации

2. Frame-shift мутации Ц со сдвигом считывани€ и изменением всех последующих кодонов.

3. —упрессорные Ц восстан. функции генов, инактив-ых предыдущей мутацией

4. ћутации на клеточном уровне Ц можно вы€вить, если вызывает фенотипические изменени€

5. ћутации с приобретением (способности синтезировать активный фермент), лаг-фазам между мутацией и синтезом фермента отсутствует.

6. ћутации с утратой Ц вызывает прекращение синтеза к.-л. фермента, а клетка сохран€ет функц. активность. ≈сли рост клетки продолжаетс€, то кол-во фермента умен-с€ с каждым делением в 2 раза.

7. »зменени€ в виде трансдукции, трансформации, коньюгации.

31. √енетические рекомбинации (трансдукци€, конъюгаци€, трансформаци€).

√≈Ќ≈“»„≈— »≈ –≈ ќћЅ»Ќј÷»» у эукариот совершаютс€ в процессе полового размножени€ путем взаимного обмена фрагментами хромосом, при этом из двух родительских хромосом образуютс€ две рекомбинантные, т.е. возникают две рекомбинантные особи.

” прокариотов нет полового размножени€ Þ в результате внутригеномных перестроек: изменение локализации генов в пределах хромосомы, или при проникновении в # реципиента части ƒЌ  донора → формирование мерозиготы, т.е. образуетс€ только ќƒ»Ќ –≈ ќћЅ»Ќј“.

√ен– происход€т при участии ферментов в пределах отдельных генов или групп сцеплений генов. —уществуют специальные RECЦ√≈Ќџ, определ€ющие способность бактерий к рекомбинаци€м. ѕередача генетического материала от Ѕ! к Ѕ! происходит путем трансформации, трансдукции и конъюгации, а плазмидных генов - путем трансдукции и конъюгации.

“–јЌ—‘ќ–ћј÷»я Ц непосредственна€ передача генетического материала (фрагмента ƒЌ ) донора –ец#. (¬первые √риффитс Ц опыт с живым авирулентным бескапсульным штаммом пневмококка, к/й стал вирулентным при обработке экстрактом убитых капсульных пневмококков.)

— донорной ƒЌ  в реципиентную клетку обычно передаетс€ только один ген, т.к. фрагмент ƒЌ , который может проникнуть в –ец# очень маленький. “рансформации поддаЄтс€ только часть клеток Ѕ!! попул€ции Ц  ќћѕ≈“≈Ќ“Ќџћ». —осто€ние компетентности (когда стенка Ѕ! проницаема дл€ высокополимерных (ћг=0,5Ц1 млн) фрагментов ƒЌ ) возникает обычно в конце LOGЦ‘ј«џ.

‘азы процесса трансформации:

адсорбци€ ƒЌ -донора на –ец#;

проникновение ƒЌ  внутрь –ец# и деспирализаци€ ƒЌ .

соединение любой из двух нитей ƒЌ  донора с гомологичным участком хромосомы реципиента и последующа€ рекомбинацией.

Ёффективность зависит от —“≈ѕ≈Ќ» √ќћќЋќ√»„Ќќ—“» ƒЌ  донора и реципиента, что определ€ет конечный результат, т. е. количество формирующихс€ рекомбинантов (трансформантов) Þ межвидова€ трансформаци€ происходит гораздо реже, чем внутривидова€.

“–јЌ—ƒ” ÷»я Ц передача генетического материала с помощью фагов. –азличают три типа трансдукции:

Ќеспецифическа€ (обща€). ¬ момент сборки фаговых частиц в их головку может проникнуть ЋёЅќ… фрагмент ƒЌ  Ѕ!Цдонора. ¬месте с фаговой ƒЌ  перенос€тс€ любые гены донора и включаютс€ в гомологичную область ƒЌ  –ец# путем рекомбинации. ‘аги только перенос€т генетического материала

—пецифическа€ Ц фаг переносит ќѕ–≈ƒ≈Ћ≈ЌЌџ≈ гены при выщеплении профага из Ѕ! хромосомы вместе с р€дом расположенными генами, при этом фаг становитс€ дефектным. ѕри взаимодействии фага с –ец# происходит включение гена донора и дефектного фага в хромосому –ецЅ!, а Ѕ!! станов€тс€ невосприимчивыми к последующему заражению вирулентным фагом.





ѕоделитьс€ с друзь€ми:


ƒата добавлени€: 2015-11-05; ћы поможем в написании ваших работ!; просмотров: 323 | Ќарушение авторских прав


ѕоиск на сайте:

Ћучшие изречени€:

¬ моем словаре нет слова Ђневозможної. © Ќаполеон Ѕонапарт
==> читать все изречени€...

1237 - | 1207 -


© 2015-2024 lektsii.org -  онтакты - ѕоследнее добавление

√ен: 0.06 с.