Ћекции.ќрг


ѕоиск:




 атегории:

јстрономи€
Ѕиологи€
√еографи€
ƒругие €зыки
»нтернет
»нформатика
»стори€
 ультура
Ћитература
Ћогика
ћатематика
ћедицина
ћеханика
ќхрана труда
ѕедагогика
ѕолитика
ѕраво
ѕсихологи€
–елиги€
–иторика
—оциологи€
—порт
—троительство
“ехнологи€
“ранспорт
‘изика
‘илософи€
‘инансы
’ими€
Ёкологи€
Ёкономика
Ёлектроника

 

 

 

 


ѕрименение метода ”‘-спектроскопии в молекул€рной биологии и биофизике.

 

ћетод ”‘-спектроскопии используют как дл€ идентификации веществ (например, оснований аденин, тимин, гуанин, цитозин в нуклеотидном составе ƒЌ ), так и дл€ количественного анализа. Ќапример, дл€ определени€ содержани€ ƒЌ  в бактериофагах или концентраций бактерий. “акже его можно использовать дл€ определени€ структурных параметров макромолекул (например меры a - спиральности белка). ѕо спектральным измерени€м можно контролировать взаимодействие молекул белка и определ€ть услови€, кинетику этого процесса.

ћетодом ”‘-спектроскопии исследуют переходы спираль Ц клубок в белках или двухцепочечной ƒЌ : денатурацию и ренатурацию при изменении рЌ, температуры, ионной силы. ’ромофор, спр€танный внутри белка при денатурации (разворачивании макромолекулы) становитс€ доступным растворителю, что сопровождаетс€ гиперхромизмом.

ќдно из применений ”‘-спектроскопии - спектрофотометрическое титрование белков. ѕри многих исследовани€х структуры белков возникает необходимость определени€ величин р  диссоциации протонов ионизуемых боковых групп аминокислот, поскольку эти величины указывают на локализацию аминокислоты в белке. Ёто часто можно сделать спектрофотометрически, так как при диссоциации мен€етс€ спектр одного из хромофоров (например в случае тирозина). –ассмотрим гипотетический тирозинсодержащий белок и дл€ определени€ числа внешних тирозиновых остатков воспользуемс€ правилом 2. ѕредположим, что в этом белке имеетс€ п€ть тирозиновых остатков. ≈сли все они расположены на поверхности и ионизуютс€ при увеличении рЌ, спектр, отвечающий остаткам тирозина, будет приближатьс€ к спектру свободного тирозина при высоких значени€х рЌ, изображЄнному на рисунке 13. ƒругими словами зависимость D295 (lмакс дл€ ионизованной формы) от рЌ будет выгл€деть, как крива€ ј на рисунке 13.  огда же, наоборот, три тирозиновых остатка расположены внутри в непол€рном окружении, полученна€ крива€ аналогична кривой Ѕ; отношение величины первого плато к конечной величине равної 2/5. ќтметим, что при очень высоких рЌ на кривой видно большое возрастание D295. Ёто указывает на то, что внутренние тирозиновые остатки стали доступны растворителю, т.е. белок развернулс€ (денатурировал). ≈сли бы три внутренних тирозиновых остатка были в пол€рном окружении, то получили бы кривую, похожую на кривую ¬ (рис.13), котора€ указывает, что эти три остатка имеют значение р , отличное от такового дл€ экспонированных групп.

 

–ис. 13  ривые титровани€ тирозина, при построении которых использовали e295. √ипотетический белок содержит 5 тирозиновых остатков. ј Ц все п€ть остатков наход€тс€ на поверхности, Ѕ Ц два остатка на поверхности, а три внутри, в непол€рном окружении, и, следовательно не титруютс€. ¬- три внутренних остатка наход€тс€ в пол€рном окружении и доступны растворителю.

 

—писок литературы

 

1. —вердлова ќ.¬. Ёлектронные спектры в органической химии. Ћ. ’ими€, 1973.

2. »оффе Ѕ.¬.,  остиков –.–., –азин ¬.¬. ‘изические методы определени€ строени€ органических молекул. Ћ.: »зд-во Ћенинградского ун-та, 1976.

3. ¬илков Ћ.¬., ѕентин ё.ј.‘изические методы исследовани€ в химии - —труктурные методы и оптическа€ спектроскопи€. ћ.: ¬ысша€ школа, 1987

4. ‘райфельдер ƒ. ‘изическа€ биохими€. ѕрименение физико-химических методов в биохимии и молекул€рной биологии. ћ.: ћир, 1980

5. Ѕиополимеры./ под. ред. ё.»маниси ћ: ћир, 1988

6. ¬олькенштейн ћ.¬. Ѕиофизика. ћ: Ќаука, 1981



<== предыдуща€ лекци€ | следующа€ лекци€ ==>
√ипохромный эффект |  лассификаци€ пищевых добавок
ѕоделитьс€ с друзь€ми:


ƒата добавлени€: 2015-05-08; ћы поможем в написании ваших работ!; просмотров: 743 | Ќарушение авторских прав


ѕоиск на сайте:

Ћучшие изречени€:

Ќачинать всегда стоит с того, что сеет сомнени€. © Ѕорис —тругацкий
==> читать все изречени€...

523 - | 420 -


© 2015-2023 lektsii.org -  онтакты - ѕоследнее добавление

√ен: 0.013 с.