Ћекции.ќрг


ѕоиск:




 атегории:

јстрономи€
Ѕиологи€
√еографи€
ƒругие €зыки
»нтернет
»нформатика
»стори€
 ультура
Ћитература
Ћогика
ћатематика
ћедицина
ћеханика
ќхрана труда
ѕедагогика
ѕолитика
ѕраво
ѕсихологи€
–елиги€
–иторика
—оциологи€
—порт
—троительство
“ехнологи€
“ранспорт
‘изика
‘илософи€
‘инансы
’ими€
Ёкологи€
Ёкономика
Ёлектроника

 

 

 

 


‘акторы, вли€ющие на абсорбционные свойства хромофора.

 

—пектр поглощени€ хромофора определ€етс€ в первую очередь химической структурой молекулы. ќднако lмакс и e претерпевают заметные изменени€ и под вли€нием окружени€. »меетс€ в виду вли€ние рЌ, пол€рности растворител€ или соседних моле≠кул и относительна€ ориентаци€ соседних хромофоров. »менно эти факторы лежат в основе использовани€ абсорбционной спектроскопии дл€ характеристики макромолекул. ¬ли€ние окружени€ состоит в следующем.

а) Ёффект рЌ. –Ќ раствора определ€ет ионную форму ионизируемых хромофоров. Ќа рис. 5 показан пример, иллюстрирующий вли€ние рЌ на спектр тирозина.

 

–ис. 5 —пектр поглощени€ тирозина при рЌ 6 и 13. ќтметим, что, как lмакс, так и e возрастают при диссоциации ќЌ-группы фенольного остатка.  

 

б) Ёффект пол€рности. ¬ случае пол€рных хромофоров часто справедливо (особенно если молекула содержит ќ, N или S) что lмакс наблюдаетс€ при более коротких длинах волн в пол€рных растворител€х, содержащих гидроксил (Ќ2ќ, спиртах), чем в непол€рных. ѕример приведен на рис. 6.

 

–ис. 6. ¬ли€ние пол€рности растворител€ на спектр тирозина. –астворители: вода (сплошна€ лини€) и 20%-ный этиленгликоль (штрихова€ лини€). ќтчЄтливо видно возрастание lмакс в менее пол€рном растворителе

 

в) Ёффекты ориентации. ¬еличины lмакс и e существенно зави≠с€т от геометрических особенностей молекул. Ќаиболее известна гипохроми€ нуклеиновых кислот, т. е. понижение коэффициента погашени€ нуклеотида, при условии, что нуклеотид входит в со≠став одноцепочечного полинуклеотида, в котором нуклеиновые основани€ сближены и расположены друг над другом. ƒальнейшее понижение e наблюдаетс€ дл€ двухспиральных полинуклеотидов, т.к. основани€ в этом случае ещЄ более упор€дочены. Ёто показано на рис. 7.

 

–ис 7. —пектры поглощени€ ƒЌ  фага “7 в двухцепочечной (1) и одноцепочечной (2) формах, а также после гидролиза до свободных нуклеотидов (3), показывающие понижение оптической плотности (гипохромию), которое сопровождает образование более упор€доченной структуры. —пектры получены при одинаковой концентрации.  

 

¬ результате исследовани€ большого числа биологически важных соединений и макромолекул, структура которых хорошо известна дл€ различных условий, собран р€д эмпирических фактов, которые могут быть названы рабочими правилами абсорбционной спектроскопии в биохимии [4]. ќни приведены ниже:

1. ≈сли аминокислоты: триптофан, тирозин, фенилаланин и гистидин Ц перемещаютс€ в менее пол€рное окружение, lмакс и e возрастают. —ледовательно:

- если в сн€том в пол€рном растворителе спектре аминокислоты, наход€щейс€ в составе белка, наблюдаютс€ бóльшие lмакс и e, чем эти же величины дл€ свободной аминокислоты в том же растворителе, то эта аминокислота находитс€ во внутренней области белка ("спр€тана") и окружена непол€рными аминокислотами.

- если спектр белка чувствителен к изменению пол€рности растворител€, аминокислота, дл€ которой наблюдаютс€ изменени€ lмакс и e, должна располагатьс€ на поверхности белка.

2. ¬ случае аминокислот lмакс и e всегда возрастают, когда титруема€ группа (например, ќЌ тирозина и SH цистеина) зар€жена. —ледовательно:

- если не наблюдаетс€ изменений в спектре одной из этих аминокислот, а рЌ таково, что должна бы происходить ионизаци€ свободной аминокислоты, то она должна быть спр€тана в непол€рной области молекулы белка.

- если значение р  ионизируемой группы аминокислоты, определЄнное по изменению спектра при изменении рЌ, такое же, как дл€ свободной аминокислоты в растворе, то эта аминокислота находитс€ на поверхности белка.

- если значение р , определЄнное по изменению спектра при изменении рЌ, существенно другое, то эта аминокислота, веро€тно, находитс€ в очень пол€рном окружении (например, тирозин, окружЄнный карбоксильными группами).

 



<== предыдуща€ лекци€ | следующа€ лекци€ ==>
ќсобенности абсорбционной спектроскопии дл€ биологических макромолекул. | √ипохромный эффект
ѕоделитьс€ с друзь€ми:


ƒата добавлени€: 2015-05-08; ћы поможем в написании ваших работ!; просмотров: 719 | Ќарушение авторских прав


ѕоиск на сайте:

Ћучшие изречени€:

Ѕольшинство людей упускают по€вившуюс€ возможность, потому что она бывает одета в комбинезон и с виду напоминает работу © “омас Ёдисон
==> читать все изречени€...

2100 - | 1841 -


© 2015-2024 lektsii.org -  онтакты - ѕоследнее добавление

√ен: 0.008 с.