И продуктах животноводства

Для предотвращения отравления сельскохозяйственных и ди­ких животных, в том числе рыб, птиц, пчел, токсическими веще­ствами, применяемыми для обработки растений, почвы, водоемов и животных, а также с целью профилактики загрязнения продук­тов питания животного происхождения их остатками устанавливани pel плмопты их безопасного использования и максимально до-iivi'iiiMi.if у|ювни (МДУ) содержания в кормах и продуктах пита­нии

МДУ и кормах — предельно допустимое количество химичес­ком» iичпостна в кормах для сельскохозяйственных животных, вы-рнжсимое и мг/кг массы корма, при котором вещество не оказыва­ем три нагельного влияния на организм и не может содержаться в продуктах питания, полученных от животного, в количествах шише признанных допустимыми.

МДУ, выраженный в мг/кг массы корма, соответствует поня-i то р.р.щ — parts per million (частей на миллион), принятому за

р\>(Н'ЖОМ.

МДУ в продуктах питания — максимально допустимый уровень i одержания биологически активного вещества в растительных и «минутных продуктах, выраженный в тех же единицах, что и вели­чина в кормах.

Допустимые уровни содержания токсических веществ в питье-iioii воде, воде рыбохозяйственных водоемов, а также в воздухе ра­бочей зоны определяются показателями ПДК, выраженными в mi/л для воды и в мг/м³ для воздуха. Расшифровывают эти показа-кмш как предельно допустимые концентрации токсических ве­ществ в объектах исследования.

МДУ химических веществ для продуктов питания устанавлива­ют органы здравоохранения на основании комплекса показателей:

исследований хронической токсичности химического соедине­ния в 10—12-месячных опытах не менее чем на двух видах лабора­торных животных, из которых один не является грызуном;

кумулятивных свойств химического соединения;

персистентности вещества во внешней среде;

способности выделяться с молоком и оказывать отрицательное действие на потомство, а также других показателей.

На основании исследования хронической токсичности для животных устанавливают минимальную действующую дозу (мин. ДД) или максимальную недействующую (безвредную) дозу (макс. НД) для животных. Затем с помощью коэффициента запа­са, который колеблется в пределах от 30 до 100 в зависимости от свойств химического соединения, выводят мин. ДД для человека. Для этого величину мин. ДД для животных делят на коэффициент запаса. Например, величина мин. ДД токсического вещества, ус­тановленная экспериментально, составила 5 мг/кг массы живот­ного. Коэффициент запаса для данного соединения равен 50. Тог­да величина мин.ДД этого вещества для человека составит 5: 50 = 0,1 мг/кг массы. На основании полученного показателя рассчитывают суточную безопасную дозу. Для этого величину мин. ДД (в данном случае 0,1 мг/кг) умножают на среднюю массу человека, которую принято считать равной 50 кг (с учетом массы детей). Таким образом, суточная безопасная доза химического ве щества в нашем примере составит 0,1 мг/кг • 50 кг = 5 мг. На осно­вании этого показателя вычисляют величину МДУ токсического вещества для продуктов питания различных видов.

Несколько иначе устанавливают величину толерантности (МДУ) токсических веществ в продуктах питания за рубежом. В основу расчетов также положены хронические опыты на лабора­торных животных. Исследуемое вещество не менее чем в 3 дозах дают с кормом в течение 3 мес или даже 2 лет. На основании ис­следований устанавливают максимально недействующую, или подпороговую, дозу, выраженную в мг/кг корма, а не в мг/кг жи­вой массы животного, как это принято в нашей стране. Этот пока­затель переводят с помощью коэффициента пересчета в мг/кг мас­сы животного. Для белых крыс коэффициент пересчета равен 12,5. Допустим, что в хронических опытах на белых крысах максималь­но недействующая доза установлена равной 10 мг/кг корма. В пе­ресчете на массу животного эта величина будет равна 0,8 мг/кг (10: 12,5). По этой величине определяют безопасный уровень со­держания токсического вещества для определенного продукта пи­тания, входящего в состав рациона человека — Pd.

Этот показатель вычисляют по формуле

Pd =

Х50 Sa '

где X— максимально недействующая доза (подпороговая) для животных, выра­женная в мг/кг массы; 50 —средняя масса человека, кг; S— фактор безопаснос­ти, который обычно принимают равным 100. Эту цифру выводят из следующих соображений. Максимально возможные колебания чувствительности отдельных индивидуумов в пределах одного вида не превышают величины, равной 10. В этих же пределах колеблется чувствительность различных видов животных в пределах одного класса. Произведение этих двух величин составляет фактор безопасности. При определении величины Pd для фосфорорганических инсектицидов фактор безопасности иногда берут равным 20, если основным токсикологическим тестом, по которому определяют физиологическое действие токсического вещества, явля­ются начальные признаки угнетения холинэстеразы крови; г— масса продукта, входящего в дневной рацион человека.

Сумма величин Pd— безопасного ежедневного уровня по­ступления токсических веществ с каждым отдельным пищевым продуктом, входящим в состав дневного рациона, составляет ве­личину ADI — acceptle daily intake — безопасный уровень поступ­ления токсического вещества в организм человека в день.

Величины МДУ, или толерантности, токсических веществ в продуктах питания являются официальными, установленными органами здравоохранения на основании величин мин. ДД токси­ческих веществ, фактического уровня содержания остатков в гото­вых продуктах питания и других показателей.

МДУ токсических веществ в кормах для сельскохозяйственных

ж 11 потных устанавливает ветеринарная служба на основании экс­периментов на животных тех видов, для которых выводят этот по-к;патель. Для экспериментального обоснования МДУ должны |)мть проведены исследования острой токсичности ядохимиката для лабораторных и сельскохозяйственных животных, разработан метод определения его остатков в органах и тканях животных, мо­локе, мясе, яйцах, кормах, изучены хроническая токсичность ве­щества, степень его материальной кумуляции при длительном по­ступлении с кормом, выделении с молоком и яйцами.

По результатам экспериментов определяют максимально не­токсическую (подпороговую) (макс. НД) и минимально токсичес­кую (пороговую) дозу (мин. ДД), а также коэффициент матери­альной кумуляции по отношению к животным того вида, для ко­торого нормируются остатки. На основании показателей макс. НД и коэффициента материальной кумуляции можно рассчитать ве­личину МДУ токсического вещества в кормах для сельскохозяй­ственных животных данного вида.

