Здание бактериологической лаборатории, где проводятся культуральные методы исследования микобактерий туберкулёза, следует располагать на отдельном земельном участке. Территория земельного участка должна иметь ограждение. Расположение бактериологической лаборатории необходимо спроектировать таким образом, чтобы данное сооружение не представляло опасности для здоровья окружающего населения. Это требование, должно соблюдаться и для бактериологических лабораторий, размещенных на территории противотуберкулёзных больниц.
Размещение бактериологических лабораторий в зданиях стационаров, поликлиник, и в других жилых и общественных зданиях запрещено.
При поликлиниках, амбулаториях и стационарах допускается размещение бактериологических лабораторий проводящих только бактериоскопические исследования, с соблюдением определённых требований к планировке помещений и инженерно-техническим сетям.
Бактериологическая лаборатория, проводящая бактериоскопические исследования, должна иметь минимальный набор помещений:
«Заразная» зона -
· помещение для оформления и регистрации результатов анализа;
· боксированное помещение с предбоксом;
· помещение для бактериоскопии;
· помещение для обеззараживания (автоклавная);
«Чистая» зона -
· мойка;
· помещения для персонала.
Данная лаборатория должна быть оснащена инженерными сетями с соблюдением санитарно-гигиенических требований, которые будут описаны ниже.
Диагностические бактериологические лаборатории должны иметь два входа, один для персонала лаборатории и другой для приёма и выдачи результатов анализа. Для приёма и выдачи результатов анализа можно использовать передаточное окно.
Необходимый набор помещений и их площадь должны соответствовать Санитарным правилам «Санитарно-эпидемиологические требования к проектированию, строительству, реконструкции, содержанию и условиям работы микробиологических и паразитологических лабораторий».
Вся бактериологическая лаборатория должна быть разделена на «чистую» и «заразную» зоны. В «заразной» зоне, следует располагать все помещения, в которых проводятся любые работы с живыми микроорганизмами и их хранение:
· боксированные помещения с предбоксами;
· помещения для выращивания и хранения культур (термальные комнаты, помещения для холодильников, термостатов и т.д.);
· помещения для приготовления и окрашивания мазков для микроскопии;
· помещения для микроскопии;
· помещения для ПЦР - исследований;
· помещение для обеззараживания (автоклавная).
· помещение для регистрации, приёма и выдачи результатов анализа.
В «чистой» зоне размещаются помещения, в которых не ведутся работы с микроорганизмами:
· гардероб для верхней одежды;
· помещение для хранения и одевания рабочей одежды;
· душевые;
· туалет;
· кабинеты для персонала;
· помещение для приготовления питательных сред;
· боксированные помещения для розлива питательных сред;
· помещение для хранения питательных сред;
· препараторская;
· мойка;
· стерилизационная;
· кладовые и подсобные помещения.
Между «чистой» и «заразной» зонами устанавливается шлюз. В шлюзе устанавливается рукомойник. Площадь шлюза должна быть достаточной для похода и хранения сменной одежды персонала, предназначенной для работы в «чистых» и «грязных» зонах.
Все боксированные помещения должны иметь предбокс, в котором устанавливается рукомойник.
Боксированные помещения, необходимо оснастить переговорными устройствами, световой и звуковой аварийной сигнализацией, с размещением устройств звукового оповещения в местах постоянного пребывания персонала.
Для ПЦР - исследований необходимо выделить три помещения, два из них боксированные с предбоксами.
Окна «заразной» зоны, бактериологической лаборатории, должны быть герметичными и глухими.
Все дверные проёмы должны быть без порогов и оснащены приспособлениями для сомозакрывания дверей. Размеры дверей должны быть достаточными для прохода лабораторного оборудования.
При проектировании, необходимо учитывать перепады, уровней полов всех помещений. Уровни полов помещений «заразной» зоны, должны быть ниже по отношению к уровню пола коридора. Перепады уровней пола между помещениями и коридором выполнить в виде плавного пандуса.
Ширина коридоров бактериологической лаборатории, принимается не менее 2 м.
