План
1. Листерии, их морфологические и культуральные свойства, биохимическая активность.
2.Механизм заражения, клинические проявления.
3. Профилактика листериоза.
ЛИСТЕРИИ
НДД:
Постановление МЗ РБ №155/38 от 31. 12.2002г.
Санитарные и ветеринарные правила «Листериоз».
Таксономия
Возбудитель листериоза – L.monocytogenes относится к роду Listeria семейства Corynebacteriacea отдела Firmicutes.
Морфология.
Листерии мелкие кокковидные палочки или слегка изогнутой формы с закругленными концами, длиной 0,5-2мкм и шириной 0,4-0,5 мкм, но в старых культурах могут иметь нитевидную форму длиной до 200мкм. В мазках часто располагаются параллельно или под углом друг к другу в виде римской цифры V, либоY-образно, или образуют короткие цепочки из 3-5 клеток. Спор и капсул не образуют. Подвижны (перитрихи), при выращивании при 20-250С совершают характерные «кувыркающиеся» движения. Культивирование при 370С приводит к резкому снижению подвижности вплоть до ее потери. Грамположительны, но в старых культурах могут быть грамотрицательными.
Культуральные свойства.
Листерии – факультативные анаэробы. Растут в интервале температур от 4 до 380С (особенно в присутствии небольших количеств глюкозы), optim t0 30-370С; физиологическое развитие происходит при 18-200С (optim t0 для образования жгутиков, но удлиняет срок выделения и роста культуры). Листерии культивируются на простых средах, но растут довольно слабо; хорошо растут на средах с добавлением глюкозы, сыворотки или крови. Селективной средой для выделения листерий является кровяной агар с добавлением трипофлавина (акрифлавина) и налидиксовой кислоты.
На пластинчатых средах изолированные 24-48 часовые колонии мелкие (1-2мм), больших размеров достигают на средах с глюкозой. Образуют S- и R-диссоциаты. S-колонии гладкие, резко очерченные, выпуклые (позднее происходит их уплотнение с центральным возвышением), прозрачные, бесцветные или нежно-голубоватые, в падающем свете серовато-молочные.
На кровяном агаре могут быть окружены зоной β-гемолиза; увеличение гемолитической активности наблюдают при уменьшении содержания О2.
R-колонии шероховатые, с утолщенным зарубленным краем и возвышающейся грубозернистой массой, достигают 1,5-3мм; S - R- переход сопровождается снижением гемолитической активности и потерей вирулентности.
На скошенном СПА (сахарном агаре) листерии образуют сплошной тонкий и голубоватый налет, иногда с трудом обнаруживаемый.
В жидких средах дают равномерное помутнение, с последующим выпадением осадка; осадок слизистый, трудно диспергируемый, иногда поднимается в виде косички.
В полужидких средахдают рост по уколу, более обильный у поверхности с отходящим помутнением (особенно на глубине 3-5мм); в желатине с глюкозой растут в виде «щепотки» или «вязанки хвороста».
Культуры листерий имеют характерный запах творога или молочной сыворотки, обусловленный накоплением продуктов углеводного обмена.
Биохимические свойства.
Листерии обладают высокой ферментативной активностью. Они гидролизуют гиппурат. Ферментируют с образованием кислоты глюкозу, мальтозу, рамнозу, левулезу, трегалозу, медленно лактозу и сахарозу, не расщепляют маннит и крахмал, ксилозу.
Каталазоположительные, оксидазоотрицательные. Индол и сероводород не образуют, желатин не разжижают, не восстанавливают нитраты в нитриты, лакмусовое молоко краснеет, но не свертывается. Не обладают уреазной активностью. Обладают гемолитической активностью и дают положительную реакцию Фогеса-Проскауэра.
На среде с углем дают положительную летициназную активность, на среде без угля ЛВА отсутствует.
Антигенная структура и факторы патогенности.
У листерий выделяют О-Аг и Н-Аг; по структуре 5 термолабильных жгутиковых (Н-) и 14 термостабильных углеводных соматических (О-) антигенов выделено 16 сероваров. Три серовара (4b, 1/2b, 1/2а) вызывают 90% всех случаев листериоза человека.
Основной фактор патогенности листерий – эндотоксин. Другие факторы патогенности: интерналин (мембранный белок, обличающий проникновение бактерий в макрофаги и эндотелиоциты), листериолизин О (гемолизин, вызывающий повреждение мембран фаголизосом, благодаря ему бактерии способны мигрировать из фаголизосом и вегетировать в цитоплазме клеток; считается основным фактором патогенности); фосфолипазы (вызывают растворение клеточной мембраны и проникновение в клетки, в том числе и макрофаги, что защищает листерии от действия АТ).