При патологоанатомическом исследовании трупов животных выявляют увеличение лимфатических узлов, особенно средостенных и брыжеечных, которые не спаяны между собой. Поверхность разреза их саловидная, рисунок строения слегка или совсем стерт. Селезенка увеличена (длиной от 48 до 100 см). Поверхность разреза ее красная, сочная, зернистая. Увеличенные фолликулы обычно вишнево-красного или сероватого цвета. Они возвышаются над поверхностью разреза. У некоторых животных фолликулы могут быть малиново-красного цвета. Макроскопических изменений в почках обычно не выявляют. Однако иногда можно наблюдать сероватую бугристость размером от 1 до 5 мм и более.
При гистологическом исследовании выявляют системную диффузную лейкозную инфильтрацию во всех органах кроветворения: костном мозге, селезенке, лимфатических узлах, а также в пейеровых бляшках и солитарных фолликулах кишечника, печени, почках, сердце, легких, скелетной мускулатуре.
При изучении гемобластозов установлено, что у крупного рогатого скота наиболее часто встречаются две группы - лимфоидные лейкозы и лимфосаркомы. Лимфоидные лейкозы подразделяют на две основные группы - острые и хронические. В основе этого подразделения лежит строение опухолевых клеток. К острым отнесены лейкозы, клеточный субстрат которых представлен бластами, а к хроническому - лейкозы, когда основная масса опухолевых клеток дифференцирована и состоит в основном из зрелых элементов. Продолжительность заболевания не определяет отнесение того или иного лейкоза к группе острых или хронических. Из лимфоидных лейкозов у крупного рогатого скота чаще встречается хронический и реже - острый.
При гистологическом анализе необходимо учитывать: в лимфатических узлах - общий рисунок строения, состояние капсулы, трабекул, светлых центров, синусов, мякотных тяжей; в селезенке - состояние капсулы, трабекул, белой и красной пульпы, наличие границ фолликулов; в паренхиматозных органах - наличие и локализацию лимфоклеточных инфильтратов.
Методы диагностики. Диагноз устанавливают на основании серологических исследований (РИД), данных клинического, гематологического и гистологического исследований.
Эпизоотологический метод диагностики используют в качестве ориентировочного, с его помощью исключают наличие других инфекционных болезней.
Клинический метод малонадежен, однако необходим при первичной диагностике. Осматривают доступные для исследования наружные и внутренние лимфатические узлы. Обращают внимание на упитанность животного, затрудненность дыхания, акт глотания, наличие опухолей, пучеглазия и т. д. При поражении жизненно важных органов можно наблюдать самую разнообразную патологию - истощение, расстройство функции сердечно-сосудистой системы, отеки и т. д. Выраженные клинические признаки проявляются у животных лишь в терминальной стадии заболевания.
Специфические признаки при лейкозах: лимфатические узлы (подчелюстные, предлопаточные, надвымянные, глубокие паховые) симметрично или асимметрично увеличены, подвижны, плотной консистенции. Иногда отмечают одно- или двусторонний экзофтальм (пучеглазие).
При ретикулезах соматические лимфоузлы увеличены, поверхностные - малоподвижны, зачастую спаяны с окружающими тканями и кожей.
В терминальной стадии заболевание сопровождается развитием неспецифических признаков: гипотонией или атонией преджелудков, бесплодием, параличами и т. д.
Лейкоз следует дифференцировать от туберкулеза, бруцеллеза, паратуберкулеза, актиномикоза.
Гематологическая диагностика основана на тестировании количественных и качественных изменений форменных элементов крови. Показателями служат общее количество лейкоцитов в 1 10-3 мл крови, относительное (%) и абсолютное количество лимфоцитов и других групп лейкоцитов, а также наличие недифференцированных и патологических форм клеток.
Результаты гематологических исследований оценивают с учетом возраста животных в соответствии с диагностическим «лейкозным ключом», применяемым в РФ согласно действующей инструкции по борьбе с лейкозом.
Стойкий или прогрессирующий лейкоцитоз и лимфоцитоз, отмеченные при трехкратном исследовании (с интервалом 2-3 мес) - достоверный показатель лейкоза. Необходимо учитывать, что гематологическим методом не всегда удается диагностировать болезнь. Нередки случаи алейкемического течения заболевания, когда картина крови остается в пределах нормы, характеризуется несколько пониженным общим количеством форменных элементов. Именно в этих случаях особенно велико значение всего комплекса диагностических методов.
