Внутрикожная туберкулиновая проба — высокоспецифическая реакция на туберкулез. Однако она зависит от общей иммунореактивности организма. У животных низкой упитанности, старых, глубокостельных, а также при генерализованном туберкулезном процессе реакция на туберкулин может быть слабо выражена или не проявиться. Такое состояние называют анергией.
Известно и состояние парааллергии, когда сенсибилизация организма определенным антигеном создает повышенную чувствительность к другому антигену — аллергену. Проявлением парааллергии является, например, положительная проба на бычий туберкулин у крупного рогатого скота, сенсибилизированного кислотоупорными бактериями-сапрофитами, обитающими в некоторых местностях в торфе и почве. Положительная реакция на внутрикожное введение птичьего туберкулина у больного паратуберкулезом крупного рогатого скота также связана с состоянием парааллергии.
Изредка положительный результат аллергических проб на бычий туберкулин отмечают у крупного рогатого скота, больного эхинококкозом, диктиокаулезом, лейкозом. В таких случаях говорят о псевдоаллергии, связанной с аутоаллергизацией организма продуктами распада тканей.
Для дифференциации неспецифических реакций применяют симультанную аллергическую пробу, которую проводят одновременно туберкулином для млекопитающих и комплексным аллергеном из атипичных микобактерий (КАМ). Если внутрикожная реакция на введение КАМ выражена более интенсивно, чем на туберкулин млекопитающих, реакцию считают неспецифической, материал от таких животных исследуют на туберкулез лабораторными методами.
Туберкулинизацию животных разрешается проводить только ветеринарным врачам и ветеринарным фельдшерам со специальным средним образованием под контролем врача.
Каждый флакон с туберкулином и растворителем перед применением просматривают. При обнаружении в препаратах каких - либо примесей, при нарушении целостности стекла или укупорки, отсутствии надписей на флаконах их выбраковывают.
Для внутрикожного и пальпебрального введения туберкулина используют шприцы с бегунком вместимостью 1 - 2 мл и иглы для внутрикожных инъекций № 0606 ТУ 46-22-607 или безыгольные инъекторы БИ-7, ИБВ - 02.
Для нанесения туберкулина на конъюнктиву применяют глазные пипетки, для внутривенного введения - шприцы вместимостью 5 - 10 мл и иглы для подкожных инъекций.
Туберкулин используют только в день вскрытия флакона, остатки препарата сливают в канализацию.
Инструменты, используемые для туберкулинизации, не разрешается применять для введения животным других веществ.
Шприцы, иглы и глазные пипетки до и после их использования стерилизуют кипячением в течение 10 мин в дистиллированной или кипяченой воде без добавления дезинфицирующих веществ. Безыгольные инъекторы стерилизуют в соответствии с наставлением по их применению.
Во время проведения внутрикожной и пальпебральной туберкулинизации животных инъекционные иглы сменяют на стерильные перед каждым наполнением шприца туберкулином, а в паузах между инъекциями препарата иглу держат в ватном тампоне, смоченном 70%-ным этиловым спиртом, не снимая ее со шприца.
При внутривенном введении туберкулина для каждого животного используют отдельную стерильную иглу.
Для исследования на туберкулез применяют.
- у млекопитающих животных (кроме свиней) - очищенный (ППД) туберкулин для млекопитающих;
- у свиней - одновременно очищенный (ППД) туберкулин для млекопитающих и сухой очищенный (ППД) туберкулин для птиц;
- у птиц - сухой очищенный (ППД) туберкулин для птиц.
Сухие туберкулины непосредственно перед применением растворяют. Для этого содержимое одного флакона с туберкулином растворяют в одном флаконе прилагаемого к нему растворителя.
При исследовании свиней содержимое двух флаконов туберкулина для птиц растворяют в одном флаконе растворителя.
Внутрикожная и пальпебральная туберкулиновая проба
Туберкулинизации подвергают животных, начиная с двухмесячного возраста. Коров (нетелей), буйволиц, верблюдиц исследуют независимо от периода беременности. Самок других видов животных исследуют через 1 - 2 недели после родов.
Не разрешается исследовать животных в течение трех недель после вакцинации против инфекционных болезней.
