Ћекции.ќрг


ѕоиск:




 атегории:

јстрономи€
Ѕиологи€
√еографи€
ƒругие €зыки
»нтернет
»нформатика
»стори€
 ультура
Ћитература
Ћогика
ћатематика
ћедицина
ћеханика
ќхрана труда
ѕедагогика
ѕолитика
ѕраво
ѕсихологи€
–елиги€
–иторика
—оциологи€
—порт
—троительство
“ехнологи€
“ранспорт
‘изика
‘илософи€
‘инансы
’ими€
Ёкологи€
Ёкономика
Ёлектроника

 

 

 

 


ћетоды изучени€ чувствительности микробов к антибиотикам.




ƒл€ определени€ чувствительности микроорганизмов к антибиотикам примен€ют три метода: диффузии препарата в агар из бумажных дисков, серийных разведений в бульоне и в плотной питательной среде. »меютс€ также ускоренные методы.

¬ качестве критери€ чувствительности микробов к антибиотикам избирают их терапевтические концентрации в крови и других биотопах животного организма после введени€ определенных доз препарата ћерой чувствительности микробов €вл€етс€ минимальна€ концентраци€ препарата (мкг/ед/мл), котора€ подавл€ет рост микробов на питательных средах в стандартных услови€х постановки опыта (минимальна€ подавл€юща€ концентраци€ - ћѕ ).

ћетод бумажных дисков ƒл€ его проведени€ нужны стандартные заводские диски, пропитанные антибиотиками в определЄнной концентрации, и стандартна€ питательна€ среда. »з суточной микробной культуры готов€т взвесь на физрастворе (густота 1 млрд микробных тел в I мл), которую затем развод€т в 10 раз. Ќа поверхность плотной среды наливают 1-2 мл указанной культуры и покачиванием чашки равномерно распредел€ют ее по всей поверхности среды ќстаток удал€ют пипеткой. —реду подсушивают 10-15 мин при комнатной температуре, после чего на поверхность газона стерильным пинцетом накладывают диски (не более 6 на чашку) на рассто€нии 2 см друг от друга и от краев чашки »нкубируют в термостате при 37∞— - 24 часа

”чет: в падающем свете на фоне темной поверхности измер€ют диаметр (с учетом диаметра диска) задержки роста. ќценку результатов провод€т по специальной таблице путем сопоставлени€ диаметра зон задержки роста испытанной культуры с пограничными значени€ми диаметра зоны н таблице.  ультуру относ€т к одной из трех категорий.

чувствительна€, умеренно-чувствительна€ и устойчива€ ”качанные категории предложены клинической химиотерапией, исход€ из отношени€ между ћѕ  и концентрацией препарата в крови при введении терапевтических доз.   чувствительным относ€т культуры, рост которых подавл€етс€ концентраци€ми препарата, создаваемыми в сыворотке крови больного в процессе назначени€ обычных доз антибиотика ”меренно-устойчивыми считаютс€ культуры, подавл€емые концентраци€ми, которые могут быть достигнуть при введении максимальных доз препарата. ”стойчивые - культуры, рост которых не подавл€етс€ при введении даже максимально допустимых доз препарата.