Число лейкоцитов и лимфоцитов у здорового, подозрительного по заболеванию и больного лейкозом крупного рогатого скота («лейкозный ключ»)
Возраст животных, лет | Число лейкоцитов в 1 мкл крови | Абсолютное число лимфоцитов в 1 мкл крови | |
От 2 до 4 От 4 до 6 6 и старше | Здоровые До 11000 До 10000 До 9000 | Подозрительные по заболеванию От 8000 до 10000 От 6500 до 9000 От 5500 до 8000 | Больные лейкозом Свыше 10000 Свыше 9000 Свыше 8000 |
При массовых гематологических исследованиях крупного рогатого скота на лейкоз следует учитывать возможность у животных лейкемоидных реакций, обусловленных развитием таких патологических процессов, как туберкулез, бруцеллез, маститы, эндометриты, токсикозы и др. При данных заболеваниях в отличие от лейкоза изменения в показателях крови обычно носят временный характер.
Серологические тесты направлены на выявление в сыворотке крови животных антител к специфическим антигенам ВЛКРС, с которым ассоциирован лейкоз.
Обнаружение в РДП сывороточных преципитирующих антител к антигенам ВЛКРС отражает развитие у животного лейкоза.
Сравнительные данные, полученные в результате диагностики лейкоза с помощью гематологического и серологического тестов, свидетельствуют о преимуществах последнего.
Патологоанатомические изменения при разных формах лейкоза различаются.
При собственно лейкозах (гемабластозах) селезенка увеличена (при всех формах), размер зависит от стадии заболевания (до 1 м в длину). Отмечают гиперплазию фолликулов. Возможен разрыв капсулы с последующим кровоизлиянием в брюшную полость.
Лимфоузлы увеличены в начале заболевания незначительно, в терминальной стадии - до 20x10 см (надвымянные). Капсула гладкая, легко снимающаяся. На разрезе ткань лимфоузлов саловидная, рисунок ее сглажен.
В других органах патологические изменения устанавливают в поздние сроки развития заболевания. В печени, сердце, почках могут быть диффузные или очаговые разрастания серо-белого или серо-розового цвета.
При ретикулезах обнаруживают следующие изменения. Селезенка при лимфо- и ретикулосаркоме без изменений, при системном ретикулезе илимфогрануломатозе всегда увеличена. Лимфоузлы увеличены неравномерно в различных областях тела. Капсула шероховатая, часто сросшаяся с соседними тканями и органами. Характерны опухолевидные разрастания различных размеров - от горошины до больших конгломератов (25-30 кг). Опухоли плотные, серо-белого цвета, с очагами некроза и кровоизлияний (мраморный вид). В паренхиматозных органах отмечают дистрофические изменения. В сердце, сычуге, матке, почках возможны разрастания опухолевой ткани.
Гистологическое исследование обязательно для подтверждения диагноза на лейкоз. С помощью данного метода определяют форму болезни в зависимости от характера клеток пролиферата, степени их дифференцировки, а также устанавливают стадию патологического процесса.
При собственно лейкозах гистологическим методом обнаруживают следующие изменения: при лимфолейкозе - избыточное образование в ткани селезенки и лимфоузлов клеток лимфоидного ряда с последующей метаплазией костного мозга и появлением в ряде случаев инфильтративных разрастаний в органах, не связанных с кроветворением у взрослых животных; при миелолейкозе - поражение в первую очередь костного мозга и селезенки: нарушенную клеточную структуру этих органов, пролиферацию малодифференцированных полиморфноядерных клеточных форм и присутствие миелоидных элементов. При гемобластозе развитие кроветворных органов прекращается на стадии малодифференцированных родоначальных клеток преимущественно в костном мозге и селезенке с последующим распространением процесса на лимфатические узлы и вовлечением ретикулоэндотелиальной системы всего организма.
Для ретикулезов также характерны различные изменения. При системном ретикулезе поражаются костный мозг, селезенка, лимфоузлы. В них наблюдают диффузную пролиферацию малодифференцированных полиморфноядерных ретикулярных клеток. В патологический процесс вовлекаются также сердце, сычуг, кишечник, почки, матка, легкие и другие органы с развитием в них опухолевых разрастаний недифференцированных ретикулярных элементов. При лимфо- и ретикулосаркоме поражения селезенки и костного мозга отсутствуют. Пролиферация лимфоидных элементов клеток (при лимфосаркоме) или ретикулярных (при ретикулосаркоме) возникает в лимфоузлах, сычуге, сердце, кишечнике, матке. При лимфогрануломатозе поражаются лимфоузлы с вовлечением в ряде случаев селезенки и других органов. Клеточный состав пораженных органов полиморфен. Для этой формы ретикулезов характерно появление гигантских клеток Березовского-Штернберга.
Диагноз на лейкоз считают установленным, а хозяйство неблагополучным по этой болезни, если серологическим методом выявлены антитела к вирусу лейкоза крупного рогатого скота; а также если клинические, гематологические и патологоанатомические изменения, характерные для лейкоза, подтверждены гистологическими исследованиями, а при жизни у этих животных установлены специфические антитела к ВЛКРС.