Если при введении с кормом исследуемого вещества в течение 3 мес в дозах, соответствующих макс. НД, официальным методом анализа не удается обнаружить его остатки в органах и тканях жи­вотных, молоке, яйцах в количествах выше тех, которые приняты органами здравоохранения в качестве допустимых, величину МДУ данного химического вещества в кормах для дойного и откормоч­ного скота можно принять равной 1/2 макс. НД. Например, в опытах с карбофосом установлена макс. НД 100 мг/кг корма. При введении пестицида коровам в этой дозе официальным методом не установлено его выделение с молоком и накопление в мышеч­ной ткани. Экспериментально обоснованную величину МДУ кар­бофоса в кормах для откормочного и молочного скота можно при­нять равной 50 мг/кг корма.

В случае, если при введении с кормом токсического вещества обнаруживают его остатки в органах и тканях животного, молоке, яйцах, МДУ в кормах целесообразно определять, исходя из степе­ни материальной кумуляции вещества в тканях, выделения с мо­локом и яйцами. Например, при длительном поступлении с кор­мом гамма-изомера ГХЦГ его обнаруживают в мышцах крупного рогатого скота и овец в количествах, в 25 раз меньших по сравне­нию с его содержанием в корме. Коэффициент материальной ку­муляции мышцы — корм в этом случае составляет 0,04. Органами здравоохранения МДУ гамма-иззомера в мясе установлен равным 0,005 мг/кг.

Для нашего примера ПДК гамма-изомера ГХЦГ для откормоч­ного скота равна

^^=0,125 мг/кг корма.

Выделение ГХЦГ с молоком составляет около 10% от уровня его содержания в корме в пересчете на жидкое молоко. Коэффи­циент выделения корм — молоко равен 0,1- ПДК гамма-изомера ГХЦГ в корме для молочного скота можно вычислить по той же формуле

„„., МДУмолока 0,005 _{А Л}..

ПДКкорма=——------------------ =—--- =0,05мг/кг.

Л выдел. 0,1

Аналогичные расчеты можно произвести и для яиц. Коэффи­циент выделения гамма-изомера ГХЦГ с желтком при поступле­нии с кормом достигает 1. Поэтому ПДК гамма-изомера ГХЦГ в кормах для яйценоской птицы следует рекомендовать равной 0,005 мг/кг — величине МДУ гамма-изомера для яиц.

Таким образом, исходным показателем, по которому устанав­ливают ПДК токсических веществ в кормах для сельскохозяй­ственных животных, является их МДУ в мясе, молоке и яйцах.

ПДК токсических веществ в воздухе рабочей зоны и в питьевой воде устанавливают органы здравоохранения на основании комп­лекса токсикологических исследований, в воде рыбохозяйствен-ных водоемов — соответствующие органы Минрыбпрома и Мин-сельхоза России. Однако до настоящего времени нет единых мето­дических подходов к нормированию токсических веществ в воде рыбохозяйственных водоемов.

Ряд авторов (Н. И. Лесликов, 1960, и др.) предлагают в качестве тест-организмов при экспериментальном обосновании ПДК ток­сических веществ в воде рыбохозяйственных водоемов использо­вать дафнии и другие низшие гидробионты, которые служат пи­щей для рыбы. Такой выбор едва ли будет удачным. ПДК токси­ческих веществ устанавливают для рыбы, поэтому правильным было бы и в качестве тест-объекта использовать рыбу.

Схемой проведения опытов должно быть предусмотрено, так же как и в опытах на теплокровных животных, определение в ост­рых и хронических опытах максимально недействующей (неток­сичной), минимально токсичной (пороговой) и смертельной кон­центраций, а также СК₅о при 96-часовом контакте токсического вещества с рыбой. Базисной концентрацией, по которой устанав­ливают ПДК, целесообразно принять максимально недействую­щую концентрацию. При этом обязательно должны быть предус­мотрены исследования по разработке методики определения ток­сического вещества в воде, планктоне, рыбе, изучена динамика i-1'о остатков в воде и рыбе и установлены пути попадания токси­канта в рыбохозяйственный водоем.

ПДК токсических веществ в воде рыбохозяиственных водоемов не может служить критерием оценки санитарного состояния водо­ема, как это имеет место с ПДК или МДУ токсикантов в кормах или продуктах питания. Следовательно, ПДК химических веществ и воде рыбохозяиственных водоемов является лишь исходным по­казателем, на основании которого могут быть установлены регла­менты применения пестицидов и других веществ в зоне водоемов или проведен контроль за работой очистных сооружений про­мышленных предприятий, сбрасывающих сточные воды в реки или моря. Поэтому ПДК в воде рыбохозяиственных водоемов не может быть меньше чувствительности аналитического метода оп­ределения остатков этого вещества в воде.

По показателю ПДК или МДУ химических веществ в кормах и продуктах питания и скорости снижения их остатков в почве, рас­тениях или организме животных устанавливают регламенты (огра­ничения) по применению веществ на растениях или животных. Ос­новным регламентом на растениях служит «время ожидания» — срок (в днях) от момента последней обработки участков (кормовых культур, лугов, пастбищ) до уборки урожая на корм животным или их выгона на обработанное пастбище. Это время соответствует про­должительности исчезновения остатков пестицида до уровня, рав­ного ПДК, установленной для кормов, в днях с момента последней обработки. Например, ПДК пестицида X в кормах для сельскохо­зяйственных животных установлена равной 2 мг/кг. Исчезновение остатков этого пестицида на люцерне до 2 мг/кг происходит в тече­ние 25 дней со дня обработки. Следовательно, «время ожидания» пестицида X на люцерне должно составлять 25 дней.

Для химических средств защиты животных устанавливают «сроки убоя», величина которых соответствует времени (в днях) снижения остатков в органотропном органе животного до МДУ химического вещества, установленного органами здравоохране­ния для мяса.

Особенно жесткие регламенты должны быть установлены в случаях применении пестицидов, антигельминтиков и других ве­теринарных препаратов для дойного крупного рогатого скота и яйценоских птиц. В молоке и яйцах, как правило, не допускается или допускается на очень низком уровне содержание остатков токсических веществ. Поэтому для обработки дойных животных и яйценоской птицы следует применять такие препараты, которые очень быстро разрушаются в организме и не выделяются с моло­ком и яйцами. Если такой возможности нет, преимущество следу­ет отдавать таким препаратам и методам применения, при исполь­зовании которых отмечается наиболее низкое выделение. Однако и для использования этих препаратов должны быть установлены жесткие регламенты.

 

1.5. МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТОКСИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ

В ОБЪЕКТАХ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ, ТКАНЯХ ЖИВОТНЫХ

И ПРОДУКТАХ ЖИВОТНОВОДСТВА

Химико-токсикологический анализ в ветеринарной токсиколо­гии имеет решающее значение. При установлении диагноза на от­равление, изучении миграции токсических веществ в объектах ок­ружающей среды и организме животных, проведении ветеринарно-санитарной оценки кормов и продуктов питания используют, как правило, только химико-аналитические методы исследования. Особенно их значение возросло за последние годы, когда стали уделять особое внимание охране окружающей среды, в системе которой большое место занимает мониторинг — накопление фак­тических данных по уровню загрязнения объектов окружающей среды токсическими веществами различного происхождения.

