Реакция с резорцином в серной кислоте.

Растворяют 0,002 г препарата в 2 мл воды в термостойкой пробирке, осторожно прибавляют 2,5 мл раствора серной кислоты, перемешивают, добавляют 0,1 г резорцина и снова перемешивают. При нагревании на кипящей водяной бане в течение 5 мин появляется желто-зеленоватое окрашивание.

Реакция с аммиачным раствором соли меди.

Растворяют 0,003 г препарата в 4 мл воды в термостойкой пробирке, осторожно прибавляют раствор, состоящий из 5 мл раствора нитрата меди и 0,5 мл раствора аммиака, перемешивают. При нагревании на кипящей водяной бане в течение 2 мин появляется темно-желтое окрашивание.

8. Реакция с реактивом Марки. Реакция наиболее характерна для феноксиметилпенициллина (красное окрашивание при комнатной температуре и усиление окраски при нагревании). Остальные пенициллины образуют неокрашенные, а при нагревании желтые или желто-бурые продукты.

Методика выполнения:

По 0,005 г препарата помещают в две пробирки и прибавляют по 1 капле воды. В первую пробирку добавляют 2 мл серной кислоты, а во вторую добавляют 2 мл свежеприготовленного реактива Марки, содержимое пробирок перемешивают и отмечают окраску. Затем содержимое пробирок нагревают на водяной бане в течение 1 мин и отмечают окраску.

9. Реакция с хромотроповой кислотой. Реакция наиболее характерна для феноксиметилпенициллина. Остальные пенициллины образуют продукты реакции желто-зеленого или желтого цвета.

Методика выполнения:

К 0,002 г препарата прибавляют 0,002 г динатриевой соли хромотроповой кислоты, 2 мл концентрированной серной кислоты и нагревают на масляной или глицериновой бане при температуре 150⁰С и отмечают секундомером время погружения. Пробирку встряхивают каждые 30 с и отмечают окраску. Реакцию поводят в течение 5 минут.

Полученные результаты представить в виде таблицы.

Препарат	Время, мин
	0,5	1,0	1,5	2,0	2,5	3,0	3,5	4,0	4,5	5,0

 

10. Реакция на остаток аминокислоты в ампициллине. За счет остатка фениламиноуксусной кислоты ампициллин реагирует с нингидрином и вступает в реакцию комплексообразования с меди (II) сульфатом.

а) 0,02 г ампициллина растворяют в 2 мл воды, прибавляют 2 мл свежеприготовленного 0,25% раствора нингидрина и кипятят в течение 2-3 мин. Появляется вишневое окрашивание.

б) 0,01 г препарата растворяют в 1 мл воды и прибавляют 2-3 капли реактива Фелинга. Появляется фиолетовое окрашивание.

Задание II. Выполнить качественные реакции на лекарственные вещества цефалоспоринов (цефалексин, цефалотина натриевая соль).

1. Гидроксамовая реакция. Данная реакция выполняется по методике для препаратов группы пенициллинов.

2. Реакция окисления. Обуслолена наличием отома серы в дигидротиазиновом кольце.

К 0,02 г препарата в пробирке прибавляют несколько капель 80% раствора кислоты серной, содержащей 1% кислоты азотной. Цефалотин дает желтое окрашивание, цефалексин - оливково-зеленое.

Реакция комплексообразования цефалексина.

К 0,02 г препарата в пробирке прибавляют5 капель 1% раствора кислоты уксусной, 2 капли 1% раствора меди (II) сульфата и 1 каплю 2н. раствора натрия гидроксида. Появляется оливково-зеленое окрашивание.

Реакция с нингидрином.

0,02 г ампициллина растворяют в 2 мл воды, прибавляют 2 мл свежеприготовленного 0,25% раствора нингидрина и кипятят в течение 2-3 мин. Появляется вишневое окрашивание.

 

Задание III. Выполнить количественное определение одного из препаратов природных и полусинтетических пенициллинов и цефалоспоринов.

Около 0,06 -0,08 г препарата (точная масса) растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 100 мл, доводят объем раствора водой до метки к перемешивают. Переносят 5 мл раствора, отобранного пипеткой Мора, в коническую колбу с притертой пробкой вместимостью 250 мл, прибавляют 2 мл 1 М раствора гидроксида натрия, перемешивают и оставляют на 20 мин. После этого к полученной смеси прибавляют 2 мл 1 М раствора кислоты хлористоводородной, 5 мл 0,3 М раствора ацетатного буфера (рН 4,5 ±0,05), и 20 мл 0,01 М раствора иода, отобранного пипеткой Мора, и оставляют на 20 мин в темном месте. Избыток раствора иода оттитровывают 0,01 М раствором натрия тиосульфата до слабо-желтого цвета, затем прибавляют от 0,1 до 0,2 мл 0,1% раствора крахмала и титруют до обесцвечивания (основное определение).

