Реакция изомеризации под действием натрия гидроксида.

0,01 г препарата растворяют в 2 мл 10% раствора натрия гидроксида; появляется коричнево-желтое окрашивание; нагревают в кипящей водяной бане в течение 1 – 2 мин – появляется синяя флюоресценция, наблюдаемая в УФ-свете.

Реакция со спиртовым раствором хлорида окисного железа.

Помещают 4 мл 0,25% раствора тетрациклина в цилиндр емкостью 50 мл, разбавляют дистиллированной водой до 25 мл, перемешивают и прибавляют 0,2 мл спиртового раствора хлорида окисного железа. Появляется коричневое окрашивание. Эффект реакции наблюдают в проходящем свете.

Реакция с диазореактивом.

Помещают 5 мл 0,25% раствора тетрациклина в пробирку и прибавляют 0,75 мл диазореактива. В течение 12-15 минут окрашивание раствора изменяется от желтого через ярко-оранжевое к красно-оранжевому.

Примечание: Приготовление диазореактива. 0,1 г стрептоцида растворяют при нагревании в 2 мл разведенной кислоты хлористоводородной и добавляют после охлаждения 2 мл 1% раствора нитрита натрия.

Реакция с аммиачным раствором нитрата меди.

Помещают 5 мл 25 % раствора тетрациклина в термостойкую пробирку и прибавляют 0,1 мл аммиачного раствора нитрата меди. Появляется опалесцирующее оливково-зеленое окрашивание. Пробирку погружают в кипящую водяную баню на 3-4 минуты. Оливково-зеленое окрашивание переходит в светло-коричневое.

 

Окситетрациклин:

Реакция с концентрированной серной кислотой.

Равномерно нанести 0,5 мл концентрированной серной кислоты на внутреннюю поверхность цилиндра емкостью 50 мл. На слой кислоты равномерно распределить 0,01 г окситетрациклина. Появляется огненно-красное окрашивание, переходящее постепенно в красно-оранжевое. При добавлении примерно 10 мл дистиллированной воды окрашивание становится золотисто-желтым. Эффект реакции наблюдают в проходящем свете.

Реакция с концентрированной серной кислотой.

К 0,001-0,002 г препарата прибавляют 2 мл концентрированной кислоты серной; появляется фиолетовая окраска.

Реакция образования ангидротетрациклина с концентрированной соляной кислотой.

Помещают 0,005-0,01 г тетрациклина в термостойкую пробирку, приливают 2 мл воды и 2 мл концентрированной соляной кислоты, перемешивают. Пробирку помещают в кипящую водяную баню на 2-3 минуты. Появляется оранжево-красная окраска и зеленовато-желтая флюоресценция, наблюдаемая в УФ-свете.

Реакция изомеризации под действием натрия гидроксида.

0,01 г препарата растворяют в 2 мл 10% раствора натрия гидроксида; появляется коричнево-желтое окрашивание; нагревают в кипящей водяной бане в течение 1 – 2 мин – появляется синяя флюоресценция, наблюдаемая в УФ-свете.

Реакция со спиртовым раствором хлорида окисного железа.

Помещают 2 мл 0,25% раствора окситетрациклина гидрохлорида в цилиндр емкостью 50 мл, разбавляют дистиллированной водой до 25 мл, перемешивают и прибавляют пипеткой 0,2 мл спиртового раствора хлорида окисного железа. Раствор окрашивается в коричневый цвет. Эффект реакции наблюдают в проходящем свете.

Реакция с диазореактивом.

Помещают 5 мл 0,25% раствора тетрациклина в пробирку и прибавляют 0,5 мл диазореактива. Через 3-4 минуты появляется яркое желтое окрашивание с зеленоватым оттенком. Эффект реакции наблюдают на белом фоне и в проходящем свете.

Реакция с аммиачным раствором нитрата меди.

Помещают 5 мл 25 % раствора окситетрациклина гидрохлорида в термостойкую пробирку и прибавляют 0,1 мл аммиачного раствора нитрата меди. Появляется оливково-зеленое окрашивание. Пробирку погружают в кипящую водяную баню на 3-4 минуты. Оливково-зеленое окрашивание переходит в темно-коричневое.

 

Задание II. Выполнить количественное определение стрептомицина сульфата.

Около 0,1 г препарата (точная навеска) растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 100 мл, доводят до метки тем же растворителем. К 5 мл этого раствора помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляют 5 мл 0,2 М раствор гидроксида натрия и нагревают на водяной бане в течение 10 мин. Охлаждают во льду точно 5 мин, прибавляют 3 мл раствора железо-аммониевых квасцов и доводят водой до метки и перемешивают. Через 20 минут после прибавления железо-аммониевых квасцов измеряют оптическую плотность полученного раствора при длине волны 525 нм в кювете с толщиной слоя 1 см. В качестве раствора сравнения используют раствор приготовленный аналогичным образом, но без добавления испытуемого вещества. Рассчитывают содержание стрептомицина сульфата, используя величину поглощения .

Содержание стрептомицина сульфата рассчитывают по формуле:

где: А – оптическая плотность фотометрируемого раствора; V₁ и V₂ – объемы мерных колб, используемые для приготовления фотометрированного раствора, мл; V – объем аликвоты, взятый для приготовления фотометрируемого раствора, мл; а – навеска анализируемого вещества, г; l – толщина кюветы, см.

Содержание стрептомицина сульфата должно быть не менее 90,0%

Контрольные вопросы и ситуационные задачи

 

1. Перечислите все реакции на остаток стрептозы в молекуле стрептомицина. В каких условиях можно открыть остаток стрептозы и остаток N-метил-L-глюкозамина с реактивами, характерными для альдегидной группы? Напишите уравнения реакций.

2. На чем основано использование ФЭК и спектрофотометрии в количественном определении аминогликозидов. Напишите уравнения на примере стрептомицина сульфата и канамицина моносульфата.

3. Напишите структурную формулу гипотетического аминогликозида, агликоном которого является стрептидин, а аминосахарами – пурпурозамин и 6-глюкозамин. С учетом количества центров основности предположите формулу сульфатов. Напишите реакцию гидролиза и предложите реакции на подлинности.

4. Напишите структурную формулу канамицина. Обозначить входящие в его состав аминосахара и агликон. С учетом количества центров основности написать формулу сульфатов. Напишите реакцию гидролиза и предложите реакции на подлинности.

 

 

Список литературы для подготовки.

1. Беликов, В.Г. Фармацевтическая химия: Учеб. Для вузов. – Пятигорск, 2007.

2. Фармацевтическая химия: Учеб. Пособие / Под ред. А.П. Арзамасцева. – 2-е изд., испр. – М.: ГОЭТАР-Медиа, 2005.

Занятие 3