Ћекции.ќрг


ѕоиск:




 атегории:

јстрономи€
Ѕиологи€
√еографи€
ƒругие €зыки
»нтернет
»нформатика
»стори€
 ультура
Ћитература
Ћогика
ћатематика
ћедицина
ћеханика
ќхрана труда
ѕедагогика
ѕолитика
ѕраво
ѕсихологи€
–елиги€
–иторика
—оциологи€
—порт
—троительство
“ехнологи€
“ранспорт
‘изика
‘илософи€
‘инансы
’ими€
Ёкологи€
Ёкономика
Ёлектроника

 

 

 

 


—правочные и теоретические материалы. ƒл€ постановки лабораторного диагноза провод€т микробиологическое исследование




ƒл€ постановки лабораторного диагноза провод€т микробиологическое исследование. ћатериалом дл€ исследовани€ служат испраж≠нени€. ѕри сборе испражнений нужно учитывать, что микробы наход€тс€, главнымобразом, в слизи и в гное. »спражнени€ исследуют с первых дней болезни, до начала антибактериальной терапии. ‘екалии собирают в дезинфицированный смытый горшок илиподкладное судно, забирают 3Ц5 гр фекалий из верхней части пр€мой и из сигмовидной кишок, помещают в консервант. ѕри исследовании на дизентерию не следует собирать последние жидкие порции испражнений, особенно после дачи слабительного, так как они могут быть содержимым тонкого кишечника.

—бор испражнений можно производить, не дожида€сь акта дефека≠ций, а вводить в пр€мую кишку ватные тампоны, ректальные петли (двойные алюминиевые петли, вмонтированные в ручку) или ректальные трубки (трубки ÷имана). –ектальные трубки представл€ютсобой стекл€нные трубки диаметром от5мм (дл€ детей) до 15 мм (дл€ взрослых), длинойоколо 150 мм, нижний конец запа€н и оплавлен, на рассто€нии 15Ц20 см от запа€нного конца имеетс€ два оплавленных отверсти€, расположенных на противоположных стенках, одно ни≠же другого. ќткрытый конец закрыт ваткой, трубки опускают через ватную пробку в пробирку и в таком виде стерилизуют. “рубку вво≠д€т в пр€мую кишку, она прилегает к стенкам слизистой и при выт€≠гивании материал через отверсти€ скапливаетс€ внутри трубки.

»сследование секционного материала нужно проводить как мож≠но быстрее после смерти. »сследуют кишечник, мезентериальные железы, кусочки печени, селезенки. ћатериал доставл€ют в стерильной посуде Ц баночках, широких пробирках.

ќсновным методом исследовани€ при дизентерии €вл€етс€ бактериологический.

Ѕактериологический метод примен€ют дл€ выделени€ возбудител€ и его идентификации. Ќаибольшее количество положительных ре≠зультатов получают при посеве материала у постели больного, но такой посев не всегда можно сделать, поэтому дл€ предупреждени€ гибели возбудителей материал помещают в консервант Ц глицерино≠вую смесь или фосфатный буфер.

I этап

¬ первый день исследовани€ производ€т посев материала на cpeдy ѕлоскирева, эозинметиленовую среду (среда Ћевина) и другие. “ак как кажда€ среда обладает каким-нибудь недостатком, рекомен≠дуетс€ использование двух сред. ќсобое место занимают среды с добавлением желчных солей, они высокоэффективны и создают тем самым весьма благопри€тные услови€ дл€ вы€влени€ дизентерийных бактерий.

ƒл€ посева выбирают слизисто-гнойные комочки большой стериль≠ной петлей, промывают их дважды в стерильном изотоническом раство≠ре и перенос€т на поверхность среды вчашки ѕетри. «атем берут стерильный шпатель и досуха растирают материал в этой чашке, по≠том, не прожига€ шпател€, производ€т посев во второй и третьей чашке. ћожно делать высев и на 1 чашке по секторам. «асе€нные чаш≠ки помещают в термостат на 18Ц20 часа при 37∞—.