По данным Гунтера (1977), чувствительность аналитических методов определения пестицидов за 25 лет (1941 — 1965) выросла в десятки тысяч раз. Если в 1941 г. пределы обнаружения большин­ства токсических веществ составляли 10мг/кг, то в 1965 г.— 0,1 мкг/кг.

В настоящее время для анализа остатков химических веществ в объектах окружающей среды и биологическом материале исполь­зуют современные физико-химические методы, такие, как тонко­слойную и газожидкостную хроматографию, ультрафиолетовую, инфракрасную и атомно-абсорбционную спектрометрию, масс-спектрометрию и хромас-спектрометрию.

Современные методы исследования должны быть по возмож­ности специфичными, т. е. позволяли бы открывать искомое ве­щество в присутствии других аналогичных соединений, быть дос­таточно чувствительными и позволяли бы определять миллион­ные доли вещества в 1 кг субстрата. Особенно это важно для мето­дов, предназначенных для санитарной оценки кормов и продуктов животноводства, а также для изучения динамики остатков пести­цидов в воде, растениях и организме животных.

Степень определения химических токсикантов должна состав­лять не менее 60 % от количества стандартного вещества, внесен­ного в пробу. Методы должны быть удовлетворительно точными (не менее ± 20 %) и хорошо воспроизводимыми.

Методы определения токсических веществ в патологическом материале, объектах окружающей среды, кормах и продуктах пи­тания животного происхождения включают в себя выделение ток­сического вещества из пробы. Выделение яда из пробы может быть проведено путем мокрого или сухого озоления, отгонки с во­дяным паром или же экстракцией одним или несколькими орга­ническими растворителями.

Сухое озоление проводят под действием высокой температуры (до 500 °С) в муфельной печи. Этот метод в основном используют для выделения металлов.

Мокрое озоление применяют значительно чаще и проводят при помощи концентрированных неорганических кислот, чаще всего смеси азотной, серной кислот и окислителей.

Выделение токсических веществ методом отгонки с водяным паром или дистилляции используют для легколетучих химичес­ких соединений. Сущность метода заключается в том, что пробу тщательно измельчают до кашицеобразного состояния или же разрушают неорганической кислотой, разбавляют водой, а за­тем воду перегоняют, нагревая колбу или подавая в нее пар от парообразователя. Токсические вещества переводятся в дистил­лят.

Чаще других в ветеринарной практике выделяют токсические вещества путем их экстракции из пробы органическими раствори­телями. Для этого пробу тщательно измельчают, помещают в кол­бу, а затем заливают одним или несколькими органическими ра­створителями. Объем органического растворителя должен быть не менее чем в 2 раза больше массы или объема пробы. Экстракцию токсиканта проводят путем выдерживания пробы с органическим растворителем в течение 20—24 ч, перемешивания на шюттель-ап-парате в течение 1—2 ч или смешивания в течение нескольких ми-пут при большой скорости вращения перемешивающего устрой­ства (ультратораксы, омнимиксары и др.). Последний способ предпочтителен, так как при этом образуется гомогенная масса, в которой создается наиболее тесный контакт органического ра­створителя с субстратом, а следовательно, наиболее полно извле­каются токсические вещества, содержащиеся в пробе. Для этой цели также используют аппарат Соксклета, в котором токсическое вещество экстрагируется при многократном промывании субстра­та кипящим органическим растворителем. Аппарат Соксклета обеспечивает более полное извлечение токсиканта из пробы по сравнению с другими методами.

При любом способе выделения токсического вещества в экст­ракт переходит значительное количество примесей, мешающих определению: жиры, пигменты, воск, белки, соли и др. Для осво­бождения экстракта от этих веществ используют различные спо­собы очистки: путем омыления, вымораживания, осаждения, пе­рераспределения из одного органического растворителя в другой с помощью специальных колонок и др. Последние зависят от вида анализируемого соединения и субстрата, в котором он нахо­дится.

Для того чтобы повысить чувствительность метода анализа, эк­стракты концентрируют до небольшого объема, достаточного для проведения исследований данным методом. Обычно конечные объемы экстрактов составляют 0,5—5 мл. Для концентрирования используют специальные аппараты Кудерна—Данича, вакуум-ротационные испарители. Концентрирование также можно прово­дить в токе воздуха или азота. В практических условиях наиболее приемлемым способом является концентрирование в токе воздуха. Для этого экстракт заливают в фарфоровую выпарительную чаш­ку, ставят ее под шторку вытяжного шкафа и включают тягу. При определении высоколетучих веществ при концентрировании воз­можны значительные потери яда, поэтому при этой операции не­обходимо выполнять следующие требования: не концентрировать конечные экстракты при повышенной (выше 40 °С) температуре, не упаривать досуха очищенные экстракты.

Индикацию токсичных веществ проводят следующими основ­ными методами.

Биологические методы. Применяют главным образом для опре­деления некоторых пестицидов и микотоксинов. Они основаны на чувствительности низших животных, растений или тканей к действию токсического вещества. Так, к инсектицидам и акарици-дам наиболее чувствительны различные членистоногие. Чаще дру­гих для определения ансектоакарицидов используют комнатных мух, мух-дрозофил, личинок комаров и рачков-дафний. Для опре­деления микотоксинов применяют кожные пробы на кроликах или аквариумных рыбах гуппи.

Некоторые из микотоксинов, в частности трихотецены и дру­гие, продуцируемые грибом Fusarium sporotrihioides, обладают очень сильным дерматоцидным действием, поэтому реакция кожи является специфической по отношению к метаболитам этих видов грибов. Из всех позвоночных животных наиболее чувствительны по отношению к большинству токсических веществ рыбы, поэто­му их используют для определения не только микотоксинов, но и многих других токсикантов.

Биологические методы индикации обладают высокой чувстви­тельностью, однако в большинстве своем они неспецифичны и не позволяют установить вид токсического вещества. Однако эти ме­тоды широко применяют для общей токсикологической оценки кормов при отравлениях животных на первой стадии лаборатор­ного токсикологического исследования. С помощью этих методов можно установить отравление и исключить заболевания другой этиологии.

Биохимические методы. Основаны на подавлении некоторыми токсическими веществами активности отдельных биохимических систем. В ветеринарном токсикологическом анализе наиболее ча­сто применяют ферментный метод определения фосфороргани-ческих и карбаматных инсектицидов. Он основан на том, что со­единения этих групп в условиях in vitro подавляют активность холинэстеразы. Чувствительность метода при определении некото­рых ФОС достигает 0,01—0,001 мг/кг. Однако эти методы обладают групповой специфичностью и позволяют установить всю группу в целом, не давая возможности установить вид ФОС.

