Ћекции.ќрг


ѕоиск:




 атегории:

јстрономи€
Ѕиологи€
√еографи€
ƒругие €зыки
»нтернет
»нформатика
»стори€
 ультура
Ћитература
Ћогика
ћатематика
ћедицина
ћеханика
ќхрана труда
ѕедагогика
ѕолитика
ѕраво
ѕсихологи€
–елиги€
–иторика
—оциологи€
—порт
—троительство
“ехнологи€
“ранспорт
‘изика
‘илософи€
‘инансы
’ими€
Ёкологи€
Ёкономика
Ёлектроника

 

 

 

 


„увствительность иммуноанализов

“ермин Ђчувствительностьї применительно к иммуноанализам имеет два разных смысла.

1. „увствительность в физико-химическом понимании - это определ€ема€ данным анализом минимальна€ концентраци€ искомого вещества в пробе.  ак правило, дл€ большинства »‘ј-тест-систем така€ чувствительность составл€ет нанограммы в миллилитре.

 

2. ¬торое понимание термина Ђчувствительностьї - попул€ционное и относитс€ к диагностическим тест-системам, предназначенным дл€ вы€влени€ тех или иных маркеров заболеваний, чаще всего инфекционных.

ѕри разработке любой тест-системы пользуютс€ биологическим материалом, скажем, пробами крови людей, заведомо больных данным заболеванием (эти пробы называют истинно позитивными), и людей, заведомо не больных данным заболеванием (эти пробы называют истинно отрицательными).

ѕараметры рассчитывают по приведенным ниже формулам, где N - число тех или иных результатов конкретных анализов на биологическом материале от пациентов с достоверно известными диагнозами.

„увствительность иммуноанализа в данном случае - это параметр, всегда прив€занный к конкретной тест-системе, а не только к принципу метода. „увствительность зависит от аффинности и авидности взаимодействи€ используемых (или искомых) антител с искомым (или используемым) антигеном, от других реагентов, включенных в систему, от времени и температуры инкубаций.

ѕоскольку св€зывание антител с антигенами не подчин€етс€ линейным зависимост€м, то в цел€х попадани€ в Ђзоны эквивалентностиї практически во всех вариантах иммуноанализов прин€то так называемое титрование сывороток или растворов антигенов, т.е. сыворотки (или растворы антигенов) развод€т известным образом (двукратные, п€тикратные, дес€тикратные или иные разведени€) и каждое из разведений пускают в иммуноанализ. ƒл€ того чтобы установить нижнюю границу достоверных признаков св€зывани€ антител с антигеном (cut-off - граница отличи€ отрицательных результатов от положительных), в каждой постановке иммуноанализов об€зательно применение заведомо отрицательных и заведомо положительных контрольных сывороток. ≈сли целью анализа €вл€етс€ определение не титров сывороток, а численных концентраций искомых антител или антигенов, то прибегают к калибровке. ƒл€ этого тест-система должна располагать калибровочными растворами (от 3 до 10 точек), содержащими известные нарастающие концентрации искомого вещества, а система регистрации результатов тоже должна быть Ђоцифрованаї, например в единицах оптической плотности, измер€емых спектрофотометрически, или в единицах флюоресцентного излучени€, измер€емого флюориметрами, или в единицах числа импульсов в минуту, измер€емых счетчиками радиоактивности (в случае радиоиммуноанализов). ¬ диапазонах пр€молинейности калибровочной кривой возможно определение искомых концентраций в испытуемых биопробах.

 

”читыва€ сказанное, мы приведем лишь пор€док концентраций, вы€вл€емых с помощью различных технологий иммуноанализов. ѕри этом конкретные тест-системы в пределах одной технологии могут по чувствительности отличатьс€ друг от друга также на пор€дки.

ћетоды преципитации, агглютинации и иммунодиффузии работоспособны при концентраци€х искомых веществ пор€дка миллиграммов на миллилитр.  ак правило, калибровочные растворы имеют диапазон концентраций от 1 до 0,1 мг/мл.

“вердофазные радиоиммуноанализы и иммуноферментные анализы работают в большинстве тест-систем в нанограммовых диапазонах концентраций (нанограммы на миллилитр). ќднако ловушечные конструкции тест-систем, а также иммунометрические тест-системы могут иметь существенно более высокую чувствительность, например 10-12-15 г/мл.



<== предыдуща€ лекци€ | следующа€ лекци€ ==>
ћетод иммуноблота | —пецифичность иммуноанализов
ѕоделитьс€ с друзь€ми:


ƒата добавлени€: 2015-02-12; ћы поможем в написании ваших работ!; просмотров: 332 | Ќарушение авторских прав


ѕоиск на сайте:

Ћучшие изречени€:

—тудент может не знать в двух случа€х: не знал, или забыл. © Ќеизвестно
==> читать все изречени€...

1038 - | 669 -


© 2015-2023 lektsii.org -  онтакты - ѕоследнее добавление

√ен: 0.009 с.