II этап

Ќа второй день чашки просматривают невооруженным глазом и при помощи лупы. Ќа дифференциально-диагностических средах шигеллыобразуют бесцветные прозрачные круглые, слегка выпуклые блест€щие колонии. ѕалочки «онне могут давать плоские распластанные с неровным краем колонии, мутные, но сохран€ющие прозрач≠ность.

ѕодозрительные колонии отсевают на комбинированную среду ќлькеницкого и помещают в термостат на сутки. Ёта среда позвол€ет определить у наследуемых культур ферментацию углеводов, мочевины, образование сероводорода. —реду готов€т таким образом, чтобы была и скошенна€ поверхность и столбик высотой 3Ц4 см. »сследуе≠мую культуру засевают штрихом по скошенной поверхности, а также уколом в глубинустолбика. “ак как в среде содержитс€ небольшое количестве глюкозы (ферментаци€ еЄ идет в анаэробных услови€х), среда ќлькеницкого изменит цвет в столбике, а сбраживание лактозы и сахарозы идет в аэробных услови€х, среда изменит цвет и в скошенной поверхности, и в столбике. ѕри разложении мочевины рЌ среды становитс€ резко щелочной Ц вс€ среда станет оранжевой. ѕри об≠разовании сероводорода наблюдаетс€ почернение среды. ƒл€ быстрой идентификации шигелл рекомендуетс€ следующий метод: подозрительную колонию (лактозонегативна€ на среде Ёндо) пересевают на среду TSI (англ. triple sugar iron) Ц трехсахарный агар (глюкоза, лактоза, сахароза) с железом дл€ определени€ продукции сероводорода; или на среду, содержащую глюкозу, лактозу, сахарозу, железо и мочевину.

Ћюбой организм, который расщепл€ет мочевину через 4Ц6 ч инкубировани€, веро€тнее всего, относитс€ к роду Proteus и может быть исключен.

ћикроорганизм, образующий сероводород или имеющий уреазу, или образующий кислоту на кос€чке (ферментирует лактозу или сахарозу), может быть исключен, хот€ штаммы, образующие сероводород, должны быть исследованы как возможные члены рода Salmonella.

¬о всех других случа€х культура, выросша€ на этих средах, должна быть исследована и, если ферментирует глюкозу (изменение цвета столбика), выделена в чистом виде. ќдновременно она может быть исследована в реакции агглютинации на стекле с соответствующими антисыворотками к роду Shigella. ѕри необходимости провод€т другие биохимические тесты, провер€ющие принадлежность к роду Shigella, а также изучают подвижность.

III этап

ѕосле суточного инкубировани€ дл€ дальнейшего исследовани€ отбирают культуры, ферментирующие глюкозу, т.е. те пробирки с культурой, в которых среда ќлькеницкого изменила цвет в столби≠ке. ” культур, подозрительных по своим ферментативным и культуральным свойствам на шигеллы, изучают антигенную струк≠туру дл€ определени€ вида. ≈сли таких культур нет, выдают отрица≠тельный ответ.

¬ид, серовар, подсеровар выделенной культуры устанавливают при помощи адсорбированных шигеллезных сывороток. јнализ антигенной структуры начинают с реакций агглютинации на стекле со смесью є1. ¬ смесь є1 вход€т шигеллы, не ферментирующие маннит. Ёто S. dysenteriae 1 и 2 (поливалентные и моновалентные), S. dysenteriae 3Ц7 (поливалентные и моновалентные), S. dysenteriae 8-12 (поливалентные и моновалентные). —месь є 2 включает сыворотки к шигеллам, ферментирующим маннит: к типовым антигенам S. flexneri I, II, III, IV, V, VI, к групповым антигенам S. flexneri 3, 4, 6,7,8 Ц поливалентна€, к антигенам S. boydii 1Ц18 (поливалентна€ и моновалентные), к антигенам S. sonnei I фазы, II фазы, к антигенам S. flexneri IЦVI + S. sonnei Ц поливалентна€.

