Глава 2. Материалы и методы исследования.

Представленное комплексное медико-социальное исследование проводилось в период с 2012 по 2015 гг. на базе ОРИТ в ГБУЗ СК «КДКБ».

Выбор базы исследования был обусловлен тем, что она должна соответствовать современным медицинским и организационным технологиям, обеспечивая, в первую очередь, безопасность и эффективность данного вида медицинской помощи. В связи с этим мною было выбрано государственное бюджетное учреждение здравоохранения «Краевая детская клиническая больница» (ГБУЗ КДКБ), как типовой стационар, работающее в режиме максимальной нагрузки по оказанию экстренной и плановой медицинской помощи госпитализируемым. Подобный выбор ЛПУ позволил провести оценку деятельности отделения АиР при экстренном и плановом поступлении больных, оценить эффективность и качество медицинской помощи.

Объектом исследования являлись показатели работы ОРИТ в ГБУЗ СК «КДКБ» г. Ставрополя за период 2012-2015 гг.

Проведенное исследование состояло из нескольких этапов.

На первом этапе исследования проведено изучение работы ОРИТ в ГБУЗ СК «КДКБ» г. Ставрополя за период 2012-2015 гг. Изучены основные показатели работы отделении АиР, такие как, укомплектованность кадрами и медицинским оборудованием, показатели роботы реанимационной койки, летальность, и др.

На втором этапе проведен анализ эффективности и качества оказания анестезиолого-реанимационной помощи ОРИТ в ГБУЗ СК «КДКБ». Был использован аналитический метод (теоретический анализ – изучение литературы по проблеме исследования) и эмпирические методы (наблюдение, сравнение, логический анализ).

На третьем этапе была проанализирована экспертная оценка деятельности врачей анестезиологов-реаниматологов. Данный этап был направлен на углубленное изучение контингента, лечившихся в ОРИТ в ГБУЗ СК «КДКБ».

Обследование проводилось по разработанной нами программе: изучали семейный анамнез, течение беременности и родов у матери, преморбидный фон

ребенка, анамнез жизни и заболевания, уточняли особенности течения и исходы предшествующих заболеваний.

Клиническое обследование проведено с использованием общепринятых физикальных методов. Параклиническое обследование включало: общий и биохимический анализ крови, общий анализ мочи, пробу Сулковича, копрограмму, рентгенологическое исследование грудной клетки, бронхоскопию, УЗИ. брюшной полости, почек, сердца; ЭКГ, исследование ФВД. Кроме того, использовались специальные методы исследования: вирусологические, иммунологические, аллергологические.

С целью установить роль вирусов в этиологии бронхообструктивного синдрома у части детей (n=64), поступавших в стационар с клиническими признаками ОРЗ, в первые 3-е суток от начала заболевания проводили прямое иммунофлюоресцентное исследование (ПИФ). Исследуемый материал: мазки со слизистой носа приготавливали и окрашивали по общепринятой методике. (Милькинт К.К., 1975). Для окраски использовали флюоресцирующие поликлональные антитела против вирусов гриппа A(H1N1, H3N2), гриппа В, аденовируса, парагриппа 1, 2, 3 типов, PC-вируса, и M.pneumoniae (производства НИИ Гриппа РАМН, Санкт-Петербург). Диагностическим считалось характерное свечение, выявляемое с помощью микроскопии.

Кроме того, проводили исследование уровня специфических антител классов Ig G и М в парных сыворотках крови к вирусам гриппа A (H1N1, H3N2), гриппа В, аденовирусу и PC-вирусу методом ИФА с использованием иммуноферментных тест-систем (производства НИИ Гриппа РАМН, Санкт-Петербург). Для проведения ИФА производили забор крови из локтевой вены у ребенка с клиникой ОРЗ дважды: в первые 3-е суток от начала заболевания и далее через 7-10 суток. Результаты ИФА учитывали спектрофотометрически при длине волны 490 нм.

Для исследования клеточного звена иммунитета в группах больных с РОБ и БА определяли общее число лимфоцитов и их субпопуляции. Лимфоциты выделяли методом центрифугирования в градиенте плотности (р = 1,077) фиколл-урографина (Pharmacia, Швеция). Выход лимфоцитов составлял 3 х106 -6x106 из 10 мл крови при жизнеспособности 93-98%. Субпопуляции лимфоцитов (CD3, CD4, CD8, CD20, CD25, CD16) определяли в лимфоцитотоксическом тесте с двойным флюоресцентным окрашиванием с использованием моноклональных антител (НПЦ «МедБиоСпектр).

Гуморальный иммунитет изучали с помощью определения функциональной активности В-лимфоцитов по их способности образовывать иммуноглобулины классов IgA, IgG, IgM методом иммуноферментного анализа с использованием набора реагентов (ООО «Полигност», Санкт-Петербург).

Для оценки функциональной активности нейтрофилов периферической крови использовали спонтанную и индуцированную зимозаном («Sigma») реакцию восстановления нитросинего тетразолия, позволяющую определить образование супероксидного анион-радикала. Если при этом НСТ восстанавливается, диформазан выпадает в клетке в виде нерастворимых, синих гранул. Число нейтрофилов, содержащих эти гранулы, выражали в %.

Состояние интерфероновой системы оценивали в цельной крови по следующим параметрам: концентрация сывороточного ИФН, способность лейкоцитов вырабатывать в ответ на индукцию вирусом болезни

Ньюкастла и ИФН-у в ответ на индукцию ФГА (Ершов Ф.И., 1996).

Аллергологическое обследование проводили, определяя уровень общего и специфических IgE. Уровень общего IgE определяли с помощью тест-системы на основе реагентов, разработанных лабораторией гибридомной технологии ЦНИРРИ (Санкт-Петербург, Klimovich V.B., et al, 1992). Специфические IgE к домашней пыли, эпидермальным аллергенам, пылевым клещам (НПЦ «Медицинская иммунология», Москва) определяли методом иммуноферментного анализа. Для определения IgE антител к пищевым продуктам использовали аллергены, ковалентно связанные с бумажными дисками (Cypress, Бельгия). Уровень реакции учитывали в интервалах единиц

(классах) в соответствии со стандартами, прилагаемыми к наборам. Точное определение природы аллергена достигалось при использовании панели индивидуальных аллергенов. Результаты общего IgE представлены в единицах (кЕ/л).

Проведено катамнестическое наблюдение в течение 1 года за 40 детьми с ООБ, 16 - с РОБ, 9 - с пневмонией, осложненной БОС, 38 - с БА.

Полученные в процессе исследования медико-биологические данные обрабатывались на ЭВМ типа IBM-PC с помощью программной системы STATISTICA for Windows -5.11. Для проверки статистических гипотез при сравнении исследуемых групп мы применяли непараметрические методы: у?, у? с поправкой Йетса, критерий Фишера, критерий Вилкоксона, комплекс критериев модуля ANOVA. Расчет доверительных интервалов для выявленных частот наблюдаемых явлений проводили на основе точного метода Фишера. Критерием статистической достоверности получаемых выводов считали общепринятую в медицине величину р<0,05 (Боровиков В.П. с соавт., 1997; Гельман В.Я., 1999).