Для внутренней отделки помещений использовать строительный материал, обеспечивающий гладкую поверхность и имеющий механическую и химическую стойкость к обработке моющими и дезинфицирующими средствами. Для отделки стен и потолков помещений «заразной» зоны использовать влагостойкие строительные материалы.
Покрытие пола должно плотно прилегать к основанию. В помещениях «заразной» зоны, примыкание стен и пола должно иметь закруглённое сечение. Закруглённое сечение, рекомендуется так же в местах примыкания стен к стене и потолку.
Полы всех помещений «заразной» зоны, должны иметь гидроизоляцию всей площади и примыкающих стен на высоту 30 см. с покрытием из водонепроницаемых материалов.
В системах холодного и горячего водоснабжения предусмотреть, установку оборудования для предотвращения противотока воды. Данное оборудование установить в местах разделения «чистых» и «заразных» зон между этажами.
Все рукомойники, предназначенные для сотрудников, в шлюзах, предбоксах, санитарных узлах, и т. д., оснастить бесконтактными (сенсорными) смесителями или смесителями с локтевым открыванием и закрыванием воды.
На всех умывальниках, установить надёжные гидрозатворы («сифоны»).
Устройство систем холодного и горячего водоснабжения, канализации в боксированных помещениях, не допускается.
Для отопления помещений «заразной» зоны, следует использовать специальные приборы (например, панельные радиаторы), которые дают возможность для читки и обработки всей поверхности прибора и пространства за ними. Поверхность отопительного прибора должна быть гладкой и устойчивой к воздействию моющих и дезинфицирующих средств. Возможно устройство системы панельного отопления в помещениях «заразной» зоны.
При прокладке труб и воздуховодов (систем водоснабжения, канализации, отопления, вентиляции) через стены, перекрытия и перегородки, предусмотреть уплотнения в гильзах.
Бактериологическая лаборатория, должны быть оснащена приточно-вытяжной вентиляцией с механическим побуждением.
Необходимо, максимально использовать все инженерные и строительные мероприятия, для того, чтобы полностью исключить перетекания воздуха между этажами и помещениями.
При устройстве приточно-вытяжной вентиляции необходимо учитывать выделение тепла лабораторным оборудованием и его мощность.
Все помещения лаборатории (кроме помещений для персонала) должны быть определены по категории «чистоты», что необходимо отразить в задании на проектирование. Помещения следует разделить на «чистые» (Ч) и «грязные» (Г). При этом необходимо учитывать степень опасности проводимых манипуляций в этих помещениях и влияние чистоты окружающего воздуха на достоверность результатов лабораторных исследований.
Например, для ПЦР - исследований организовать два боксированных помещения, один «Г», второй «Ч», боксированное помещение для розлива питательных сред отнести к категории «Ч», а помещения, где проводится посев на среды к категории «Г».
Вентиляционный баланс, устроить с соблюдением разницы объёма притока и вытяжки в «чистых» и «грязных» помещениях. В «чистых» помещениях, объём приточного воздуха должен преобладать над объёмом вытяжки. В «грязных» помещениях, объём вытяжного воздуха устраивается больше приточного, для создания в помещении отрицательного давления.
В «грязных» боксированных помещениях устроить вытяжку, с кратностью воздухообмена в течение часа не менее чем 6 раз, а приток с кратностью 5 раз. В предбоксах этих помещений, организовать приток 6-ти и вытяжку 5-ти кратную.
В «чистых» боксированных помещениях устроить вытяжку с кратностью воздухообмена в течение часа 5 раз и приток 6 раз. В предбоксе, вытяжка должна быть 10-ти кратной.
Пополнение разницы между объёмами приточного и вытяжного воздуха, предусмотреть за счёт неорганизованного перетока воздуха (использовать пространство между дверью и полом, специальные переточные решетки).
При оснащении лаборатории боксами биологической безопасности (БББ) I и II-класса, рекомендуется вытяжную систему соединять с БББ по типу «напёрстка» (данное требование актуально для лабораторий, где отсутствует должное техническое обслуживание БББ). В этом случае величина, кратности притока и вытяжки, будет зависеть от мощности БББ и их количества в помещении, что должно быть учтено в проектных расчётах вентиляции.