Кроме этого некоторые ФОС, в частности производные тио- и дитиофосфорных кислот, очень слабо ингибируют активность фер­мента in vitro и нуждаются в предварительной активации.

Химические методы. Основаны на количественном определении осадка или окрашенного комплекса, образуемого при взаимодей­ствии открываемого вещества с другим химическим соединением. Химические методы анализа, применяемые в ветеринарной ток­сикологической практике, основаны на осаждении, титрометрии, колориметрии, спектрофотометрии.

Реакция осаждения базируется на образовании нерастворимого в воде осадка при взаимодействии открываемого химического ве­щества с другим химическими соединением, вводимым в экст­ракт. По реакции осаждения определяют некоторые алкалоиды, натрия хлорид, ТМТД и другие токсические вещества. Однако ме­тоды определения ядовитых веществ этой реакцией имеют низкую чувствительность, недостаточную специфичность и точность, по­этому их применяют ограниченно.

Более широко используют титрометрические методы. При­мером может служить определение натрия хлорида при осажде­нии хлоридов серебра нитратом с последующим титрованием избытка серебра роданидом аммония в присутствии в качестве индикатора железоаммонийных квасцов. Но и титрометричес­кие методы недостаточно чувствительны и утрачивают свое практическое значение в связи с развитием новых, более совер­шенных способов.

В практике химико-токсикологических исследований находят широкое применение колориметрические методы, основанные на определении интенсивности окраски цветных комплексов, обра­зующихся при взаимодействии открываемого вещества с другим химическим соединением, вводимым в раствор. В последние годы все чаще используют фотоэлектроколориметрические методы, при которых интенсивность окрашивания цветных комплексов определяют с помощью фотоэлектроколориметра. По чувстви­тельности и точности колориметрические методы превосходят ос­нованные на осаждении и титрометрии способы.

Физико-химические методы. К физико-химическим методам от­носят различные методы хроматографии (колоночную, бумажную, тонкослойную, газожидкостную и жидкостную), полярографию, ультрафиолетовую и инфракрасную спектрометрию, атомную аб­сорбцию, методы нейтронно-активационного анализа.

Из хроматографических методов в практике ветеринарно-ток-сикологического исследования наибольшее применение находят тонкослойная и газожидкостная хроматографии (ТСХ и ГЖХ), разработанные русским ученым М. С. Цветом (1903). Эти методы являются одними из основных в аналитической химии. Преиму­щество их состоит в том, что они обладают высокой специфично­стью и чувствительностью и позволяют за один аналитический iipiii-м определить сразу несколько химических соединений. Мож­но спожпую смесь химических соединений, содержащихся в ана-пи шруемой пробе, разделить на отдельные вещества, а затем каж­дое hi них определить каким-либо химическим или физическим методом.

Тонкослойную хроматографию наиболее широко применяют в практических лабораториях. Принцип полуколичественного ме­тода состоит в том, что смесь химических веществ, содержащихся в анализируемой пробе, наносят на пластинку и разделяют в тон­ком слое инертного порошка (селикагель, окись алюминия и др.) с помощью смеси органических растворителей (подвижный ра­створитель). Пластинку опрыскивают раствором проявляющего реактива, в результате чего на ней появляются в виде окрашенных пятен исследуемые химические соединения. Идентифицируют от­крытые вещества по величине Rf — частному от деления расстоя­ния, пройденного искомым веществом отточки нанесения (линия старта) до места дислокации, к расстоянию, пройденному под­вижным растворителем. Количество открываемого вещества опре­деляют по интенсивности окраски пятна и его размерам.

В практике ветеринарных химико-токсикологических исследо­ваний тонкослойная хромотография используется для определе­ния многих пестицидов, алкалоидов, микотоксинов, органичес­ких соединений тяжелых металлов. Метод прост по технике ис­пользования, не требует сложного оборудования, обладает доста­точно высокой специфичностью и чувствительностью (0,05— 1,0 мкг в пробе).

Газовую хроматографию применяют для одновременного разде­ления смеси химических веществ, их последующей идентифика­ции и количественного определения. Разделение смеси осуществ­ляют на стеклянных или металлических колонках длиной 1—3 м, заполненных твердым адсорбентом с нанесенной на него жидкой фазой. В качестве последней чаще всего используют высокомоле­кулярные жидкости с высокой температурой кипения (полиэти-ленгликоли, силиконовые масла и др.). Подвижной фазой служит инертный газ (азот и др.).

Индикацию разделенных химических веществ осуществляют с помощью детектора. В газовых хроматографах, предназначенных для анализа токсических веществ, чаще всего используют детектор электронного захвата (ДЭЗ), термоионный детектор (ТИД), пла­менно-фотометрический детектор (ПФД). Абсолютная чувстви­тельность детектирования различных химических соединений до­стигает 0,01—0,02 нг в пробе, относительная чувствительность — 0,1—0,5 мкг/кг. В практике химико-токсикологического анализа газовую хроматографию применяют для открытия многих пести­цидов, органических соединений ртути, полихлорированных би-фенилов и других токсических соединений. Однако возможности газовой хроматографии далеко не исчерпаны. Газовая хроматография, и в частности ГЖХ, имеет некоторые недостатки: не позво­ляет прямым способом разделить и идентифицировать вещества, не обладающие летучестью и не способные прямым путем перехо­дить в газообразное состояние.

Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) осно­вана на том же принципе, что и газожидкостная, с той лишь раз­ницей, что разделение вещества происходит в двух несмешивающихся жидкостях. Одна из них — обычно высокомолекулярная не­полярная жидкость —служит неподвижной фазой, вторая — низ­комолекулярная — подвижной. Подвижную фазу под высоким давлением пропускают через неподвижную, в результате чего сложная смесь разделяется на отдельные соединения. С помощью ВЭЖХ можно разделить твердые и жидкие смеси, не превращая их в газообразное состояние, как это бывает при ГЖХ.

Недостаток этого метода — ограниченное число детектирую­щих систем. Серийные жидкостные хроматографы, выпускаемые отечественными фирмами, оборудованы лишь одним детекто­ром — спектрофотометром.

Спектральные методы. Наибольшее применение в практике анализа токсических веществ получила ультрафиолетовая спект­рометрия. Принцип работы ультрафиолетового спектрофотометра основан на поглощении растворами химических веществ лучей в ультрафиолетовом спектре. Этот метод принципиально отличает­ся от фотоэлектроколориметрического тем, что оптическая плот­ность анализируемых экстрактов измеряется в ультрафиолетовой области спектра.

