Перечень конкретных учебно-целевых вопросов

1. Плазмодии малярии. Морфология. Циклы развития. Патогенез малярии, иммунитет. Лабораторная диагностика. Профилактика. Препараты для лечения.

2. Токсоплазмы, бабезии, лямблии, лейшмании, трипаносомы, трихомонады, амебы, балантидии, микроспоридии. Морфология и культивирование. Патогенез. Лабораторная диагностика. Препараты для лечения. Профилактика.

Основные методы лабораторной диагностики протозойных инфекций

Микроскопический метод направлен на выявление паразитов в нативных и окрашенных препаратах. Материалом для исследования служат кровь, пунктаты грудины или лимфатических узлов, спинномозговая жидкость, соскоб с кожных элементов, фекалии, дуоденальное содержимое, отделяемое слизистой оболочки наружных половых органов или мочеиспускательного канала. Простейшие можно обнаружить как в мазках, так и в гистологических препаратах, изготовленных из пораженных тканей. Разработано значительное число методов окраски простейших, среди которых наиболее часто применяется метод Романовского-Гимза.

Культуральный метод заключается в посеве исследуемого материала на среды, содержащие кровь или нативную сыворотку, яичный белок, углеводы, аминокислоты и другие вещества (рН сред 7,0-7,6). Культивирование большинства простейших осуществляют обычно при 37⁰ С, лейшманий и трипаносом при 20-26⁰ С. Результаты посевов учитывают визуально и микроскопическим методом (препарат «раздавленная» капля) через 24, 48, 72, 120 часов. Дизентерийные амебы, балантидии, трихомонады, хиломастиксы проще выявить микроскопическими методами, однако при необходимости применяют культуральное исследование.

Серологический метод при протозойных инфекциях имеет вспомогательное значение. Применяется РА (американский трипаносомоз), РП (американский трипаносомоз, амебиаз), РСК (американский трипаносомоз, токсоплазмоз, висцеральный лейшманиоз, амебиаз), РИФ (американский трипаносомоз, малярия, токсоплазмоз, висцеральный лейшманиоз, амебиаз), РНГА (токсоплазмоз), ИФА (токсоплазмоз, тропическая малярия, амебиаз, кожный и висцеральный лейшманиозы, американский трипаносомоз).

Аллергический метод – кожные аллергические пробы применяются редко, обычно для подтверждения диагноза кожного лейшманиоза (проба с лейшманином, реакция Монтенегро) и токсоплазмоза (проба с токсоплазмином).

Биологический метод (биопроба) применяется для подтверждения диагноза ряда протозоозов, а также в научных целях. Чувствительными животными для дизентерийных амеб и балантидий являются 2-3-недельные крысята, морские свинки, котята, щенки, золотистые хомячки; для лямблий — мыши; для лейшманий белые мыши и хомяки; для американских трипаносом - морские свинки; для африканских трипаносом – мартышки; для токсоплазм - белые мыши. Заражение животных осуществляют парентерально, в слепую кишку при лапаротомии, через длинный пластмассовый зонд или путем скармливания животным исследуемого материала.

В течение 30 дней после заражения микроскопическому исследованию подвергают кровь животных, мазки-отпечатки из органов или гистологические препараты из пораженных тканей.

МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ПРОТОЗОЙНЫХ ИНФЕКЦИЙ

Малярия

Возбудителями тропической малярии является Plasmodium falciparum, трехдневной малярии - Plasmodium vivax, четырехдневной малярии - Plasmodium malariae и трехдневной или овале-малярии - Plasmodium ovale. Малярийные плазмодии претерпевают половой цикл развития в организме комара рода Anopheles и бесполый цикл (шизогония – рис.41) — в организме человека, поражая сначала клетки печени (тканевая шизогония), а затем эритроциты (эритроцитарная шизогония).