ѕри положительной реакции со смесью выделенную культуру агглютинируют с каждой сывороткой, вход€щей в смесь. ≈сли реакци€ положительна с сывороткой к шигеллам «онне иЌьюкасл, выдают ответ. ≈сли культура агглютинируетс€ поливалентной сывороткой к шигеллам ‘лекснера, изучение антигенной структуры выделенной культуры продолжают с типовыми групповыми сыворотками к шигеллам ‘лекснера, и при положительной реакции с одной изгрупповых и типовых сывороток определ€ют по таблице серовар иподсеровар шигеллы.

»дентификаци€ выделенных культурне представл€ет затрудне≠ний, если их биологические и серологические свойства совпадают с характеристикой одного из видов шигелл. ≈сли же есть отклонени€ от типичной характеристики, то провод€т дополнительные исследова≠ни€, позвол€ющие с уверенностью подтвердить или исключить принад≠лежность выделенной культуры к шигеллам. ¬ первую очередь изуча≠ют ферментативную активность на "пестром р€ду", способность рас≠щепл€ть аминокислоты. — целью подтверждени€ принадлежности куль≠туры к шигеллам определ€ют способность культуры лизироватьс€ по≠ливалентным дизентерийным фагом.

ѕо проведенному исследованию выдают ответ.

¬ качестве ускоренного катода диагностики дизентерии примен€ют люминесцентную микроскопию исследуемого материала.

—ерологический метод лабораторной диагностики дизентерии основан на обнаружении антител к шигеллам в сыворотке крови больных дизентерией. јнтитела по€вл€ютс€ на 5Ц8 день болезни. ћакси≠мальное накопление их происходит на 2Ц3неделе.

—ерологический диагноз позвол€ет ретроспективно обосновать диагноз при стертых формах заболевани€, а также вы€вить вид возбудител€ дизентерии. ¬ сыворотке крови больных определ€ют титр агглютининов в реакции агглютинации с дизентерийным диагностикумом, содержащим взвесь дизентерийных микробов, убитых формалином. ƒиагностический тигр агглютининов 1:200, у детей, в св€зи с пони≠женной реактивностью, диагностический титр 1:100, а у детей до 3 лет Ц 1:50.  роме реакцииагглютинации, антитела в сыворотке боль≠ных определ€ют в реакции непр€мой гемагглютинации (–Ќ√ј) с эритроцитарным диагностикумом. ѕо результатам реакции выдаетс€ ответ, в котором отмечают положительный или отрицательный результат с каждым примененным антигеном, при положительной реакции указываетс€ титр.

—ерологическое исследование при дизентерии, вызванной палочками Ќьюкасл, Ѕойда практически значени€ не имеет.

¬ результате самосто€тельной работы студент должен знать:

1. —овременную классификацию бактерий семейства Enterobacteriaceae, род шигелла

2. ’арактеристику биологических свойств бактерий рода шигелл

3. Ёпидемиологию, патогенез, восприимчивостьherichia и иммунитет при шигеллезе

4. ќсновные клинические про€влени€ заболевани€ при шигеллезе

6. ћетоды лабораторной диагностики шигеллеза

7. ѕрепараты дл€ идентификации, лечени€ и профилактики заболеваний

”меть:

1. ƒифференцировать возбудителей бактериальной дизентерии по биохимическим и антигенным свойствам

2. »нтепретировать результаты бактериологического исследовани€ микрофлоры кишечника

3.  лассифицировать бактериальные препараты в соответствии с их назначением (при дизентерии и дисбиозах)

 





ѕоделитьс€ с друзь€ми:


ƒата добавлени€: 2015-09-20; ћы поможем в написании ваших работ!; просмотров: 410 | Ќарушение авторских прав


ѕоиск на сайте:

Ћучшие изречени€:

∆изнь - это то, что с тобой происходит, пока ты строишь планы. © ƒжон Ћеннон
==> читать все изречени€...

1513 - | 1330 -


© 2015-2024 lektsii.org -  онтакты - ѕоследнее добавление

√ен: 0.015 с.