Инфракрасная спектрометрия основана на поглощении хими­ческим веществом лучей в инфракрасной области спектра. Сте­пень поглощения неодинакова у разных структурных групп хими­ческого вещества, поэтому инфракрасная спектрограмма пред­ставляет собой конгломерат пиков с большим количеством вер­шин. Инфракрасную спектрометрию, как правило, не используют для определения микроколичеств химических веществ в биологи­ческих субстратах, а применяют главным образом для расшифров­ки структуры выделенного химического вещества.

Атомно-абсорбционная спектрометрия основана на поглощении отдельными атомами химических элементов световых лучей в оп­ределенной области спектра. Поэтому исследуемые химические вещества вначале минерализуются, а затем в состоянии раствора подвергаются воздействию лучами определенной длины, соответ­ствующей поглощающей способности того или иного элемента. По степени поглощения лучей определяют его количественное со­держание. Этот метод находит широкое применение главным об­разом при определении металлов и металлоидов (ртуть, свинец, кадмий, медь, цинк и др.).

Нейтронно-активационный анализ основан на облучении пробы нейтронами, в результате чего возникает наведенная радиация, по степени которой и определяют количественный уровень содержа­ния исследуемого элемента. Однако метод требует сложного обо­рудования, поэтому малоприемлем в практических условиях.

Критерии оценки методов определения остатков токсических ве­ществ. Методы определения остатков токсических веществ в объектах ветеринарного надзора обычно характеризуют по чув­ствительности, точности и определяемости.

Чувствительность метода — наименьшее количе­ство химического вещества, открываемое при заданных условиях метода. Она может быть абсолютной и относительной. Абсолют­ная чувствительность — наименьшее количество вещества, кото­рое можно определить данным методом или реакцией, лежащей в ее основе. Так, с помощью газожидкостной хроматографии можно определить 0,05 нг ТХМ-3. Однако для исследования используют лишь часть аликвоты, предназначенной для анализа, которая со­ответствует определенной части пробы. Поэтому для полной ха­рактеристики метода целесообразно ввести такое понятие, как от­носительная чувствительность — чувствительность по отношению к одному и тому же объему или массе. Обычно относительную чувствительность принято выражать в мг/кг пробы.

Точность метода. Под точностью метода, как правило, понимают различие между истинной и экспериментально найден­ной величиной. При этом за истинную величину может быть при­нято количество вещества, вносимого в пробу из стандартного ра­створа. Поэтому точность метода может быть охарактеризована как разница между количеством вещества, внесенного в пробу и определенного данным методом аналитического исследования. Точность — это величина стандартного относительного отклоне­ния, установленного по результатам воспроизведения методики при'внесении данного количества вещества в пробу.

Точность метода соответствует величине стандартного относи­тельного отклонения и вычисляется по формуле

_ \ЦХ-Х)2

N-1

а (стандартное отклонение)=

где N— число измерений; X— примерная величина; X —среднее арифметичес­кое; I — знак суммирования.

Сначала рассчитывают среднее арифметическое X, затем абсо­лютную величину разности между X и значением отдельного из­мерения; разность возводят в квадрат и эту величину суммируют. Сумму делят на N— 1. Квадратный корень из полученного резуль­тата представляет собой стандартное отклонение а.

Однако точность метода может быть вычислена применительно к определяемости. Поэтому сначала устанавливают определяемость метода, а затем его точность по показателю относительного стандартного отклонения.

Определяе мость метода — средняя величина, пока­зывающая процент открытия вещества в пробе после его внесения из стандартного раствора в количествах, соответствующих пределу определения и максимально возможному уровню содержания.

1.6. ЭМБРИОТОКСИЧЕСКОЕ, ГОНАДОТОКСИЧЕСКОЕ,

ТЕРАТОГЕННОЕ И МУТАГЕННОЕ ДЕЙСТВИЕ

ТОКСИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ

Отдельные токсические вещества при поступлении в организм животных вместе с кормом или в результате обработок могут от­рицательно влиять на репродуктивную функцию животных, вызы­вая эмбриотоксическое, тератогенное, гонадотоксическое дей­ствие. По этой причине токсические вещества, которые могут по­ступать в организм животных с кормом постоянно или в течение определенного периода, должны подвергаться исследованию на эмбриотоксичность, тератогенность и гонадотоксичность. Также целесообразно исследовать на наличие этих действий некоторые лекарственные препараты и премиксы, если их используют мно­гократно.

Эмбриотоксическое действие. Это способность исследуемого ве­щества отрицательно действовать на развивающиеся эмбрионы. В медицинской токсикологии эмбриотоксическое действие изучают на самках белых крыс, которым в течение всей беременности вво­дят внутрь через зонд или дают с кормом препарат. На 17—19-й день беременности, начало которой устанавливают по результатам исследования вагинальных мазков, крыс убивают, подсчитывают число плодовместилищ, желтых тел в яичниках, живых и мертвых плодов. Сравнивая результаты этих исследований в опытной и контрольной группах, устанавливают степень эмбриотоксической активности препарата. Часть беременных крыс из опытных групп оставляют для родов, при этом учитывают продолжительность бе­ременности, число плодов, их массу, длину туловища новорож­денных крысят, их развитие (увеличение длины и массы за опре­деленный срок, время открытия глаз, покрытия шерстью, начала самостоятельного передвижения по клетке и поедания корма). Кроме того, учитывают выживаемость крысят, распределение их по полу. При этом отмечают: избирательную эмбриотоксич­ность — эффект проявляется в дозах, не токсичных для материнс­кого организма; общую эмбриотоксичность — проявляется одно­временно с развитием интоксикации организма матери; отсут­ствие эмбриотоксичности — эффект не отмечается при признаках интоксикации материнского организма (Медведь, 1968).

Каких-либо методических подходов к определению эмбриотоксических свойств препаратов ветеринарного назначения нет.

I la первых этапах, по-видимому, целесообразно в качестве модели использовать также белых крыс, так как опыты на сельскохозяй­ственных животных затруднительны из-за продолжительных сро­ков беременности и сравнительно небольшого числа особей в по­мете (за исключением свиней). В том случае, если будет установ­лено, что исследуемые соединения обладают общей или избира­тельной эмбриотоксичностью, ставят опыты на животных, и прежде всего на свиньях. Препараты в зависимости от их целевого назначения и способа применения целесообразно давать с кор­мом, вводить внутримышечно или наносить накожно.

Тератогенное действие. Это такое действие, при котором нару­шается формирование плода в период его эмбрионального разви­тия. Проявляется оно в виде уродств. Тератология как наука полу­чила развитие после случаев с талидомидом — лекарственным препаратом, широко применявшимся беременными женщинами в Западной Европе в качестве снотворного и седативного средства. В результате было зафиксировано рождение детей с врожденными пороками развития.

