Практические работы
1.Проба Фелинга на фенилпировиноградную кислоту. Описание.
2.Обнаружение гомогентизиновой кислоты. Описание.
Качественная реакция на фенилпировиноградную кислоту.
Врожденное отсутствие у детей в печени фермента 4-фенилаланингидроксилазы приводит в тому, что фенилаланин не гидроксилируется и не превращается в тирозин. Накопление фенилаланина и продуктов его аномального распада, в частности фенилпировиноградной кислоты, в крови и тканях приводит в нарушению нормального развития мозга и появлению тяжелых нарушений психики ребенка. Доказательством данного заболевания фенилпировиноградной олигофрении (слабоумия) служит выявление повышенного содержания фенилаланина в крови и наличие фенилпировиноградной кислоты в моче.
ПРОБА ФЕЛИНГА. Принцип метода. Фенилпирвовиноградная кислота образует с ионами трехвалентного железа комплексное соединение, окрашенное в сине-зеленый цвет.
Порядок выполнения работы: К 2 мл свеже профильтрованной мочи приливают 8-10 капель 10% раствора FeCl3. При наличии в моче фенилпировиноградной кислоты через 30-60 минут появляется сине-
- зеленая окраска, которая постепенно бледнеет и выцветает через 5-30 минут в зависимости от концентрации фенилпировиноградной кислоты в моче.Эту пробу можно проводить на фильтровальной бумаге, на пеленке: полоску фильтровальной бумаги смачивают мочой, высущивают на воздухе и наносят 1 каплю 10% раствора FeCl3. Положительная проба дает сине-зеленое окрашивание, аналогично пробу проводят с сухой или мокрой пеленкой.
Обнаружение гомогентизиновой кислоты.
Принцип: В щелочной среде гомогентизиновая кислота окисляется с образованием соединений сине-фиолетового цвета.
Ход обнаружения: К 0,5 мл мочи прибавляют 3-4 капли р-ра едкого натра (1 % р-р). Результат оценивается через 1-2 мин.
При положительной реакции развивается сине-фиолетовое окрашивание, при отрицательной – окраска не возникает.Клиническое значение:
Кетокислоты в большом количестве выделяются с мочой при нарушении различных обменных процессов, в частности цикла Кребса.
Вопросы по СРС
- Гормональная регуляция обмена веществ. Нарушения гормональной регуляции
Методикалық нұсқау 17
Биохимия пәнінен «Жалпы медицина» мамандығы бойынша 2 курс студенттері үшін. 26-30.12.2011-2012 оқу жылы.
Тақырып: Ақуыздар мен аминқышқылдардың алмасуы. Аминқышқылдар алмасуының өзгешелік жолдары.
Тақырыптың негізгі сұрақтары:
1. Біркөміртекті топтар. Серин мен глициннің алмасуының ерекшеліктері. ТГКФК мәні. Сульфаниламидті препараттар.
2. Құрамында күкірт бар аминқышқылдардың алмасуының ерекшеліктері. Метионин. S-аденозилметионин. Трансметильдену реакциялар. Креатиннің биосинтезі. Биол. мәні.
3. Фенилаланин алмасуының ерекшеліктері. Фенилкетонурия.
4. Тирозин алмасуының ерекшеліктері. Алкаптонурия, альбинизм және т.б.
Тәжирібелік жұмыстар:
1. Фенилпирожүзім қышқылды ашу (Фелинг тәсілі). Жұмыстың барысы.
2. Гомогентизин қышқылды ашу Жұмыстың барысы.
Фенилпирожүзім қышқылға сапалық реакция
Балалардың баурында - 4-фенилаланингидроксилазаның туа біткен жетіспеушілігінен фенилаланин гилроксильденбейді және тирозинға ауыспайды. Фенилаланиннің және оның аномальді ыдырау өнімдерінің (фенилпирожүзім қышқылдың және т.б.) жиналуы мйидің қалыпты дамуының бұзылысына әкеледі. Сонымен қатар баланың психикасында күрделі бұзылыстар пайдалады. Бұл аурудың (фенилпирожүзімді олигофрения) бұл белгісі қанда фенилаланин мөлшерінің жоғарлауы және зәрде фенилпирожүзім қышқылдың анықталуы.
ФЕЛИНГ ТӘСІЛІ. Тәсілдің принципі. Фенилпирожүзім қышқыл үшваленті темір мен көк - жасыл түсті қосылыс түзеді.
Жұмыс істеудің тәртібі: Фильтрленген зәрге 8-10 тамшы FeCl3 10% еритіндісің қосады. Егерде зәрде фенилпирожүзім қышқыл болса 30-60 минут кейін жасыл көк түс пайда болады. Оның түсі, фенилпируватқышқылдың мөлшеріне байланысты, (5-30 мин.) кейін ақшылданады
Бұл сынаманы фильтирлі қағазда, жайялықта өткізуге болады: фильтрлі қағаздың жолағына зәр тамызып, арығарай 1 тамшы 10% FeCl3 еритіндісін қосады. Оң нәтижеде жасыл-көк түс пайда болады. Тура осылай кебу немесе су жайялық пен сынаманы жүргізеді.
