Ћекции.ќрг


ѕоиск:




 атегории:

јстрономи€
Ѕиологи€
√еографи€
ƒругие €зыки
»нтернет
»нформатика
»стори€
 ультура
Ћитература
Ћогика
ћатематика
ћедицина
ћеханика
ќхрана труда
ѕедагогика
ѕолитика
ѕраво
ѕсихологи€
–елиги€
–иторика
—оциологи€
—порт
—троительство
“ехнологи€
“ранспорт
‘изика
‘илософи€
‘инансы
’ими€
Ёкологи€
Ёкономика
Ёлектроника

 

 

 

 


—лизистые секреты, сорбированные на пористые губки

√убки, предназначенные дл€ сорбции выделений (из канала шейки матки, со слизистой рта, зубодесневых карманов, полостей носа и т.п.), имеют стандартные размеры и массу. ѕо окончании процедуры сорбции губки помещают в пробирки с экстрагирующим буфером и оставл€ют, как правило, на ночь в холодильнике при 4 ∞—, после чего центрифугируют при 13 000 об/мин в течение 10 мин и супернатант используют в качестве материала дл€ иммуноанализа.

—остав экстрагирующего буфера: 50 мћ HEPES, pH 7,5; 150 мћ NaCl; 1 mM Ёƒ“ј; 25 mM EGTA; 1 mM Na3VO4; 1 mM NaF; 0,1% Tween 20; 10% глицерол.

ћ≈“ќƒ»„≈— »≈ ќ—ќЅ≈ЌЌќ—“» –јЅќ“џ

— »ћћ”Ќќ ќћѕ≈“≈Ќ“Ќџћ»  Ћ≈“ јћ»

ƒл€ вы€влени€ отдельных попул€ций клеток, оценки количественных закономерностей их по€влени€ и накоплени€, изучени€ маркеров и рецепторов различных попул€ций лимфоцитов необходимо овладеть методами работы с клетками иммунной системы.

Ћабораторна€ работа 1-1

¬ыделение органов и тканей иммунной системы

∆ивотное забивают, взвешивают (вес тела животного необходимо знать при вычислении селезеночного индекса), делают разрез по средней линии брюшка, кожу отпрепаровывают и отт€гивают на иглах. Ќаход€т паховые и подмышечные лимфатические узлы.

ƒелают разрез мышц брюшины и извлекают брыжеечные лимфатические узлы. »з брюшной полости извлекают селезенку. ¬скрывают грудную полость и за грудиной наход€т тимус. ¬ырезают бедренные и большие берцовые кости. ¬ыделенные ткани и органы помещают в среду 199 и хран€т при температуре тающего льда (0-2 ∞—). ѕриготовление клеточных суспензий идет при температуре тающего льда в чашках ѕетри или бюксах в стерильных услови€х.

ѕолучение клеточных суспензий из костного мозга

ƒл€ получени€ клеточной суспензии из костного мозга можно использовать бедренные, большие берцовые и плечевые кости.  ости очищают от прилегающих тканей при помощи пинцета и скальпел€, остатки тканей счищают марлей, срезают эпифизы и при помощи шприца с иглой соответствующего диаметра вымывают костный мозг 2-3 мл среды 199 (охлажденной до 0-2 ∞—) в центрифужную пробирку. ќсторожно, избега€ образовани€ пены, клетки суспензируют, пропуска€ взвесь небольшими порци€ми через шприц. ѕолученную суспензию клеток дважды отмывают средой 199 при центрифугировании (250-500 об/мин 10 мин). Hадосадочную жидкость сливают (отбирают), клетки ресуспензируют в свежей среде 199. ¬ полученной суспензии подсчитывают общее количество €дросодержащих клеток и определ€ют их жизнеспособность (см. ниже).

 


<== предыдуща€ лекци€ | следующа€ лекци€ ==>
—истему. Scid(англ. Severe combined immunodeficiency) - мыши, страдающие т€желым иммунодефицитом в результате мутации в генах RAG, ответственных за перегруппировку | Ћабораторна€ работа 2-1
ѕоделитьс€ с друзь€ми:


ƒата добавлени€: 2015-02-12; ћы поможем в написании ваших работ!; просмотров: 361 | Ќарушение авторских прав


ѕоиск на сайте:

Ћучшие изречени€:

Ћогика может привести ¬ас от пункта ј к пункту Ѕ, а воображение Ч куда угодно © јльберт Ёйнштейн
==> читать все изречени€...

1373 - | 1341 -


© 2015-2024 lektsii.org -  онтакты - ѕоследнее добавление

√ен: 0.009 с.