Микроскопический метод. Кровь на наличие плазмодиев малярии исследуют на стадии эритроцитарной шизогонии путем микроскопии обычных мазков и толстой капли, окрашенных по Романовскому-Гимзе. Плазмодии, цитоплазма которых окрашена в голубой цвет, а ядро в вишнево-красный, находят в эритроцитах.

Бесполые (эритроцитарные) формы паразитов имеют некоторые морфологические особенности. В частности, мерозоит представляет собой круглую или овальную форму с небольшим участком цитоплазмы около ядра; кольцевидный трофозоит - одноядерную форма сузким ободком цитоплазмы, окружающим небольшую вакуоль; амебовидный трофозоит - одноядерную форму с различным количеством и величиной псевдоподий; шизонт содержитдва или несколько ядер; морула характеризуется полным разделением ядра и цитоплазмы на мерозоиты.

Половые формы плазмодиев (гаметоциты или гамонты) не содержат вакуолей и псевдоподий. Мужские (микрогаметоциты) и женские (макрогаметоциты) формыотличаются по величине и структуре ядра, интенсивности окраски цитоплазмы и размерам.

При микроскопии тонкого мазка при малярии находят обычно кольцевидные трофозоиты. У P. vivax, P. malariae, P. оvale ониимеютразмеры от 2 до 4 мкм, занимают около 1/3 диаметра эритроцита. Ядра у трофозоитов P. vivax и P. malariae круглые, у P. ovale — неправильной формы, крупные; ободок цитоплазмы ровный, неширокий, суживается к ядру. Молодые кольцевидные трофозоиты P. falclparum мелкие (1,25-1,50 мкм), занимают примерно 1/6 часть диаметра эритроцита, имеют маленькое круглое ядро с тонким ободком цитоплазмы. Взрослые кольцевидные трофозоиты более крупные, занимают 1/3 диаметра эритроцита, ободок цитоплазмы толстый, резко суживающийся к ядру.

Амебовидные трофозоиты P. vivax отличаются разнообразием форм, размеров, наличием одной или нескольких псевдоподий, вакуолей, круглого или овального ядра, пигмента в виде темно-коричневых цитоплазматических зерен различной величины и формы. Амебовидные трофозоиты P. malariae округлые и овальные (нередко ввиде ленты поперек эритроцита с продолговатым или вытянутым ядром), с короткими и широкими псевдоподиями, более темной цитоплазмой ипигментом, ядром неправильной формы.. Амебовидные трофозоиты P.falciparum в видекруглых или

Рис. 41. Основные стадии эритроцитарной шизогонии малярийных плазмодиев

овальных форм лишены вакуоли, имеют ядро круглой или неправильной формы, пигмент черного цвета, расположенный компактно, однако они, как правило, в периферической крови не обнаруживаются. Молодые трофозоиты P. ovale имеют кольцевидную форму, более взрослые сходны с P. malariae.

Размеры шизонтов у возбудителей малярии увеличиваются по нарастающей в ряду P.vivax, P. ovale, P.falciparum.

Морула P. vivax содержит обычно от 14 до 16 беспорядочно расположенных мерозоитов, между которыми лежат глыбки пигмента. В моруле P. malariae около 8 крупных мерозоитов, расположенных в виде розетки; в моруле P.falciparum 8-24 мелких мерозоитов, занимающих часть эритроцита; в моруле P. ovale около 8 крупных мерозоитов с ядром неправильной формы. Гаметоциты Р. vivax (крупные), P. malariae (мелкие) и Р. ovale округлой или овальной формы;глыбки пигмента крупные, равномерно расположены в цитоплазме гаметоцитов. В женских гаметоцитах у края цитоплазмы обнаруживают компактное ядро темно-голубого цвета. Расположенное центрально ядро мужских гаметоцитов розовато-фиолетового цвета, крупное, рыхлое. Гаметоциты этих видов плазмодиев появляются и исчезают из периферической крови вместе с трофозоитами. Гаметоциты P.falciparum имеютхарактерную полулунную форму с ядром, расположенным в средней части цитоплазмы (у женских форм оно небольшое и компактное, у мужских - крупное и рыхлое). Пигмент окружает ядро в виде коротких палочек. Стадия развития гаметоцитов P.falciparum в эритроците существенно превышает длительность шизогонии. Эти гаметоциты выявляются в периферической крови на 8-10 день после появления кольцевидных трофозоитов, продолжая поступать в кровь через несколько недель после их исчезновения на фоне отсутствия клинических симптомов малярии..

