Экспериментальные животные в вирусологии применяются для диагностики вирусных инфекций, получения иммунных противовирусных сывороток и компонентов крови (эритроцитов, лейкоцитов, плазмы и т.д.), моделирования вирусных инфекций с научными целями для изучения патогенеза, иммунитета, патоморфологии и т.д., а также для разработки способов специфической и неспецифической профилактики и лечения вирусных инфекций.
В вирусологии в качестве экспериментальных животных наиболее часто используются белые мыши, морские свинки, кролики, хомячки, хлопковые крысы, обезьяны. Чувствительной моделью при ряде вирусных инфекций являются новорожденные грызуны.
Правила заражения и вскрытия экспериментальных животных при вирусных и бактериальных инфекциях идентичны.
Экспресс-диагностика вирусных инфекций
Экспресс-диагностика вирусных инфекций применяется для выявления вирусов или их антигенов в различных видах клинического материал с помощью методов, характеризующихся высокой специфичностью, чувствительностью, информативностью и быстротой исполнения.
Реакция иммунофлюоресценции (прямой и непрямой методыРИФ) применяется для выявления вируса в материале, полученном от больных, в инфицированных культурах клеток и в организме чувствительных животных.
Иммунная электронная микроскопия ( ИЭМ) отличается возможностью одновременной концентрации вируса и его идентификации с помощью специфической противовирусной сыворотки. Для этого вируссодержащий материал обрабатывают противовирусной сывороткой, затем добавляют фосфорно-вольфрамовую кислоту или уранилацетат, смесь наносят на пленку (подложку) и высушивают. При электронной микроскопии при положительном результате находят скопления вирусных частиц. ИЭМ применяют для выявления в исследуемом материале полиовирусов, цитомегаловирусов, вирусов гепатита А и В, некультивируемых вирусов (аденовирусов в ткани миндалин, энтеро- и ротавирусов в фекалиях, вирусов оспы в оспенном детрите).
Встречный иммуноэлектрофорез обычно применяется для обнаружения в сыворотках крови больных вирусных антигенов (например, HBsAg у больных гепатитом В). Реакцию ставят на стеклянных пластинах в слое агаре, в котором вырезают два параллельных ряда лунок. Сыворотки крови, содержащие антигены помещают в лунки, расположенные ближе к катоду, а соответствующие противовирусные сыворотки (антитела) - в лунки, находящиеся ближе к аноду, после чего проводят электрофорез, при котором HBsAg, с отрицательным зарядом передвигается к аноду, а антитела — к катоду. Учет реакции осуществляется через 12-24 часа, положительные результаты реакции характеризуются образованием линий преципитации между определяемым антигеном (HBsAg ) и специфическим антителом.
Реакция гемадсорбции на твердой основе (РгадТО). Лунки полистироловых планшетов обрабатывают иммуноглобулином или иммунной сывороткой (например, против ротавирусов), вносят в них исследуемый вируссодержащий материал, через 30-60 мин лунки промывают буферным раствором, после чего добавляют взвесь сенсибилизированных специфическим иммуноглобулином эритроцитов и спустя 30-60 мин производят учет по наличию гемагглютинации. Если в исследуемом материале содержится специфический вирусный антиген, он соединяется с антителами иммуноглобулина (или сыворотки), адсорбированными на поверхности лунок, а затем с иммуноглобулинами на поверхности эритроцитов, в результате чего происходит гемагглютинация. В описанной модификации реакция применяется для выявления антигенов ротавирусов и других вирусов в фекалиях больных.
Самостоятельная работа студентов
