, ( , , , ..), . , , 4 , 13 000 / 10 .
: 50 HEPES, pH 7,5; 150 NaCl; 1 mM ; 25 mM EGTA; 1 mM Na3VO4; 1 mM NaF; 0,1% Tween 20; 10% .
, , .
1-1
, ( ), , . .
. . . . 199 (0-2 ). .
, . , , 2-3 199 ( 0-2 ) . , , , . 199 (250-500 / 10 ). H (), 199. (. ).