Эритроциты, пораженные P. vivax и P. ovale, увеличиваются в диаметре до 10-12 мкм, хуже окрашиваются по Романовскому —Гимзе; эритроциты, пораженные P. ovale, могут приобретать неправильную форму, иметь бахромчатый край. Морфология эритроцитов, содержащих P. malariae и P. falciparum, не меняется.

В эритроцитах, содержащих P. vivax на различных стадиях развития, выявляются множественные мелкие азурофильные зерна (зернистость Шюффнера), при наличии в эритроцитах P. ovale зерна редкие и крупные (зернистость Джеймса), при обнаружении в эритроцитах кольцевидных трофозоитов P.falciparum можно выявить небольшое количество крупных азурофильных зерен (зернистость Маурера), а в тех случаях, когда возбудителем является P. malariae, в эритроцитах выявляют мелкую зернистость Циманна.

Морфология возбудителей малярии в толстой капле. Кольцевидные трофозоиты P. vivax, P. ovale, P. malariae обычно имеют одинаковую величину, однако в толстой капле они часто дефор-

мируются, превращаясь в форму запятой или восклицательного знака; цитоплазма при этом концентрируется около ядра в виде округлого или треугольного комочка. Наряду с кольцевидными трофозоитами можно найти другие формы плазмодиев и определить вид возбудителя.

Аналогичные превращения происходят и с кольцевидными трофозоитами P. falciparum, часть из которых сохраняет свою форму. Цитоплазма может разрываться, располагаясь с двух сторон от ядра в виде «крыльев ласточки», нередко находят раздвоенные ядра. На других стадиях развития плазмодии малярии в периферической крови обычно не выявляются.

Для амебовидных трофозоитов P. vivax в толстой капле характерна деформация их цитоплазмы в виде двух или нескольких комочков, располагающихся около ядра.

Трофозоиты P. malariae в мазке выглядят как компактные овальные или округлые образования с большим количеством пигмента.

На стадии морулы различные виды плазмодиев имеют разное количество мерозоитов и форму морулы. У P. malariae в толстой капле морула сохраняет форму розетки, шизонты и морулы P. ovale напоминаютаналогичные формы P. malariae, однако ядро более крупное, пигмента меньше, встречаются неразрушенные пораженные эритроциты. При малярии, вызванной P. vivax, пораженные эритроциты так же не всегда разрушаются, сохраняется зернистость Шюффнера. У P. ovale, в отличие от P. vivax,ядра крупные, неправильной формы, отсутствуют крупные «разорванные» амебовидные трофозоиты, мерозоиты крупные и их меньше в моруле.

Женские гаметоциты (гамонты) P. vivax и P. malariae в толстой капле не удается отличить от взрослых трофозоитов. Мужские гаметоциты имеют крупное ядро, окруженное узким ободком бледно-голубой цитоплазмы с рассеянными по ней зернами пигмента. Гаметоциты P. falciparum имеют характерную полулунную форму.

Серологический метод -определение антител к плазмодиям малярии с помощью РИА или ИФА с диагностическими целями проводится редко.

Генодиагностика - ПЦР.

Криптоспоридиоз

Криптоспоридии (Cryptosporidium parvum, Cryptosporidium muris) вызывают холероподобное заболевание или воспаление легких, преимущественно у лиц, страдающих иммунодефицитами, в частности, ВИЧ-инфекцией.

Материалом для исследования являются испражнения, биоптаты слизистой оболочки кишечника, желчных протоков, желчного пузыря, мокрота и биоптаты легочной ткани. Основной метод диагностики - микроскопия исследуемого материала.