”казанный метод €вл€етс€ полу количественным. ƒл€ получени€ количественных результатов используют методы серийных разведений. ћетод серийного разведени€ антибиотика в бульоне. √отов€т р€д убывающих разведений антибиотика в пробирках с бульоном (кратные 2) и добавл€ют испытуемую культуру.  онтролем служит пробирка с бульоном и культурой без антибиотика „ерез сутки инкубации в термостате определ€ют ћѕ . котора€ соответствует концентрации препарата в последней пробирке с видимой задержкой роста. ƒл€ определени€ бактерицидного действи€ из нескольких пробирок с задержкой роста делают высев петлей на сектора чашки ѕетри с ћѕј. «а бактерицидную концентрацию принимают концентрацию препарата в последней пробирке, высев из которой не дал роста. ћетод серийных разведений в плотной питательной —реде. Ётот метод более чувствителен и точен.  аждый антибиотик испытывают в трех концентраци€х (исход€ из уровней чувствительности микроорганизмов), которые добавл€ют к расплавленному и охлажденному агару. јгар с антибиотиками разливают в три чашки ѕетри (по одной чашке на каждую концентрацию).  онтролем служит чашка с агаром без антибиотика. ѕосев производ€т петлей или лучше штампом-репликатором, который позвол€ет одновременно определить чувствительность к трем концентраци€м антибиотика 25-50 культур (в зависимости от числа лунок в штампе). ”чет роста в термостате осуществл€ют спуст€ сутки.  ультура считаетс€ чувствительной, если на месте посева нет ни одной колонии. ћикроорганизмы, рост которых подавлен всеми 3 концентраци€ми, рассматривают как чувствительные (в этом случае можно примен€ть антибиотик в терапевтической дозе); 2-й и 3-й концентраци€ми как среднечувствительные (антибиотик можно примен€ть только в увеличенной дозе); 3-й как умеренно-устойчивые микроорганизмы (антибиотик можно примен€ть только местно); растущие на всех трех концентраци€х, относ€т к устойчивым (антибиотик нельз€ примен€ть).

”скоренные методы. ѕозвол€ют получить результат через 3-4 часа. „аше всего пользуютс€ методом. основанным на изменении окислительно-восстановительного потенциала (ќ¬ѕ) среды в процессе роста микроба в присутствии антибиотика

’од работы: при использовании метода бумажных дисков или серийных разведений антибиотика в агаре через 4-6 часов роста культуры поверхность чашки обрабатывают индикатором, реагирующим на ќ¬ѕ среды (тетразолий хлорид). ¬ местах роста микроба среда окрашиваетс€ в красный цвет, при отсутствии роста микроба цвет среды не мен€етс€. ”чет и критерии оценки, как и при обычных методах. ¬ последние годы разработана специальна€ тест-система ускоренного определени€ чувствительности микроорганизмов к антибиотикам (посев тест-микроба в жидкую среду с антибиотиком, инкубаци€ 4-6 часов с последующим определением прироста мутности раствора опытных образцов в сравнении с контрольными).

ћетоды определени€ чувствительности микроорганизмов к антибиотикам

ѕолуколичественный - диффузии в агар с применением бумажных дисков с антибиотиками. ”чет -

диамметр зон задержки роста микроорганизмов вокруг диска. ќценка: устойчивость - отсутсвие зоны;

мала€ чувствительность - зона до 10 мм; чувствительность - зона более 10 мм «адача выбрать

эффективный аппарат.

 оличественные:

а) разведение антибиотиков в м€со-пептонном бульоне;

б) разведение антибиотиков в м€со-пептонном агаре.

”чЄт - наличие или отсутствие роста микробов в питательной среде с различными концентраци€ми препарата.

ќценка - минимальное количество препарата, подавл€ющее рост бактерий (мин в мкг'мм) «адача: позвол€ет рекомендовать эффект антибиотика и его дозу ”скоренный:

а) полуколичественный с дисками и индикаторами. ќценка - диаметр неокрашенных зон вокруг дисков

б) количественный разведение антибиотиков в ћЅѕ с углеводами и –Ќ- индикаторами. ќценка- изменение цвета среды в пробирках





ѕоделитьс€ с друзь€ми:


ƒата добавлени€: 2016-11-18; ћы поможем в написании ваших работ!; просмотров: 617 | Ќарушение авторских прав


ѕоиск на сайте:

Ћучшие изречени€:

80% успеха - это по€витьс€ в нужном месте в нужное врем€. © ¬уди јллен
==> читать все изречени€...

493 - | 492 -


© 2015-2023 lektsii.org -  онтакты - ѕоследнее добавление

√ен: 0.01 с.