Ж±мыртқа белогыныњ альбуминдері мен глобулиндерін бµліп алу.

Вопросы по СРС

1.Классификация белков. Биологические функции белков.

2.Изменения белкового состава при онтогенезе и болезнях

Практические работы:

1. Обратимое осаждение белков солями. Высаливание белков сернокислым аммонием. Описание работы.
2. .Необратимое осаждение белков минеральными и органическими кислотами.

(Верболович П.А. 208,211).

1. Осаждение белков солями тяжелых металлов и алкалоидными реактивами.

Верболович П.А. Практикум. 1973. раб., 209, 210).

1. Обнаружение водородных связей в белковых молекулах. Описание работы.
2. Биуретовая реакция на белки. Верболович П.А. 207

 

Описание работы:

Обратимое осаждение белков солями / высаливание /.Высаливание белков

Сернокислым аммонием.

В пробирку наливают 20 капель неразведенного яичного белка, добавляют равный объем насыщенного раствора сульфата аммония, содержимое перемешивают. Получается полунасыщенный раствор сульфата аммония, выпадает осадок яичного глобулина. Через 5 минут осадок отфильтровывают. В фильтрате остается другой белок – яичный альбумин.

Для высаливания альбумина к фильтрату добавляют измельченный порошок сульфата аммония до полного насыщения, т.е. до тех пор, пока не прекратится растворение соли. Выпавший осадок альбумина отфильтровывают и с фильтратом проделывают биуретовую реакцию (см. раб.№ 207) Результаты работы заносят в таблицу.

Осаждение белка высаливанием

 

Название белка	Используемая соль	Степень насыщения	Образование осадка
Глобулин
Альбумин

 

Обнаружение водородных связей и вторичной структуры белков.

В две пробирки вносят по 5 -8 капель 1 % белка. Одну из пробирок помещают в водяную баню при температуре 70 ⁰ С, вторую оставляют стоять в штативе на столе. Через 20 – 30 минут отмечают результат, сравнивают содержимое пробирок. Нагретый до 70 ⁰ С белок не выпадает в осадок, однако он сильно опалесцирует. Усиление опалесценции произлошло из-за того, что под действием нагревания водородные связи в молекуле белка разрушились, изменилась его вторичная и третичная структуры.

Контроль исходного уровня знаний (строение, химические свойства аминокислот, углеводов, жирных кислот, липидов и липоидов).

Примечание: результат оценки учитывается при выведении ОРД.

Методикалық нұсқау 1

Биохимия пәнінен «Жалпы медицина» мамандығы бойынша 2 курс студенттері үшін. 03 – 07.09 2012 - 2013 оқу жылы.

Тақырып: Ақуыздардың құрылымы және міндеттері. Ақуыздардың химиялық құрамы. Ақуыздардың физико-химиялық қасиеттері және биологиялық міндеттері.

Тақырыптың негізгі сұрақтары:

1. Ақуыздардың құрамы, құрылысы және физико-химиялық қасиеттері.
2. Ақуыздардың мөлшерін өлшеу сандық әдістері.
3. Ақуыздардың молекуласының құрылымды ұйымдасуының деңгейлері.
4. Ақуыздардың биологиялық мінднттерінің олардың құрылымына тәуелділігі.
5. Ақуыздың жіктелуі.
6. Жай және күрделі ақуыздар.
7. Құрылымдық ақуыздар
8. Ақуыздардың биологиялық қызметі.
9. Рецепторлы ақуыздар, жасушалық мембраналардың ақуыздары.

СӨЖ-дің сұрақтары:

1. Ақуыздардың жіктелуі..Ақуыздардың биологиялық мәні.
2. Аруларда және онтогенезде ақуызды құрамның өзгеруі.

Тәжірибелік жұмастыры:

1. Тұздар мен ақуыздарды қайтымды тұмбаға түсіру. Аммонийсульфаты мен ақуыздарды тұмбаға түсіру (Жұсыстың барысы).
2. Минеральді және органикалық қышқылдар ақуыздарды қайтымсыз тұмбаға түсіру

(Верболович П.А. Практикум 1973. 211-208).

1. .Ауыр металдардың тұздары мен, алкалоидті реактивтер мен ақуыздарды қайтымсыз

тұмбаға түсіру. (Верболович П.А. Практикум. 1973. жұм 209-210).

1. Ақуызды молекулаларда сутекті байланыстарды анықтау. (Жұмыстың барысы).
2. Ақуыздарды анықтайтын биуретті реакция. (Верболович П.А.Практикум. 207)

Жұмыстың барысы:

Ақуыздарды қайтымды тұмбаға түсіру (высаливание).

Ж±мыртқа белогыныњ альбуминдері мен глобулиндерін бµліп алу.

Зерттеудің барысы. Пробиркаѓа с±йылтылмаѓан ж±мыртқа белогыныњ 20 тамшысын қ±яды, аммоний сульфаттыњ қаныққан ерітіндісініњ 20 тамшысын қосады, ішіндегісін араластырады. Аммоний сульфаттыњ жартылай қаныққан ерітіндісі пайда болады, ж±мыртқа глобулині т±нбаѓа т‰седі. 5 минуттан соњ т±нбаны фильтрлейді. Фильтратта басқа ақуыз қалады – ж±мыртқаныњ альбумині.

Альбуминді қайтымды т±нбаѓа т‰сіру ‰шін (высаливание) фильтратқа аммоний сульфаттыњ ±сақталѓан ±нтаѓын толық қаныққанша қосады, яѓни т±здыњ еруі аяқталѓанѓа дейін. Т±нбаѓа т‰скен альбуминді фильтрлейді және фильтратпен биурет реакциясын жасайды. (Ж±мыс № 207 қарањыз). Теріс реакция ақуыздың жоқтыѓын кµрсетеді. Ж±мыс нәтижелерін таблицаѓа енгізеді.