Микроскопический метод направлен на обнаружение ооцист в мазках из материала от больного, окрашенных по Цилю-Нильсену. Ооцисты криптоспоридий представляют собой округлые образования диаметром около 5 мкм, они кислотоустойчивы и поэтому окрашиваются в красный цвет, тогда как другие микроорганизмы - в голубой.

Ооцисты криптоспоридий или их антигены в исследуемом материале можно также выявить с помощью РИФ и ИФА.

Токсоплазмоз

Возбудитель токсоплазмоза (Toxoplasma gondii) является внутриклеточным паразитом, поражающим практически все органы и ткани теплокровных животных, птиц и человека.

Исследованию на токсопламоз подвергают пунктат лимфатических узлов, спинномозговую жидкость, кровь, гистологические срезы лимфатических узлов, миндалин, кусочки органов трупа, головной мозг, печень, селезенку, легкие, плаценту и околоплодную жидкость.

Микроскопический метод – обнаружение токсоплазм в мазках из материала от больного, окрашенных по Романовскому-Гимзе. Токсоплазмы имеют полулунную или аркообразную форму, размеры 4-7х 2-4 мкм, один из концов простейшего заострен, другой закруглен. Цитоплазма токсоплазм голубого цвета, ядро рубиново-красного цвета располагается в центре паразита, занимая 1/3-1/4 цитоплазмы (рис. 42).

Биопроба -заражение материаломот больных белых мышей, у которых развивается острая форма токсоплазмоза, при этом паразиты обнаруживаются в перитонеальном экссудате, реже во внутренних органах. Через 2-3 недели в головном мозге появляются цисты токсоплазм, которые можно обнаружить при микроскопии нативных или окрашенных по Романовскому-Гимзе препаратов.

Рис. 42. Возбудитель токсоплазмоза (Toxoplasma gondii)

Серологический метод -постановка реакции с красителем Сэбина—Фельдмана (РСФ - антиген-нейтрализующая реакция, основанная на утрате токсоплазмами способности прижизненно воспринимать окраску после воздействия специфических антител), РИФ, РСК, РНГА с парными сыворотками крови больных с целью определения антител к токсоплазмам. Применяется также аллергическая проба с токсоплазмином.

Аллергодиагностика – постановка внутрикожной а ллергической пробы с токсоплазмином выявляет наличие сенсибилизации организма в результате инфицирования токсоплазмами. Результаты аллергической пробы учитывают в сочетании с данными серологического исследования. Положительная проба с токсоплазмином при отрицательных результатах серологических реакций указывает на давно перенесенную инвазию; положительная РИФ в низких титрах в сочетании с отрицательной РСК свидетельствует о затухании процесса; свежая инфекция характеризуется наличием антител, выявляемых с помощью РИФ при отрицательных РСК и аллергической пробе. Диагноз врожденного токсоплазмоза ставят при наличии типичных клинических проявлений и нарастания титра специфических антител у ребенка в сочетании с положительными результатами серологических реакций у матери.

Трипаносомоз

У человека трипаносомоз описан в 2 формах - африканской (сонная болезнь) и американской (болезнь Шагаса).

Возбудителями сонной болезни являются Trypanosoma brucei вариант gambiense и Trypanosoma brucei вариант rhodesiense, болезни Шагаса - Trypanosoma cruzi. Морфологически эти три вида трипаносом сходны между собой.

Материалом для исследования являются кровь, спинномозговая жидкость, пунктат лимфатических узлов, грудины, кусочки пораженных тканей.

Микроскопический метод – выявление трипаносом в мазках из исследуемого материала, окрашенных по Романовскому-Гимзе. Трипаносомы располагаются внеклеточно, имеют размеры 17-30х1,4-2,0 мкм, красно-фиолетовое ядро, расположенное в средней части тела простейшего; на заднем конце трипаносомы имеется блефаропласт, от которого отходит волнообразный жгутик, направляющийся к наружной оболочке трипаносомы и далее - до переднего конца трипаносомы. Между телом трипаносомы и жгутиком находится прозрачная ундулирующая мембрана. Сзади от блефаропласта расположен палочковидный или круглый кинетопласт (рис. 43).