В медицинской токсикологии тератогенное действие пестици­дов определяют на белых крысах. Для этого препарат животным вводят внутрь через 1 день в течение всей беременности. Часть животных опытных групп убивают на 17—20-й день беременнос­ти, часть оставляют до родов. При вскрытии убитых крыс опреде­ляют среднее число желтых тел на одну самку, нормально и не­нормально развивающихся зародышей, а также резорбтированных плодов.

При естественных родах учитывают число родивших самок, народившегося потомства, в том числе мертворожденных, уста­навливают среднюю массу потомства, длину туловища, конечнос­тей и другие морфологические особенности (Медведь, 1969).

Тератогенное действие препаратов на сельскохозяйственных животных не изучают.

При проявлении тератогенного эффекта возможны следующие уродства: отсутствие головного мозга (анэнцефалия); недоразви­тие головного мозга (микроцефалия); повышенное содержание цереброспинальной жидкости в желудочках головного мозга (гид­роцефалия); мозговая грыжа (энцефалоцелия); расщепление пер­вых дужек позвонков (спина бифида). Кроме того, возможны анормальности в других органах: отсутствие глаз (анофтальмия); наличие одного глаза (циклопия); заячья губа; волчья пасть; от­сутствие конечностей (перамилия); отсутствие хвоста; укорочение хвоста и др.

Гонадотоксическое действие. При изучении гонадотоксического действия устанавливают влияние исследуемого препарата отдель­но на половую сферу самок и самцов. Опыты проводят на белых крысах. На самках исследуют действие препарата на астральный цикл и овогенез, на самцах — на подвижность, морфологию, рези-стентность спермиев и сперматогенез.

Эстральный цикл определяют, исследуя мазки из влагалища. Для этого глазной пипеткой вводят во влагалище подогретый фи­зиологический раствор (2—3 капли), несколько раз пропускают его через пипетку, а затем вводят обратно во влагалище. После этой процедуры с помощью предметных стекол готовят мазки из влагалища, фиксируют их над пламенем и окрашивают в течение 1 мин 1%-ным водным раствором метиленовой сини. Мазок про­сматривают под микроскопом при малом увеличении.

Различают следующие основные стадии эстрального цикла:

фаза проэструса (предтечки) продолжается несколько часов и характеризуется преобладанием в мазках эпителиальных клеток;

фаза эструса (течки) продолжается 1—2 дня. В этой стадии в основном присутствуют ороговевшие полигональные клетки (че­шуйки);

метэструс (послетечка) имеет длительность 1—2 дня и характе­ризуется присутствием наряду с чешуйками эпителиальных кле­ток и лейкоцитов;

фаза диэструса (фаза покоя между течками) характерна присут­ствием лейкоцитов и слизи. Продолжительность этой фазы равна половине всего цикла.

Изменение продолжительности стадий эстрального цикла или характера клеток на различных его стадиях является показателем действия исследуемого вещества.

Для изучения действия химического вещества на овогенез гото­вят гистологические срезы из яичников и определяют стадии раз­вития фолликулов в опытных и контрольных группах животных.

При изучении гонадотоксического действия препаратов на самцов определяют соотношение подвижных и неподвижных форм спермиев, наличие патологических форм, их резистентность и фазы сперматогенеза (Медведь, 1969).

Мутагенное действие. Некоторые химические вещества наруша­ют передачу генетической информации, вследствие чего возмож­но появление мутантов — особей с признаками, не свойственны­ми данному виду. Поэтому изучение мутагенных свойств пестици­дов и других химических веществ — один из необходимых этапов токсикологического исследования. В ряде стран с этой целью ис­пользуется скрининговый тест — тест Эймса. В качестве тест-орга­низма используются отдельные штаммы бактерий группы сальмо­нелл, высокочувствительных к химическим мутантам. При нали­чии потенциальной мутагенности у исследуемого химического ве­щества происходит расщепление генов и резко возрастает количество колоний на плотной питательной среде. Однако мута­генность химического вещества, выявленная с помощью этого те­ста, не может быть признана абсолютной, так как высшие живот­ные имеют мощные защитные системы, которые предохраняют клетки, ответственные за передачу генетической информации, от воздействия внешних факторов, в том числе и химических ве­ществ. Во многих случаях под действием ферментных систем хи­мическое вещество может быть детоксицировано, прежде чем оно достигнет «мишени».

1.7. МЕТАБОЛИЗМ ТОКСИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ

Физиологическое действие токсических веществ на функцио­нальные системы организма во многих случаях зависит от поведе­ния этих веществ в организме. Организм с помощью защитных систем, сформировавшихся в процессе его эволюции, освобожда­ется от токсического вещества в результате выведения его через выделительные системы, или же вещество подвергается детокси-кации, когда образуются нетоксичные метаболиты или конъюга-ты. Физиологическое действие химических веществ естественного или искусственного происхождения, по существу, определяется типом химических реакций, в которые вступает вещество, т. е. его метаболизмом. Меткаф (1966) характеризует основные типы хи­мических превращений пестицидов в живом организме. Эти типы превращений характерны и для других токсикантов.

Инактивация. Это тип метаболизма, при котором происходит очень быстрое выведение токсического начала из организма, прежде чем оно достигнет «мишени», т. е. физиологических сис­тем, в которых может проявиться его токсический эффект. Этот тип метаболизма свойствен водорастворимым соединениям, кото­рые могут очень быстро выводиться мочевыделительной систе­мой.

Гидролиз. В результате гидролиза происходит расщепление жи­ров, белков и углеводов до эфиров, кислот и спиртов. Возможно, за счет этих же ферментов, которые обеспечивают гидролиз био­логических субстанций, обеспечивается гидролиз токсических ве­ществ. Наиболее быстро метаболизируют по этому пути токсичес­кие вещества, являющиеся эфирами, например пестициды, про­изводные фосфорной и карбаминовой кислот.

Окисление. Эти реакции у млекопитающих осуществляются в основном в печени в результате действия ферментов оксидаз. По этому типу происходит как дезактивация некоторых токсических веществ, так и повышение физиологической активности, напри­мер образование оксиизомеров фосфорорганических соедине­ний, производных тио- и дитиофосфорных кислот. В результате такого метаболизма возможно возрастание их физиологической активности.

Редукция. По этому типу метаболизируют ароматические со­единения, имеющие в составе нитрогруппы. Возможна их редук­ция в аминогруппы, в результате чего снижается физиологическая активность токсических веществ, например ДНОКа, метафоса, тиофоса, гербицидов триазинового ряда. Такое превращение про­исходит в основном под действием микроорганизмов, в частности бактерий рубца жвачных животных.