Животных, у которых в крови обнаружены специфические антитела к ВЛКРС, но отсутствуют гематологические изменения и клинические признаки, оценивают как инфицированных вирусом лейкоза.
Животных, у которых установлены в крови антитела к ВЛКРС, а также гематологические изменения или клинические признаки, характерные для лейкоза, оценивают как больных лейкозом.
Меры борьбы («Правила по профилактике и борьбы с лейкозом крупного рогатого скота», 1999). Хозяйства, в том числе хозяйства граждан, в которых установлено заболевание животных лейкозом по представлению главного государственного ветеринарного инспектора района (города) решением местной администрации объявляют неблагополучными и вводят в них комплекс ограничений, препятствующих распространению инфекции. Одновременно утверждается комплексный план оздоровления неблагополучного хозяйства, фермы, стада и др.
Для правильного планирования противолейкозных мероприятий важно учитывать следующее:
1. Источник заболевания - больные животные и вирусоносители; поэтому своевременное, как можно более раннее выявление таких животных - одно из необходимых условий эффективной борьбы с лейкозом.
2. Возбудитель передается со всеми секретами и экскретами, содержащими зараженные вирусом лейкоциты (кровь, молоко, молозиво, сперма, носовая и влагалищная слизь, слюна).
3. Возможны два пути распространения инфекции: вертикальный (от матери - плоду) и горизонтальный (от зараженного животного - здоровому). Распространению лейкоза среди восприимчивого поголовья способствуют: совместное содержание здоровых и зараженных животных, выпаивание телятам молозива и молока от больных коров, использование для осеменения спермы зараженных лейкозом быков, несоблюдение правил асептики и антисептики при ветеринарно-зоотехнических мероприятиях (взятие крови, вакцинация, ректальные исследования, мечение и пр.).
В целях недопущения возможности передачи и распространения возбудителя болезни, предохранения оздоровленных групп животных от инфицирования, необходимо предусмотреть следующие требования:
1.Исключить контакт серонегативных животных с серопозитивными в скотных дворах, загонах и на пастбищах, а также с поголовьем, не проверенным на лейкоз;
2. Зооветеринарные мероприятия в оздоравливаемых стадах проводить с соблюдением асептики и антисептики:
для лечебных и профилактических целей, а также взятия проб крови, использовать индивидуальные шприцы и иглы для каждого животного;
при взятии проб крови, обработке копыт и обрезке рогов не допускать попадания крови в кормушки, в противном случае, дезинфицировать эти места;
при выщипе ушей, татуировке или бирковании животных соблюдать правила, обеспечивающие недопустимость передачи вируса;
при ректальном исследовании, осеменении коров и телок использовать индивидуальные перчатки;
использовать семя для осеменения животных только от здоровых и не инфицированных быков-производителей;
3. Запретить перегруппировку животных или перевод с одной фермы на другу без ведома и разрешения главного ветврача хозяйства;
4. Не допускать вынужденного убоя или вскрытия павших животных непосредственно на скотных дворах;
5.Всех новорожденных телят выпаивать материнским молозивом (для нормального роста и развития теленка), обезвреженными молоком и обратом, а телят от больных и инфицированных коров, по возможности и при необходимости – молозивом от оздоравливаемой группы коров;
6. Зоотехнику-селекционеру племенных хозяйств по ежегодным бонитировочным ведомостям установить продуктивность семейств и по возможности сохранять и преумножать генофонд от высокопродуктивных;
7. Не допускать использование серонегативных нетелей для ремонта неблагополучной группы дойного стада и наоборот, серопозитивных для ремонта оздоравливаемой группы;
8. Для диагностических исследований допускается брать пробы крови у коров через 30 суток после введения вакцин и аллергенов, а стельных коров – за 30 суток до отела и 30 суток после отела.
9. С работниками животноводства проводить семинар по вопросам путей передачи возбудителя болезни, методам и средствам проведения эффективных противолейкозных мероприятий;
10. При необходимости, по результатам проведенной работы провести корректировку разработанной перспективной программы по оздоровлению хозяйства;
11. Опираясь на разработанную перспективную программу, необходимо издать приказ по хозяйству о создании постоянно действующей комиссии по контролю за выполнением намеченных работ с устранением возникших затруднений, а также порядка поощрений сотрудников и зооветспециалистов ферм, способствующих успешному проведению противолейкозных мероприятий.
Молоко от инфицированных и остальных коров оздоравливаемого стада сдают на молокоперерабатывающий завод или используют внутри хозяйства после пастеризации в обычном технологическом режиме. После обеззараживания молоко используется без ограничений.
Оздоровительные мероприятия в неблагополучных по лейкозу проводят путем изоляции зараженных ВЛКРС и немедленной сдачи на убой больных животных.