При острой стадии болезни Шагаса трипаносомы можно обнаружить в крови. При хронической форме заболевания микроскопическое исследование малоинформативно из-за небольшого количества трипаносом в крови.

Серологический метод (РСК, РП, РА, РИФ, ИФА для определения антител в крови больных)применяется при болезни Шагаса.

Биопроба – заражение морских свинок (Т. cruzi), белых мышей или крыс (Т.rhodesiense), мартышек (Т.gambiense) с последующим микроскопическим исследованием окрашенных по Романовскому-Гимзе мазков-отпечатков из внутренних органов с целью выявления трипаносом.

Рис. 43. Возбудитель трипаносомоза (Trypanosoma gambiense)

Лейшманиоз

Возбудителем кожного лейшманиоза является Leishmania tropica, висцерального лейшманиоза - Leishmania donovani. Лейшмании паразитируют у позвоночных животных и человека в лейшманиальной (внутриклеточной, амастиготной безжгутиковой) форме. Другим хозяином и переносчиком являются москиты, у которых паразиты находятся в лептомонадной (промастиготной, жгутиковой) форме. Жгутиковые формы образуются также при культивировании лейшманий на искусственных питательных средах.

Микроскопический метод (микроскопия мазков костного мозга, пунктата лимфатических узлов и селезенки, окрашенных по Романовскому—Гимзе) являетсянаиболее информативным в диагностике висцерального лейшманиоза. Амастиготы расположены в цитоплазме гистиоцитов, имеют овальную или круглую форму размером 3-5x1-3 мкм, цитоплазму серо-голубого цвета, центрально расположенное ядро красно-фиолетового цвета и лежащий рядом с ним ярко окрашенный кинетопласт.

Культуральный метод – посев на средуNNN, культивирование при 22 °С в течение 8-40 дней. В препарате «раздавленной» капли лейшмании удлиненной формы (10-12 мкм), имеется жгутик (рис. 44).

Биопроба – заражение лабораторных животных, микроскопия окрашенных по Романовскому-Гимзе мазков-отпечатков из внутренних органов с целью поиска паразита.

Серологический метод -постановкаРИФ, РСК, ИФА с целью определения антител к лейшманиям с диагностическими и эпидемиологическими целями. Чувствительным, специфичным, экономичным и высокоинформативным является ИФА (диагностический титр 1:400).

Рис. 44. Возбудитель лейшманиоза - Leishmania donovani

Лямблиоз

Возбудитель лямблиоза — Giardia lamblia (Lamblia intestinalis) имеет грушевидную форму с билатеральной симметрией, встречаясь как в вегетативной форме в дуоденальном содержимом или жидком кале, так и в виде цист исключительно в кале.

Материалом для исследования служат дуоденальное содержимое или фекалии.

Микроскопический метод. В нативных препаратах лямблии обладают плавной поступательной и вращательной подвижностью вокруг продольной оси. Передний конец лямблий широкий, закругленный с присасывательным диском в виде светлого округлого участка; задний (хвостовой) - вытянутый, заостренный, загнутый на выпуклую дорсальную сторону; размеры паразита 10-28х 8-12 мкм.

В окрашенных препаратах в цитоплазме вегетативных форм лямблий расположены 2 симметрично расположенных ядра, внутри тела по средней линии 2 аксостиля, отходящих от базальных зерен вблизи ядер и выходящих наружу в виде хвостовых жгутиков на заднем конце паразита (рис.45). От самостоятельных базальных зерен отходят передняя, средняя и вентральная пары жгутиков, а между задней и средней частями тела лямблий располагаются медиальные или парабазальные тела серповидной или треугольной формы.

