1. Возрастные особенности иммунологической реактивности. Динамика антителообразования в развивающемся организме.
2. Иммунологические взаимоотношения в системе мать – плод. Изоантигены эритроцитов АВО. Резус-антиген и его значение в патологии беременности.
Тема 15. УЧЕНИЕ ОБ ИММУНИТЕТЕ. КЛЕТКИ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ. ИММУННЫЙ СТАТУС ОРГАНИЗМА ЧЕЛОВЕКА И МЕТОДЫ ЕГО ОЦЕНКИ. СОВРЕМЕННЫЕ ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ
Перечень конкретных учебно-целевых вопросов
1. Иммунная система организма человека. Центральные и периферические органы иммунной системы.
2. Клетки иммунной системы и их характеристика. Популяции и субпопуляции лимфоцитов, их характеристика.
3. Формы иммунного ответа.
4. Межклеточная кооперация в иммунном ответе.
5. Цитокины (монокины, лимфокины, интерлейкины, интерфероны, колониестимулирующие факторы) и их свойства. Сеть цитокиновых взаимодействий.
6. Клиническая иммунология и ее задачи.
7. Методы оценки иммунного статуса организма человека.
8. Реакция иммунофлюоресценции (прямая и непрямая) и ее практическое применение.
9. Радиоиммунный и иммуноферментные методы, их сущность и практическое использование. Иммуноблотинг.
ИНФОРМАЦИЯ К ЗАНЯТИЮ
Серологический метод исследования. Методы оценки иммунного статуса организма человека. Иммуномодуляторы
Иммуноферментный анализ (ИФА) обладает высокой чувствительностью и специфичностью, применяясь наиболее часто для определения антител. Известный антиген адсорбируется на поверхности лунок полистироловой пластины, в которые затем вносят двукратные разведения исследуемой сыворотки. Планшеты инкубируют при 370 С в течение 1 часа, отмывают и вносят сыворотку против иммуноглобулинов человека, меченную ферментом (пероксидаза хрена). После инкубации в термостате при 370 в течение 1 часа планшет вновь промывают и во все лунки вносят пероксид водорода, а также индикатор – ортофенилендиамин. В случае положительной реакции пероксидаза в составе комплекса антиген-антитело вызовет разложение пероксида водорода с изменением цвета реакционной смеси со светло-желтого на красно-коричневый. Интенсивность окрашивания зависит от уровня антител в исследуемой сыворотке и может быть измерена на вертикальном спектрофотометре. ИФА сопровождается постановкой контролей с заведомо положительной и отрицательной эталонными сыворотками. Учет реакции осуществляется с помощью специального иммуноферментного анализатора – вертикального спектрофотометра (рис.40, см. приложение).
Радиоиммунный анализ (РИА). Сущность РИА сходна с ИФА, однако сыворотку против иммуноглобулинов человека метят не ферментом, а радионуклидом (Н3- тритием, С14, I125, и т.д.).Результаты реакции учитывают с помощью β и γ анализаторов.
Иммунофлюоресцентный метод (ИФМ). Антитела против антигенов вирусов и бактерий метят флюоресцирующим веществом (чаще всего изотиоцианатом флюоресцеина). Готовят микропрепараты на предметных стеклах из материала от больного (смыв из носоглотки, отделяемое бубона, мазки-отпечатки из трупного материала и т.д.) и обрабатывают их флюоресцирующей сывороткой. Если в микропрепаратах имеются антигены, соответствующие антителам флюоресцирующей сыворотки, то антитела соединяются с ними и образовавшиеся комплексы будут светиться при люминесцентной микроскопии. Эта модификация ИФМ называется прямой. При непрямом ИФМ микропрепарат обрабатывают сначала обычной сывороткой против определенного антигена, а затем - антиглобулиновой флюоресцирующей сывороткой. Метод иммунофлюоресценции широко применяется для диагностики различных инфекций, в частности, гриппа, острых респираторных вирусных заболеваний, сифилиса и т.д.