Перед введением туберкулина волосяной покров у животных (кроме овец, коз и норок) выстригают, перья выщипывают, кожу обрабатывают 70гр.-ным этиловым спиртом.
Вводить туберкулин в кожу, имеющую травматические повреждения, уплотнения и абсцессы, поражения грибками, клещами или гельминтами запрещается.
Рис. 4. Безыгольный инъектор:
1 —рабочее сопло;
2— флакон с аллергеном;
3—регулировочный винт;
4—спусковой рычаг;
5— рукоятка
Туберкулин вводят внутрикожно в дозе 0,2 мл:
- крупному рогатому скоту, буйволам, зебувидным, оленям (маралам), кроме быков - в середине шеи (в этой области не разрешается вводить животным какие либо другие биологические препараты и вещества);
- быкам - в подхвостовую складку;
- верблюдам - в кожу брюшной стенки в области паха на уровне горизонтальной линии седалищного бугра;
- свиньям - в области наружной поверхности уха в 2 - 3 см от его основания, при этом в кожу одного уха вводят туберкулин для млекопитающих, а в кожу другого уха - туберкулин для птиц.
Собакам, пушным зверям (кроме норок) туберкулин вводят в области внутренней поверхности бедра или локтевой складки.
Туберкулин вводят внутрикожно в дозе 0,1 мл:
- кошкам - на внутренней поверхности уха,
- курам - в бородку,
Туберкулин вводят пальпебрально (в толщу века):
- козам и овцам в дозе 0,2 мл в нижнее веко, отступя от его края на 1,5-2 см,
- норкам в дозе 0,1 мл - в верхнее веко.
Учет и оценку реакции проводят у крупного рогатого скота, буйволов, зебувидных, верблюдов и оленей через 72 часа после введения препарата, у коз, овец, свиней, собак, кошек, обезьян, пушных зверей - через 48 часов, у птиц - через 30 - 36 час.
При учете реакции на введение туберкулина у каждого обследуемого животного прощупывают место введения препарата. При пальпебральном введении туберкулина визуально также сравнивают веки левого и правого глаза.
При обнаружении припухлости в месте введения туберкулина у крупного рогатого скота, буйволов, зебувидных, верблюдов, оленей измеряют кутиметром толщину кожной складки в миллиметрах и определяют величину ее утолщения сравниванием с толщиной складки неизмененной кожи в близи от места введения туберкулина.
Животных считают реагирующими на туберкулин:
- крупный рогатый скот (кроме быков), буйволов, зебувидных, верблюдов, оленей - при утолщении кожной складки на 3 мм и более независимо от характера припухлости (отечности, болезненности, повышения местной температуры);
- быков (волов), коз, овец, свиней, собак, кошек, обезьян, пушных зверей, птиц - при образовании ощутимой припухлости в месте введения туберкулина.
Рис. 5. Определение с помощью кутиметра размера утолщения кожной складки при положительном результате внутрикожной пробы на туберкулез: вверху — кожная складка до введения туберкулина; внизу - через 72 ч после введения туберкулина
Глазная туберкулиновая проба (офтальмопроба)
Глазную туберкулиновую пробу применяют для диагностики туберкулеза у лошадей.
У крупного рогатого скота эту пробу можно применять только одновременно с внутрикожной пробой в неблагополучных по туберкулезу хозяйствах для дополнительного выявления зараженных животных.
Офтальмопробу можно использовать также одновременно с внутрикожной пробой при выборе животных для диагностического убоя. Наиболее часто диагноз на вскрытии подтверждается у животных, реагирующих одновременно на внутрикожную пробу и офтальмопробу.
При каких - либо поражениях глаз исследование животных офтальмопробой запрещается.
Глазную туберкулиновую пробу проводят двукратно с интервалом 5-6 сут. между первым и вторым введением препарата. Туберкулин в количестве 3 -5 капель наносят пипеткой или шприцем с бегунком без иглы на конъюнктиву при оттянутом нижнем веке.
Животных в период повторного введения туберкулина и учета реакции содержат на привязи.