Цисты лямблий при окраске раствором Люголя имеют правильную овальную форму, размеры 7-17х 5-12 мкм, коричневый или желтый цвет, тонкую, гладкую, двуконтурную оболочку, в передней части - слабо очерченные ядра (2 в незрелых, 4 в зрелых цистах), внутри цитоплазмы - нити аксонем и свернутые жгутики, а в задней части - серповидные парабазальные тела. Могут встречаться более мелкие погибшие или дегенеративные цисты серо-голубого цвета. Более четкая микрокартина наблюдается в препаратах, окрашенных железным гематоксилином.

Рис. 45. Возбудитель лямблиоза - Giardia lamblia

Трихомониаз

Трихомонады вызывают у человека кишечный трихомоноз (возбудитель Trichomonas hominis, паразитирует только в вегетативной форме и обнаруживается лишь в жидких фекалиях)и мочеполовой трихомониаз (возбудитель Trichomonas vaginalis). Трихомонады цист не образуют.

Материалом для исследования являются жидкие фекалии, выделения из влагалища, шейки матки, мочеиспускательного канала, секрет предстательной железы.

Микроскопический метод - исследование нативных или окрашенных по Романовскому-Гимзе и по Граму препаратов.

В нативных препаратах Trichomonas hominis имеют веретенообразную форму с передним закругленным и задним заостренным концом тела, размеры 5-10х5 мкм; движения толчкообразные поступательные и вокруг продольной оси за счет пучка из 3-5 жгутиков, отходящих от переднего конца тела, и ундулирующей мембраны (расположена продольно, окружена аксиальной нитью, заканчивается у заднего конца паразита в виде свободного концевого жгутика). Ундулирующая мембрана и концевой жгутик совершают периодические, волнообразные движения от переднего конца тела трихомонады к заднему. Ядро трихомонад в нативных препаратах обнаружить не удается. В цитоплазме трихомонад обнаруживают бактерии, реже — эритроциты.

Аналогична морфология Trichomonas hominis в окрашенных препаратах. В передней части паразита расположен малозаметный цитостом и пузырьковидное ядро, впереди от него блефаропласты с отходящими от них жгутиками и аксиальной нитью c плохо заметной ундулирующей мембраны, с противоположной стороны от ядра - парабазальное тело. Жгутики трихомонад в окрашенных препаратах заметны мало. Сбоку от ядра вдоль тела трихомонады проходит аксостиль, заканчивающийся на заднем конце в виде длинного шиловидного выроста или хвоста.

Т. vaginalis имеют грушевидную или веретеновидную форму, длину 10-30 мкм. Ядро расположено в передней части широкого конца тела паразита, спереди ядра от блефаропластов отходит 4 одинаковых жгутика длиной, равной длине тела трихомонады; ундулирующая мембрана занимает переднюю половину длины тела и не имеет свободной концевой нити. На заднем конце трихомонады тонкий аксостиль выглядит в виде шипика. Со стороны, противоположной аксостилю, ядро огибает удлиненная парабазальная фибрилла. В цитоплазме трихомонад находят многочисленные хроматоидные гранулы. Окрашенные трихомонады выглядят как округлые клетки с вытянутыми или треугольными ядрами (рис. 46).

Культуральный метод. Кишечные трихомонады удается выделить путем посева испражнений на среду Рейса (сывороточный МПБ). Для культивирования Т. vaginalis используют среды Павловой (натрия хлорид, натрия фосфат, калия гидрофосфат, лошадиная сыворотка), Джонсона—Трассела (пептон, агар, цистеин солянокислый, мальтоза, печеночный экстракт, раствора Рингера, раствор метиленового синего, сыворотка человека или лошади, пенициллин и стрептомицин для подавления роста сопутствующей микрофлоры; рН 5,8-6,0) или на среде, содержащей МПБ, 1 % глюкозы и 5-10 % инактивированной сыворотки крови человека или лошади, антибиотики (пенициллин и стрептомицин) для подавления роста посторонней микрофлоры.

