Общие сведения о проведении дифференциации и идентификации выделенных микроорганизмов

Дифференциация и идентификация возбудителей - определение родовой, видовой и типовой принадлежности микроорганизмов является наиболее трудоемким и ответственным этапом микробиологического исследования. Он осуществляется на основании изучения целого комплекса свойств: морфологических, тинкториальных, культуральных, ферментативных и антигенных свойств.

При идентификации микроорганизмов необходимо работать только с чистой культурой, поскольку присутствие посторонних микроорганизмов может исказить результаты исследования и послужить поводом для ошибочного заключения.

Широкий спектр микроорганизмов, играющих роль в возникновении инфекционного процесса, требует изучения ферментативной активности выделенных микроорганизмов путем постановки большого количества различных биохимических реакций, позволяющих по сочетанию полученных результатов в комплексе с другими данными определить вид микроорганизма. Этот раздел работы наиболее трудоемкий, проводится в несколько этапов, требует приготовления большого количества питательных сред, дефицитных реактивов, посуды и т. д. Поэтому, для проведения исследований на современном уровне наиболее перспективным является внедрение в работу микробиологических лабораторий микрометодов идентификации микроорганизмов с использованием коммерческих слайд-тестов или тест-систем для получения стандартных, воспроизводимых и сопоставимых результатов при значительном повышении эффективности труда медперсонала лаборатории и снижении стоимости анализов.

Коммерческие микротест-системы или слайды для биохимической идентификации микроорганизмов различных групп - это готовые к использованию полистероловые планшеты или панели с сухими дифференцирующими средами.

Кроме тестов, размещенных в лунки планшета, фирмы предлагают ряд пробирочных реакций с использованием диагностических полосок: тест на гиппурат, бета-галактозидазу (ONP), бета-глюкуронидазу (GLR), тест на оксидазу (OXI), ацетоин (VPT). Указанные тесты могут быть использованы как в качестве дополнительных тестов к планшетным, так и в качестве самостоятельных тестов.

В России НПО "Аллерген" (г. Ставрополь) выпускает системы мультимикротестов (ММТ El, MMT E2) для биохимической идентификации энтеробактерий и приступает к выпуску системы ММТ V для дифференциации вибрионов. Проходит клиническую апробацию тест-система ММТ D для дифференциации коринебактерий. Находится в стадии разработки тест-система для идентификации неферментирующих грамотрицательных бактерий на 24 биохимических теста.

Научно-производственное объединение "Диагностические системы" (Нижний Новгород) выпускает диагностические системы одноразового использования для дифференциации микроорганизмов рода стафилококков и энтеробактерий.

Достаточно известны в нашей стране диагностические панели API, выпускаемые фирмой "bioMerieux" (Франция) для идентификации различных микроорганизмов.

В последнее время появляются и новые тест-системы для идентификации микроорганизмов, пригодные не только для автоматизированного считывания с помощью анализатора, но и для визуального учета результатов с последующей идентификацией с помощью кодов (профилей) или компьютерных программ. Для работы широкого круга микробиологических лабораторий вполне пригодны и доступны по цене Российские тест-системы ММТ Е1 и ММТ Е2 для идентификации наиболее важной группы бактерий рода Enterobacteriaceae и микротест-системы фирмы "АО LACHEMA" для идентификации широкого спектра возбудителей, ответственных за возникновение гнойно-воспалительных и инфекционных заболеваний