Конверсия. Это редкий тип метаболических реакций, возмож­ных, по-видимому, под действием как оксидаз, так и микроорга­низмов. При этом структура соединения значительно не изменя­ется, однако повышается стабильность самого соединения. При­мером конверсии может служить образование эпоксида гептахло-ра из гептахлора.

Детоксикация. Обычно так называют реакцию, при которой об­разуется конъюгат между токсикантом и биологической субстан­цией организма, например образование конъюгатов с глюкуроно-вой кислотой.

Метаболизм одного и того же токсического вещества в орга­низме может идти одновременно несколькими путями, так как химическое соединение может быть атаковано сразу несколькими метаболизирующими агентами. Например, превращение П|п' ДДТ может идти по пути образования П|П* ДДД и njn¹ ДДЭ. В первом случае решающее значение имеют микроорганизмы, под действи­ем которых происходит восстановительное дехлорирование П|П* ДДТ в nin¹ ДДД и во втором — ферментов печени, в результате чего щп' ДДТ превращается в п^¹ ДДЭ. Преимущество того или иного пути зависит от активности обоих факторов в организме животного. Так, у жвачных животных значительную роль в обмен­ных процессах играют микроорганизмы рубца, поэтому метабо­лизм П[п' ДДТ идет в основном через г^п¹ ДДД, тогда как у птицы этот фактор не играет решающей роли. В таком случае ведущее значение имеют ферменты печени, поэтому превращение п^¹ ДДТ идет в основном с образованием п^¹ ДДЭ.

Различия в характере метаболизма токсических веществ в орга­низме животных разных видов, которые определяются преоблада­нием того или иного метаболизирующего фактора, играют веду­щую роль в избирательности токсичности физиологически актив­ных соединений.

1.8. ИЗБИРАТЕЛЬНАЯ ТОКСИЧНОСТЬ

Различия в чувствительности животных разных видов к одно­му и тому же токсическому веществу определяются понятием «избирательная токсичность». Так, например, ЛД₅о хлорофоса — фосфорорганического инсектицида — при введении внутрь для белых мышей равна 600 мг/кг, для кур— 180мг/кг (Г. Шрадер, 1964; Б. А. Фролов, 1966), тролена — другого фосфорорганическо­го соединения — 1800 и 5000 мг/кг соответственно (Мак Коллис-тер, 1967). Таким образом, чувствительность кур к хлороформу <>к;палась в 3 раза выше, чем мышей, тогда как к тролену — в t раза ниже. Хлорофос является производным фосфоновой кисло­ты, имеет в алкоксифосфорильной части молекулы Р=О-группу, за счет которой в основном и проявляется физиологическое дей­ствие пестицида, связанное с подавлением активности холинэс-теразы. Тролен является производным тиосфосфорной кислоты, имеет в своем составе P=S-rpynny, обладающую очень низкой антихолинэстеразной активностью в условиях in vitro. В организ­ме животных происходит окисление P=S-rpynnbi в Р-О-группу, которая обладает исключительно высокой антихолинэстеразной активностью, за счет чего и проявляется физиологическое дей­ствие тролена. Так как активность ферментов, вызывающих этот процесс у мышей и кур, неодинакова, различны и скорость обра­зования оксиизомера, а следовательно, и степень физиологичес­кой активности самого пестицида.

В большинстве случаев к действию токсических веществ наи­более чувствительны низкоорганизованные живые организмы. Например, по отношению к инсектоакарицидам наиболее чув­ствительны насекомые и клещи, затем в убывающем ряду идут рыбы, птицы и млекопитающие. Это, по-видимому, объясняется эволюционным развитием: чем выше на эволюционной лестнице стоит животное того или иного вида, тем более организованны его защитные системы, и прежде всего ферменты, ответственные за метаболизм токсического начала. Поэтому у высокоорганизован­ных животных токсическое вещество подвергнется разрушению прежде, чем достигнет места своего действия.

Однако такая закономерность не распространяется на все ток­сиканты. Избирательная токсичность во многом зависит от меха­низма физиологического действия токсического вещества, от того, через какие функциональные системы проявляется токси­ческий эффект и насколько они сформировались у тех или иных организмов. Например, фосфорорганические инспектициды об­ладают очень высокой физиологической активностью по отноше­нию к личиночным, нимфальным и имагинальным стадиям насе­комых и клещей и совершенно не действуют или очень слабо дей­ствуют на их яйца. Эти же соединения не обладают бактерицид­ным или вирулицидным действием и очень слабо действуют на простейшие, в частности на инфузории. Это, по-видимому, объяс­няется тем, что ФОС — яды нервно-токсического действия. Их патогенетическое влияние проявляется в результате подавления активности ферментов, участвующих в отправлениях функций нервной системы. У яиц насекомых и клещей, у бактерий и инфу­зорий отсутствует развитая нервная система, характерная для вы­сокоорганизованных живых существ, через которую и проявляет­ся патогенетическое действие ФОС. У бактерий и простейших нет подобных ферментов, поэтому ФОС не могут оказать патогенети­ческого влияния.

Детоксикация ядов в организме высших животных происхо­дит главным образом в печени, которая выполняет барьерную функцию. Однако у животных отдельных видов, например у жвачных, немаловажную защитную роль играют микроорганиз­мы и ферменты желудочно-кишечного тракта. Барьерная функ­ция пищеварительного тракта еще недостаточно выявлена, хотя ее значение подтверждается многими экспериментами и наблю­дениями.

Свойство микроорганизмов и ферментов желудочно-кишечно­го тракта детоксицировать токсические вещества сформировалось не как специальная функция, подобная печени, а как попутный фактор, выработавшийся в процессе приспособления многих жи­вотных, особенно жвачных, разрушать прочные органические суб­страты до простых усвояемых соединений.

Однако с развитием детоксицирующих функций желудочно-кишечного тракта у животных некоторых видов ослабла, по-види­мому, барьерная функция печени. Это предопределило и характер избирательной токсичности ядов. Травоядные животные, особен­но жвачные, наиболее чувствительны к тем ядам, детоксикация которых происходит за счет ферментов печени, и устойчивы к со­единениям, быстро обезвреживающимся под действием микроор­ганизмов желудочно-кишечного тракта. Например, крупный рога­тый скот более чувствителен к хлорофосу, чем другие млекопита­ющие. ЛД₅о этого пестицида для белых крыс составляет 600 мг/кг, для свиней — около 500, для овец —375, для крупного рогатого скота — около 250 мг/кг (Полоз, 1975). ЛД₅о тиофоса-О,О-диэтил-О-(я-нитрофенил)-тиофосфата для крыс — 12 мг/кг. Введение этого пестицида корове с кормом в дозе 12 мг/кг массы животного в течение 13нед не вызывает каких-либо изменений в здоровье животных (J. E. Pankaskie et al., 1952).

