Методика проведения исследования

    ЭНТЕРОтест 24 - на каждую исследуемую культуру один трехрядный стрип, рамка для ЭНТЕРОтест 24, стерильный физио­логический раствор (рН 6,5-7,2), диагностические полоски ОКСИ-тест, реактивы для тестов индол, фенилаланин, ацетоин, оксидаза, парафиновое масло и стандарт мутности первой степени по шкале МсFarland.

Выделение культуры и приготовление бактериальной суспензии. Используют чистую культуру грамотрицательных бактерий со среды Эндо, агара МасСоnkеу или кровяного агара. Ставят тест на ферментацию глюкозы (О/F-тест) на среде Хью-Лейфсона для уста­новления принадлежности выделенной культуры к группе ферменти­рующих микроорганизмов и тест на оксидазу для дифференциации энтеробактерий от вибрионов и других оксидазоположительных культур. Готовят суспензию в физиологическом растворе мутностью, соответствующей стандарту, указанному выше.

Инокуляция и инкубация

   Приготовленную суспензию инокулируют по 0,1 мл во все 24 лунки соответствующего стрипа. После инокуляции в лунки Н, G, F, Е, D и С первого ряда стрипа (тесты: индол, сероводород, лизин, орнитин, уреаза, аргинин соответственно) добавляют по две капли парафинового масла. Инкубируют инокулированную пластинку в термостате в течение 18-24 часов при температуре 35-37 °С.

Учет результатов и идентификация

  По окончании инкубации добавляют реактивы в следующие лунки: ряд 1-й, лунка Н (тест индол) - две капли реактива на индол; ряд 3-й, лунка Н (тест ацетоин) - по одной капле реактива ВПТ 1 и ВПТ 2. Пластинку дополнительно инкубируют 30 минут при темпе­ратуре 35-37 °С. Через 30 минут в лунку Н второго ряда стрипа (тест фенилаланин) добавляют одну каплю реактива на фенилаланин и немедленно учитывают результат этого теста, так как цвет поло­жительной реакции может исчезнуть через 2 минуты. Учитывают результаты всех тестов и заносят их в бланк.

При оценке ЭНТЕРОтест 24 ориентируются по таблице «Ин­терпретация реакций», цветной шкале и/или по цветным реакциям контрольных штаммов.

Таблица 2 - Интерпретация реакций

  Идентификацию проводят с помощью идентификационной таблицы или книги кодов для ЭНТЕРОтест 24. При окончатель­ной идентификации учитывают всю дополнительную информацию: микроскопию, О/F-тест, оксидазную активность, характер колоний, наличие пигмента, подвижность, источник выделения и т. д.