Рис. 46. Возбудитель трихомониаза- Trichomonas vaginalis

Амебиаз

Возбудителем амебиаза является дизентерийная амеба (Entamoeba histolytica), цикл развития которой состоит извегетативной стадии и стадии покоя (цисты). Описано 4 формы амебы в вегетативной стадии: 1) тканевая; 2) большая вегетативная (magnum) 3) просветная - мелкая вегетативная (minuta) и 4) предцистная.

Острый амебиаз характеризуется наличием тканевой и большой вегетативной форм; у реконвалесцентов и цистовыделителей обычно обнаруживают просветную и предцистную формы. Просветные формы в дистальном отделе кишечника превращаются в цисты, способные выживать в неблагоприятных условиях.

Материалом для исследования являются испражнения, гной из пораженных органов, мокрота и др.

Микроскопический метод. При исследовании нативногопрепарата тканевая форма дизентерийной амебы выглядит в виде крупных сильно преломляющих свет образований неправильной формы, размером 18-45 мкм, с разграничением цитоплазмы на внутреннюю зернистую темную часть (эндоплазма) с пищеварительными вакуолями и наружную светлую прозрачную (экзоплазма). При температуре 20 — 40⁰ С амебы подвижны за счет выброса псевдоподий.

В окрашенных препаратах тканевая форма дизентерийной амебы имеет вытянутое или округлое тело, размеры 12-45 мкм, светлую гомогенную эктоплазму и мелкозернистую темную эндоплазму, в которой видны темноокрашенные эритроциты, ядро размером 3-5 мкм с тонкой оболочкой, в центре которого расположена пятиугольная кариосома (рис. 47).

Рис. 47. Дизентерийная амеба (Entamoeba histolytlca )

Просветная формадизентерийной амебы обнаруживается в значительных количествах в начальной стадии кишечного амебиаза или в конце периода обострения, в небольшом количестве у здоровых носителей. Эта форма имеет размеры 7-25 мкм. Разграничение тела амебы на эндо- и эктоплазму можно выявить только при образовании псевдоподий. В пищеварительных вакуолях эритроциты отсутствуют. В окрашенных препаратах просветная форма дизентерийной амебы имеет те же размеры, выявляется ядро диаметром 2-5 мкм, зерна периферического хроматина образуют серповидное скопление под ядерной оболочкой, что позволяет дифференцировать тканевую и просветную форму.

Цистыдизентерийной амебы при обработке раствором Люголя имеют правильную округлую или овальную форму, гладкую оболочку желтого или коричневого цвета, размеры 10-15 мкм; цитоплазма зрелых цист содержит 4 мелких ядра, незрелых – 1-2 крупных ядра правильной округлой формы с тонкой оболочкой и мелкую точечную или пятиугольную центрально расположенную кариосому. Цитоплазма незрелых цист содержит гликогеновые вакуоли светло-бурого цвета со смазанными контурами. В одном и том же препарате обнаруживают цисты различной степени зрелости.

Культуральный метод -посев исследуемых материалов на среды Павловой, с печеночным экстрактом и др.

Серологический метод -постановка РНГА, РА, РСК, РВИЭФ, ИФА для определения антител в крови больных, особенно для диагностики внекишечных форм амебиаза.

Балантидиаз

Возбудитель балантидиаза является Balantidium coli. Материалом для исследования при этой инвазии служит кал.

Микроскопический метод – исследование нативных и окрашенных препаратов. Балантидии имеют большие размеры (30-200х20-55 мкм), яйцевидную форму, макронуклеус, цитостом, сократительную и пищеварительные вакуоли, в которых находят эритроциты, лейкоциты или бактерии на разных стадиях переваривания. На поверхности балантидий обычно видны реснички с прилипшим к ним питательным субстатом.

Цисты В. coli, размером 40 — 65 мкм, в содержимом кишечника человека образуются редко, они имеют круглую форму, двухконтурную оболочку и бобовидное ядро.