В контрольную колбу вносят 5 мл испытуемого раствора препарата, прибавляют 10 мл воды, 5 мл 0,3 М раствора ацетатного буфера, 20 мл 0,01 М раствора иода, отобранного пипеткой Мора, оставляют на 20 мин в темном месте. Избыток иода оттитровывают 0,01 М раствором натрия тиосульфата как описано выше.

Содержание (%) суммы пенициллинов в препарате вычисляют по формуле:

V_k – объем 0,01 н. раствора натрия тиосульфата в контрольном титровании; V_о – объем 0,01 н. раствора натрия тиосульфата в опытном титровании; К – коэффициент поправки 0,01 н. раствора тиосульфата натрия; С- коэффициент пересчета образца натриевой соли бензилпенициллина на исследуемый препарат; Т – титр бензилпенициллина натриевой соли (с учетом температуры)

Таблица: Зависимость коэффициента пересчета (Т) стандартных образцов пенициллинов от температуры.

Коэффициент пересчета	Температура, 0С		Коэффициент пересчета	Температура, 0С
Титр СО натриевой соли бензил-пенициллина	Титр СО феноксиметилпенициллина	Титр СО натриевой соли бензил-пенициллина	Титр СО феноксиметилпенициллина
0,0004753 0,0004673 0,0004587 0,0004521 0,0004445 0,0004374 0,0004310 0,0004241	0,0005118 0,0005015 0,0004912 0,0004831 0,0004726 0,0004630 0,0004533 0,0004445		0,0004177 0,0004119 0,0004055 0,0004000 0,0003965 0,0003934 0,0003906 0,0003876	0,0004367 0,0004281 0,0004209 0,0004146 0,0004100 0,0004052 0,0004010 0,0003962

 

Контрольные вопросы и ситуационные задачи

1. Напишите структурные формулы природных и полусинтетических пенициллинов. Укажите функциональные группы. Напишите латинские названия этих лекарственных веществ. На основании химической структуры объясните их различную растворимость.

2. Напишите структурные формулы цефалоспоринов. Укажите функциональные группы. Напишите латинские названия этих лекарственных веществ.

3. Охарактеризуйте кислотно-основные свойства ампициллина, феноксиметилпенициллина, цефалексина. Подтвердите свои выводы химическими реакциями.

4. На примере феноксиметилпенициллина приведите уравнение химической реакции образования гидроксамата меди. Какой из препаратов пенициллинов эту реакцию не дает и почему?

5. Назовите частные реакции на соли бензилпенициллина, феноксиметилпенициллина, ампициллина, амоксициллина. Объясните, чем они обусловлены и как используются в анализе? Какие из продуктов окрашены? Напишите уравнения химических реакций.

6. Напишите общую реакцию на лекарственные средства группы β-лактамидов. Чем она обусловлена? Приведите условия ее выполнения и использования в анализе.

7. На основании химической структуры цефалексина и цефалотина приведите химические испытания для определения их подлинности. Чем они обусловлены? Напишите уравнения реакций.

8. Охарактеризуйте сущность гравиметрического метода определения бензилпенициллина в его солях. Напишите уравнения реакций.

9. 0,1086 г феноксиметилпенициллина растворили в 4 мл 5% раствора натрия гидрокарбоната в мерной колбе вместимостью 500 мл и довели объем раствора до метки водой. Оптическая плотность полученного раствора составляет 0,740 при длине волны 286 нм и толщине слоя 10 мм. Рассчитайте удельный показатель поглощения феноксиметилпенициллина.

10. В бензилпенициллине натриевой соли сумма пенициллинов составляет 94,5%. Рассчитайте объем раствора йода (0,01 моль/л) УЧ(1/2 J2) с К 1,0000, который свяжется с навеской лекарственного вещества 0,0602 г. Навеску растворили в воде в мерной колбе вместимостью 100 мл, довели объем раствора водой до метки и на анализ взяли 5 мл полученного разведения. Величина эквивалента в г стандартного образца бензилпенициллина при 200С составляет 0,0004055г.

11. При количественном определении бензилпенициллина калиевой соли по ФС на контрольный опыт израсходовано 19,8 мл 0,01 М раствора тиосульфата натрия, на титрование испытуемого препарата - 14,3 мл того же титранта (К=0,99). каково содержание (%) препарата, если Т = 0,0004055 г/мл, а = 0,0503г, С = 1,045?

12. При количественном определении по ФС бензилпенициллина калиевой соли с массой 0,0600 г затрачено 6 мл 0,01 М раствора иода (К=1,0, Т=0,0004055 г/мл, С=1,045). Каково содержание (%) препарата?

 

 

Список литературы для подготовки.

1. Беликов, В.Г. Фармацевтическая химия: Учеб. Для вузов. – Пятигорск, 2007.

2. Фармацевтическая химия: Учеб. Пособие / Под ред. А.П. Арзамасцева. – 2-е изд., испр. – М.: ГОЭТАР-Медиа, 2005.

ЗАНЯТИЕ 2