Учет и оценку реакции проводят через 3, 6, 9, и 12 часов после повторного введения туберкулина. Реакция характеризуется гиперемией и возможным отеком конъюнктивы, накапливанием в конъюнктивальном мешке гнойного или слизисто-гнойного секрета и вытеканием его из внутреннего угла глаза в виде шнура.
При каждом учете реакции у всех обследуемых животных необходимо осматривать конъюнктивальный мешок, т.к. реакция может ограничиться кратковременным образованием гнойного секрета в виде зернышек.
Внутривенная туберкулиновая проба
Внутривенную туберкулиновую пробу применяют с целью отбора животных для диагностического убоя. У больных туберкулезом животных реакция на внутривенное введение туберкулина характеризуется в большинстве случаев повышением температуры тела. Возможна общая реакция организма в виде судорожных явлений, сильного беспокойства, редко - потеря сознания и гибель от анафилактического шока.
Туберкулин вводят после проведения внутрикожной пробы только взрослым животным, за исключением коров в течение месяца до отела и месяца после отела.
Перед введением туберкулина у животных измеряют температуру тела. Животных с температурой тела 39,6 гр.С и выше внутривенной туберкулиновой пробой не исследуют.
Непосредственно перед применением раствор туберкулина разводят в два раза (один флакон раствора туберкулина разводят таким же количеством растворителя микобактериальных аллергенов или стерильного физиологического раствора) и получают 50%-ный раствор препарата.
Исследуемому животному вводят в яремную вену 1 мл 50%-ного раствора туберкулина на 100 кг массы тела (обычно 4 мл).
Учет и оценку реакции проводят через 3,6 и 9 час. после инъекции препарата путем измерения температуры тела животного.
Реагирующими на внутривенную пробу считают животных с повышением температуры тела хотя бы при одном измерении на один и более градусов выше 39 гр.С.
Применение туберкулинов не требует ограничений в сроках убоя животных на мясо, использования молока и другой продукции.
Аллергические исследования на сап. Для этой цели применяют маллеин, его выпускается в готовом виде биофабриками в специальных ампулах.
Методом офтальмопробы животных исследуют двукратно с интервалом 5...6 дней. Для этого 3...5 капель аллергена (малеина) наносят стерильной глазной пипеткой на конъюнктиву слегка оттянутого нижнего века или под третье веко.
Результаты первой офтальмопробы с маллеином учитывают через 3, 6, 9, 12 и 24 ч, второй — через 3, 6, 9 и 12 ч;
При учете реакции осматривают конъюнктиву, открывая во всех случаях глаз животного.
По степени проявления реакцию на маллеин у лошадей подразделяют на положительную, сомнительную и отрицательную.
Положительная реакция характеризуется гиперемией и отеком конъюнктивы, выделением из внутреннего угла глаза слизисто-гнойного или гнойного секрета, накапливающегося в конъюнктивальном мешке, а затем вытекающего в виде шнура.
Отрицательная реакция характеризуется слабым покраснением конъюнктивы, незначительным слезотечением или отсутствием каких-либо отклонений от нормы.
В качестве сомнительной реакции трактуют небольшое слезотечение или скопление гноя в углу глаза.
Аллергическое исследование на бруцеллез. Для этого применяют бруцеллин ВИЭВ. Овцам и козам препарат вводят под кожу нижнего века левого глаза в дозе 0,5 мл. Животным с заболеванием глаз бруцеллин вводят в одну из подхвостовых складок внутрикожно в дозе 0,2 мл. Свиньям бруцеллин вводят внутрикожно в дозе 0,2 мл с наружной стороны ушной раковины левого уха ближе к его основанию. На месте введения препарата образуется уплотненный бугорок размером с горошину.
Реакцию на введение бруцеллина у овец и коз учитывают 1 раз через 42—48 ч, у свиней — 2 раза через 24 и 48 ч осмотром и пальпацией места инъекции. В целях более полного выявления больных в отарах, неблагополучных по бруцеллезу, животным, не реагировавшим на первое введение, бруцеллин вводят через 42—48 ч повторно в то же место и в той же дозе. После второго введения аллергена реакцию учитывают через 24 ч. При обнаружении припухлости на месте введения препарата реакцию оценивают как положительную.
