Вопросы по СРС
1.Классификация белков. Биологические функции белков.
2.Изменения белкового состава при онтогенезе и болезнях
Практические работы:
- Обратимое осаждение белков солями. Высаливание белков сернокислым аммонием. Описание работы.
- .Необратимое осаждение белков минеральными и органическими кислотами.
(Верболович П.А. 208,211).
- Осаждение белков солями тяжелых металлов и алкалоидными реактивами.
Верболович П.А. Практикум. 1973. раб., 209, 210).
- Обнаружение водородных связей в белковых молекулах. Описание работы.
- Биуретовая реакция на белки. Верболович П.А. 207
Описание работы:
Обратимое осаждение белков солями / высаливание /.Высаливание белков
Сернокислым аммонием.
В пробирку наливают 20 капель неразведенного яичного белка, добавляют равный объем насыщенного раствора сульфата аммония, содержимое перемешивают. Получается полунасыщенный раствор сульфата аммония, выпадает осадок яичного глобулина. Через 5 минут осадок отфильтровывают. В фильтрате остается другой белок – яичный альбумин.
Для высаливания альбумина к фильтрату добавляют измельченный порошок сульфата аммония до полного насыщения, т.е. до тех пор, пока не прекратится растворение соли. Выпавший осадок альбумина отфильтровывают и с фильтратом проделывают биуретовую реакцию (см. раб.№ 207) Результаты работы заносят в таблицу.
Осаждение белка высаливанием
| Название белка | Используемая соль | Степень насыщения | Образование осадка |
| Глобулин | |||
| Альбумин |
Обнаружение водородных связей и вторичной структуры белков.
В две пробирки вносят по 5 -8 капель 1 % белка. Одну из пробирок помещают в водяную баню при температуре 70 0 С, вторую оставляют стоять в штативе на столе. Через 20 – 30 минут отмечают результат, сравнивают содержимое пробирок. Нагретый до 70 0 С белок не выпадает в осадок, однако он сильно опалесцирует. Усиление опалесценции произлошло из-за того, что под действием нагревания водородные связи в молекуле белка разрушились, изменилась его вторичная и третичная структуры.
Контроль исходного уровня знаний (строение, химические свойства аминокислот, углеводов, жирных кислот, липидов и липоидов).
Примечание: результат оценки учитывается при выведении ОРД.
Методикалық нұсқау 1
Биохимия пәнінен «Жалпы медицина» мамандығы бойынша 2 курс студенттері үшін. 03 – 07.09 2012 - 2013 оқу жылы.
Тақырып: Ақуыздардың құрылымы және міндеттері. Ақуыздардың химиялық құрамы. Ақуыздардың физико-химиялық қасиеттері және биологиялық міндеттері.
Тақырыптың негізгі сұрақтары:
- Ақуыздардың құрамы, құрылысы және физико-химиялық қасиеттері.
- Ақуыздардың мөлшерін өлшеу сандық әдістері.
- Ақуыздардың молекуласының құрылымды ұйымдасуының деңгейлері.
- Ақуыздардың биологиялық мінднттерінің олардың құрылымына тәуелділігі.
- Ақуыздың жіктелуі.
- Жай және күрделі ақуыздар.
- Құрылымдық ақуыздар
- Ақуыздардың биологиялық қызметі.
- Рецепторлы ақуыздар, жасушалық мембраналардың ақуыздары.
СӨЖ-дің сұрақтары:
- Ақуыздардың жіктелуі..Ақуыздардың биологиялық мәні.
- Аруларда және онтогенезде ақуызды құрамның өзгеруі.
Тәжірибелік жұмастыры:
- Тұздар мен ақуыздарды қайтымды тұмбаға түсіру. Аммонийсульфаты мен ақуыздарды тұмбаға түсіру (Жұсыстың барысы).
- Минеральді және органикалық қышқылдар ақуыздарды қайтымсыз тұмбаға түсіру
(Верболович П.А. Практикум 1973. 211-208).
- .Ауыр металдардың тұздары мен, алкалоидті реактивтер мен ақуыздарды қайтымсыз
тұмбаға түсіру. (Верболович П.А. Практикум. 1973. жұм 209-210).
- Ақуызды молекулаларда сутекті байланыстарды анықтау. (Жұмыстың барысы).
- Ақуыздарды анықтайтын биуретті реакция. (Верболович П.А.Практикум. 207)
Жұмыстың барысы:
Ақуыздарды қайтымды тұмбаға түсіру (высаливание).
Ж±мыртқа белогыныњ альбуминдері мен глобулиндерін бµліп алу.
Зерттеудің барысы. Пробиркаѓа с±йылтылмаѓан ж±мыртқа белогыныњ 20 тамшысын қ±яды, аммоний сульфаттыњ қаныққан ерітіндісініњ 20 тамшысын қосады, ішіндегісін араластырады. Аммоний сульфаттыњ жартылай қаныққан ерітіндісі пайда болады, ж±мыртқа глобулині т±нбаѓа т‰седі. 5 минуттан соњ т±нбаны фильтрлейді. Фильтратта басқа ақуыз қалады – ж±мыртқаныњ альбумині.
Альбуминді қайтымды т±нбаѓа т‰сіру ‰шін (высаливание) фильтратқа аммоний сульфаттыњ ±сақталѓан ±нтаѓын толық қаныққанша қосады, яѓни т±здыњ еруі аяқталѓанѓа дейін. Т±нбаѓа т‰скен альбуминді фильтрлейді және фильтратпен биурет реакциясын жасайды. (Ж±мыс № 207 қарањыз). Теріс реакция ақуыздың жоқтыѓын кµрсетеді. Ж±мыс нәтижелерін таблицаѓа енгізеді.