Это объясняется тем, что паранитрофенол в молекуле тиофоса под действием микроорганизмов рубца очень быстро имминиру-ется в аминофенол, вследствие чего падают электроиндуктивная напряженность в молекуле соединения и его токсичность. Следо­вательно, детоксикация тиофоса, как и других подобных соедине­ний, имеющих в молекуле нитрогруппы, происходит в основном под действием микроорганизмов. Поэтому чувствительность к со­единениям у животных, у которых микробная активность выраже­на сильнее, будет меньше, чем у видов с относительно низким уровнем этой активности. Такими же факторами объясняется и более высокая устойчивость мелкого рогатого скота, в частности овец, к действию большинства токсических агентов. Овцы и козы всегда содержатся на более худших пастбищах, чем крупный рога­тый скот. В результате у них выше разнообразие видов микроорга­низмов в желудочно-кишечном тракте и они приспособились к перевариванию и усвоению значительно более грубых кормов, чем крупный рогатый скот. Эти микроорганизмы воздействуют не только на растения с большим содержанием клетчатки, но и на токсические вещества, попавшие в пищеварительный тракт.

Многие факторы, определяющие избирательную токсичность химических агентов, еще недостаточно изучены, особенно на крупных животных, так как постановка опытов на них связана с определенными трудностями и большими материальными затра­тами.

1.9. АДАПТАЦИЯ И СЕНСИБИЛИЗАЦИЯ К ЯДАМ

Вопросы изучения адаптации организма к токсическим веще­ствам имеют большое значение, так как по мере развития про­мышленности и сельского хозяйства, увеличения выброса в окру­жающую среду различных токсических агентов возрастает веро­ятность проникновения их в организм человека и животных. Естественно, возникает вопрос, не достигнет ли загрязнение окру­жающей среды, кормов и продуктов питания такого уровня, кото­рый может привести к гибели всего живого.

Практика применения некоторых химических веществ, осо­бенно высокотоксичных пестицидов в течение длительного вре­мени в больших масштабах, не привела к массовой гибели наибо­лее чувствительных представителей животного мира.

Опыты показывают, что организм сравнительно быстро привы­кает к большинству ядов. Хорошо известно, что в древности мно­гие властители, боясь отравлений, постепенно приучали свой организм к ядам и оставались живыми от нескольких смертельных доз токсических веществ. По-видимому, существует определенная взаимосвязь между стабильностью химического яда и возможнос­тью организма приспосабливаться к его действию. Наблюдения над резистентными насекомыми показывают, что у них наиболее быстро развивается устойчивость к ДДТ, альдрину, мышьяку и другим персистентным ядам, обладающим замедленным токси­ческим эффектом, и слабее к ядам острого действия — хлорофосу, ДДВФ, циодрину и другим аналогичным инсектицидам.

Однако закономерности адаптации к ядам, свойственные насе­комым, едва ли будут характерны для высших животных, так как механизм привыкания членистоногих и позвоночных разный. У членистоногих адаптация развивается в результате естественного отбора наиболее устойчивых особей, передачи этих признаков по наследству и закрепления их в генетическом коде. У высших жи­вотных развитие адаптации возможно в течение одной жизни вследствие изменения ферментов, которые становятся способны­ми разрушать относительно высокие дозы токсических веществ. H.T.Reynolds et al. (1976) установили, что при введении овцам nin¹ ДДТ в течение 18 нед в дозе 250 и 2500 ч/млн корма содержа­ние остатков его в жире повышалось лишь в первые 8 нед. В дальпейшем, несмотря на продолжающееся поступление в организм пестицида, содержание его в тканях не увеличивалось. Аналогич­ная закономерность отмечается со многими другими пестицида­ми. По мере увеличения продолжительности его поступления в организм одновременно с уменьшением степени материальной кумуляции химического вещества отмечается снижение его физи­ологической активности, т. е. организм приспосабливается к это­му яду, что, по-видимому, связано с увеличивающейся способнос­тью организма разрушать токсическое вещество.

Однако приспособительные реакции такого рода развиваются не ко всем химическим веществам. Физиологическая активность некоторых соединений по мере увеличения кратности поступле­ния их в организм возрастает. Примером таких веществ служат антикоагулянты из группы кумарина (зоокумарин, бромадиолон и др.), применяемые в борьбе с грызунами.

Механизм сенсибилизации недостаточно ясен. Возможно, спо­собность организма адаптироваться к одним химическим веще­ствам и повышать реакцию на другие связана с характером их фи­зиологического действия: одни вещества вызывают глубокие био­химические и морфологические сдвиги в организме или такие из­менения, к которым организм быстро приспосабливается и обеспечивает их компенсацию; другие вызывают значительные изменения, которые восстанавливаются очень медленно, к кото­рым организм не в состоянии выработать компенсаторные реак­ции. Степень этих изменений нарастает пропорционально крат­ности введения яда.

 

1.10. ДИАГНОСТИКА ОТРАВЛЕНИЙ

В современных условиях при большом разнообразии веществ, которые могут вызвать отравление животных, а также появление новых заболеваний, характерных для промышленного содержания животных, возникли трудности дифференцировать отравления. В связи с этим возникла необходимость разработки новой и совер­шенствования существующей схемы системного исследования с целью выявления этиологии заболевания, а также определения конкретного вещества, которое вызвало болезнь, гибель животно­го или снижение его продуктивности.

Первая и, пожалуй, главная задача, которую приходится ре­шать в случаях массовых заболеваний животных в условиях про­мышленного содержания, — это дифференциация отравления от заболеваний другой этиологии. Такая дифференциация может быть осуществлена путем исследования кормов и содержимого желудочно-кишечного тракта с помощью чувствительных биоло­гических тестов. В качестве таких тестов могут быть использованы рыбы, простейшие, членистоногие и другие биологические объекты, отличающиеся чувствительностью к определенным токсичес­ким веществам. Затем могут быть применены специфические ме­тоды для определения групповой принадлежности токсиканта и индивидуальные специфические тесты, позволяющие установить вид яда, который вызвал отравление.

Диагноз на отравление можно быстро и точно поставить только на основании комплекса исследований кормов и патологического материала на содержание токсических веществ, анализа анамнес­тических данных, клинической картины интоксикации, патолого-анатомических и гистоморфологических изменений, которые были выявлены при отравлении.

К сожалению, при огромном разнообразии токсических аген­тов, количество которых постоянно увеличивается, возникнове­нии новых заболеваний животных в связи с развитием промыш­ленного животноводства постановка диагноза часто становится одной из трудных задач ветеринарной токсикологии.