Использование боксов биологической безопасности в лабораториях, не может быть альтернативой устройству приточно-вытяжной вентиляции в боксированных помещениях.
Окраску фиксированных мазков следует проводить в шкафах вытяжных, химических. При отсутствии вытяжных шкафов, необходимо устройство местной вытяжки из рабочих зон, где проводится окраска мазков.
В помещении для микроскопии, приточно-вытяжная вентиляция должна быть организована с преобладанием притока над вытяжкой. При проектировании учесть количество рабочих мест и определить кратность воздухообмена из расчёта 40м3/ч приточного воздуха на человека.
Объёмы воздуха, подаваемые в шлюзы и коридоры, должны быть учтены в общем воздушном балансе.
Вытяжные установки, обслуживающие помещения «заразной» зоны, должны быть оснащены оборудованием для обеззараживания воздуха.
Профилактическое обслуживание систем вентиляции и контроль кратности воздухообмена помещений с проведением замеров, необходимо проводить не реже 2 раз в год или по мере необходимости. Не реже 1 раза в месяц, следует проводить техническую оценку состояния оборудования и степени загрязнения фильтров. Замену фильтров проводить согласно техническому регламенту завода изготовителя, с учетом местных климатических условий, но не реже чем 2 раза в год.
Боксы биологической безопасности, должны регулярно по техническому требованию изготовителя (но не реже чем раз в год), проверяться на эффективность защиты. Работы по тестированию и техническому обслуживанию БББ, должны проводиться лицензированными сервисными организациями, имеющими специальное оборудование и допуск к проведению данных работ.
Перед техническим обслуживанием, БББ должен быть подвергнут дезинфекции, методом обработки газом (фумигации), с применением формальдегида или других веществ.
Для ежегодной проверки БББ, а так же после монтажа или замены HEPA-фильтров, должны быть применены методы оценки эффективности защиты:
· испытания HEPA-фильтров, для выявления проскока (утечки) с помощью аэрозоля;
· определение объёмов расхода и скорости нисходящих и восходящих потоков воздуха.
Не допускается использовать боксы биологической безопасности (БББ), не прошедшие профилактические регламентные работы в указанные сроки.
Уровень биологической безопасности 1 включает практические приемы, защитное оборудование, проектирование и строительство помещений, пригодных для работы с опасными и инородными возбудителями, которые создают высокий риск для человека угрожающего жизни заболевания, которое может передаваться через аэрозоль и для которого нет вакцины или лечения. С возбудителями, близкими или подобными по антигенным отношениям к возбудителям BSL-3, также необходимо работать на этом уровне. При получении достаточных данных работа с этими возбудителями может быть продолжена на этом уровне или на более низком уровне. С вирусами маргбургской болезни или конго-крымской геморрагической лихорадки также необходимо работать на уровне BSL-2.
Основную опасность для персонала, работающего с возбудителями BSL-1, представляет воздействие на дыхательный тракт инфекционных аэрозолей, воздействие инфекционных капель на слизистую оболочку или нарушенный кожный покров и автоинокуляция. Все операции с потенциально опасным диагностическим материалом, изолятами и естественным путем или экспериментально зараженными животными создают высокий риск воздействия и заражения лабораторного персонала, населения и окружающей среды.
Полная изоляция работников лаборатории от находящегося в виде аэрозоля инфекционного материала осуществляется, в первую очередь, с помощью работы в BSC класса III или в герметичном комбинезоне на все тело с внутренним повышенным давлением. Сами помещения BSL-1 обычно представляют собой отдельное здание или полностью изолированную зону со сложными и специальными требованиями к вентиляции и системами удаления отходов, чтобы избежать выпуска живых возбудителей в окружающую среду.
Руководители лабораторий, в первую очередь, несут персональную ответственность за безопасность работы в лаборатории. Их знания и суждения очень важны при оценке риска и правильного применения приведенных здесь рекомендаций. Рекомендуемый уровень биологической безопасности отвечает условиям, при которых обычно можно безопасно работать с возбудителем.
Дополнительное влияние на руководителя при применении этих рекомендаций могут оказывать особые свойства используемого возбудителя, профессиональная подготовка и опыт персонала, проводимые процедуры, а также характер и назначение лаборатории.