Животных, больных лейкозом (с клиническими и гематологическими проявлениями лейкоза), разрешается перевозить на мясокомбинаты железнодорожным, водным и автомобильным транспортом согласно ветеринарно-санитарным требованиям.
В ветеринарном свидетельстве или ветеринарной справке (в графе "Особые отметки"), выданным на указанный скот, должно быть отмечено, что животные больны лейкозом.
Прием и убой этих животных проводится на санитарной бойне. При ее отсутствии убой такого скота разрешается проводить на общем конвейере после завершения убоя здоровых животных и удаления из цеха всех полученных от них продуктов убоя.
После убоя больных животных помещение, технологическое оборудование и инвентарь подвергают уборке и дезинфекции.
Все случаи выявления больных лейкозом животных и с опухолевыми поражениями различного происхождения подлежат регистрации в журнале учета ветеринарно-санитарной экспертизы мяса и субпродуктов в цехе первичной переработки скота и на санитарной бойне мясокомбината с включением в отчет формы 5-вет.
Начальник подразделения государственного ветеринарного надзора на мясокомбинате (или начальник производственной ветеринарной службы) обязан сообщить о случае обнаружения лейкоза главному государственному ветеринарному инспектору района (города) и ветеринарному специалисту хозяйства, из которого поступили животные.
По результатам серологического исследования, полученным перед началом оздоровительных мероприятий, определяют варианты борьбы с лейкозом.
В хозяйствах, где выявлено до 10 % зараженных и больных лейкозом животных, их немедленно сдают на убой. Последующие серологические исследования животных этого стада проводят через каждые 3 мес с обязательным удалением инфицированных животных.
В хозяйстве, где выявлено до 30 % коров и нетелей, зараженных ВЛКРС, последних размещают отдельно от здоровых животных на отделении, ферме, скотном дворе. Инфицированных животных через каждые 6 мес исследуют гематологическим методом на лейкоз. Животных с изменениями крови, характерными для лейкоза, признают больными, изолируют и сдают на убой. Коров и нетелей, не инфицированных вирусом лейкоза, в последующем исследуют только серологическим методом с интервалом 3 мес. После каждого исследования вновь выявленных положительно реагирующих животных переводят в группу инфицированных.
В хозяйстве, где выявляют более 30 % коров и нетелей, зараженных ВЛКРС, и нет условий проводить оздоровительные мероприятия, всех взрослых животных исследуют только гематологическим методом через каждые 6 мес. Одновременно организуют работу по созданию стада, свободного от ВЛКРС, путем замены инфицированных коров здоровыми животными.
Во всех категориях хозяйств, где установлена инфекция, вызываемая вирусом лейкоза, организуют выращивание ремонтных телок отдельно от взрослого поголовья на специализированных фермах или в обособленных телятниках, контролируя их благополучие по отношению к инфекции серологическим методом. Первое серологическое исследование сывороток крови животных проводят в 6-месячном возрасте, а последующие - через каждые 6 мес. При выявлении животных, зараженных ВЛКРС, их переводят в группу откорма.
Из отделений, ферм, хозяйств, оздоравливаемых от лейкоза, разрешается реализация животных в возрасте не моложе 9 мес при условии, что их выращивали изолированно от взрослых животных в обособленных помещениях и при исследовании их серологическим методом получены отрицательные результаты.
При выявлении больных животных в индивидуальных хозяйствах их подвергают убою, а остальное поголовье содержат изолированно от животных, принадлежащих другим владельцам неблагополучного населенного пункта. Молоко и молочные продукты запрещается реализовывать в свободной продаже.
В оздоравливаемых от лейкоза хозяйствах (фермах) проводят дезинфекцию животноводческих помещений и оборудования согласно установленному порядку проведения ветеринарной дезинфекции объектов животноводства. Для дезинфекции применяют раствор формальдегида, горячий раствор гидроксида натрия и др. Особое внимание обращают на места и предметы, загрязненные кровью. Навоз и сточные воды утилизируют в установленном порядке.
Хозяйства, в том числе хозяйства граждан, считают оздоровленными после вывода всех больных и инфицированных животных и получения двух подряд, с интервалом 3 мес, отрицательных результатов при серологическом исследовании всего поголовья животных старше 6-месячного возраста, а также выполнения мер по санаций помещений и территории ферм.
Контрольные вопросы и задания. 1. Дайте характеристику этиопатогенеза лейкоза крупного рогатого скота. 2. Раскройте механизм передачи возбудителя лейкоза от больных животных здоровым. 3. Назовите стадии развития клинических форм гемобластозов крупного рогатого скота. 4. Какие патологоморфологические изменения наблюдаются при лимфосаркоме у крупного рогатого скота? 5. Какие существуют схемы оздоровительных мероприятий при лейкозе крупного рогатого скота?