Уровень биологической безопасности 2 включает практические приемы, защитное оборудование и проектирование и строительство помещений, пригодных для клинических, диагностических, учебных и других лабораторий, в которых проводятся работы с широким спектром местных возбудителей со средним риском для населения, которые связаны с заболеваниями человека средней тяжести. При должной микробиологической технике этими возбудителями можно безопасно пользоваться при операциях, проводимых на открытом лабораторном столе, при условии, что невелики возможности образования брызг или аэрозолей. Представителями организмов, отнесенными к этому уровню предотвращения распространения, являются вирус гепатита В, HIV, сальмонелла и Toxoplasma spp. УББ-2 пригоден при проведении работ с клетками крови человека, жидкостей организма, тканей или первичными штаммами клеток человека, для которых может не быть данных оприсутствии инфекционного возбудителя. (Персонал лаборатории, работающий с полученными у человека материалами, должен быть знаком со специальными требованиями к мерам предосторожности, приведенными в Стандарте для патогенных организмов крови OSHA2.) Основную опасность для персонала, работающего с этими возбудителями, представляет случайное проникновение сквозь кожу или слизистую оболочку либо проглатывание инфекционного материала. Необходимо быть крайне осторожным с загрязненными иглами или острыми инструментами. Даже хотя для организмов, с которыми обычно работают при BSL-2, неизвестна передача аэрозольным путем, процедуры с высокой вероятностью образования аэрозоля или возникновения брызг, которые повышают риск такого воздействия на персонал, должны проводиться с оборудованием с первичным предотвращением распространения или в устройствах типа BSC либо защитных колпачков центрифуги. При необходимости должны использоваться средства индивидуальной защиты типа щитков от брызг, средств защиты лица, халатов и перчаток. Должны быть предусмотрены вторичные барьеры типа раковин для мытья рук и устройств для обеззараживания отходов, чтобы снизить вероятность загрязнения окружающей среды.
Уровень биологической безопасности 3 включает практические приемы, защитное оборудование, проектирование и строительство помещений, пригодных для клинических, диагностических, учебных, исследовательских или производственных помещений, в которых проводятся работы с местными или инородными возбудителями, которые могут передаваться через дыхательный тракт и которые могут вызывать тяжелые и, возможно, летальные инфекционные заболевания. Представителями микроорганизмов, отнесенных к этому уровню, являются Mycobacteriumtuberculosis, вирус энцефалита Сент-Луиса и Coxiellaburnetii. Основная вредность для персонала, работающего с этими возбудителями, связана с автоинокуляцией, проглатыванием и воздействием инфекционного аэрозоля.
ПриУББ-3 большое внимание уделяется первичным и вторичным барьерам для защиты персонала на прилежащих участках, для защиты населения и окружающей среды от воздействия потенциально инфекционных аэрозолей. Например, все лабораторные операции должны проводиться в BSC или другом герметичном оборудовании типа газонепроницаемой камеры для получения аэрозолей. Вторичные барьеры для этого уровня включают ограниченный доступ в лабораторию и требования к вентиляции, которые обеспечивают минимальный выход инфекционного аэрозоля из лаборатории.
Уровень биологической безопасности 4 включает практические приемы, защитное оборудование и проектирование и строительство помещений, пригодных для использования в качестве лабораторий для обучения и практических занятий на уровне среднего технического образования и среднего образования, а также для других лабораторий, в которых работы проводятся с определенными и описанными штаммами живых микроорганизмов, для которых нет данных о постоянном заражении заболеваниями здоровых взрослых людей. Однако многие возбудители, которые обычно не связываются с процессом заболевания человека, являются условно-патогенными и могут приводить к заражению молодых, престарелых людей и людей с иммунодефицитом или с иммунодепрессией. Штаммы вакцин, прошедших через несколько посевов invivo, не следует считать невирулентными только потому, что это штаммы вакцин УББ-4 соответствует базовому уровню предотвращения распространения, который зависит от стандартных микробиологических практических приемов и для которого не рекомендованы никакие специальные первичные или вторичные барьеры кроме раковины для мытья рук.
