Аминокислоты
Для культивируемых клеток животных незаменимыми считаются 13 аминокислот, которые включаются в состав ростовых сред. В некоторых случаях существует специфическая потребность в аминокислотах, например серине для лимфобластных линий клеток. Глютамин вносится в состав среды в 10 раз больше других аминокислот, это связано с тем, что он играет важную роль в энергетическом обмене и синтезе нуклеиновых кислот.
Витамины
Лучше всего изучено влияние на рост клеток в культуре водорастворимых витаминов группы В. Для многих клеток в культуре необходим биотин, фолиевая кислота, никотинамид, пантотеновая кислота, пиридоксин, рибофлавин и тиамин. Водорастворимые витамины выполняют функцию коферментов.
Потребность клеток в таких водорастворимых витаминах: аскорбиновой кислоте, р-аминобензойной кислоте, кобаламине изучена в меньшей степени.
В меньшей степени изучено и влияние жирорастворимых витаминов на культуру клеток. Пожалуй лучше других изучено влияние витамина А и Е (а-токоферола), которые входят в состав среды 199.
Основные неорганические ионы
Урожай клеток зависит от соотношения различных ионов (особенно ионов натрия и калия) в питательной среде. Кроме этих ионов для роста культуры необходимы: кальций, магний, фосфор, сера, бикарбонат и хлорид.
Микроэлементы
Считается, что для клеток животных жизненно необходимыми являются такие элементы как: Со, Сu, I, Fe, Мn, Мо, Zn, Se, Сг, Ni, V, Аs, Si, Sn, которые обеспечивают регуляцию метаболизма клетки.
Предшественники нуклеиновых кислот
Хотя клетки в системе in vitro способны синтезировать пурины и пиримидины, внесение предшественников нуклеиновых кислот, 
таких как оротовая кислота, аланин, цитидин, тимидин и гипоксатин в концентрациях 10 -5 – 10 -7 М увеличивает урожайность клеточных культур.
Липиды
Источником липидов в ростовых средах является сыворотка, которая содержит неэстерифицированные жирные кислоты, холестерин, триацилглицериды и фосфолипиды. Такие комплексные среды как Р12 и 199 содержат линолевую кислоту и холестерин соответственно. Существуют указания, что липиды являются группой низкомолекулярных соединений очень важных для роста клеток в культуре.
Кроме источника энергии, липиды являются компонентами клеточных мембран и предшественниками синтеза простагландинов. К незаменимым относятся такие жирные кислоты как олеиновая (18:1n=9), линолевая (18:2n= 6) линоленовая (18:3n=3) и арахидоновая (20:4n=б), а также холестерин и фосфолипиды. В ростовые среды их вводят в виде липосом. В состав липосом включают такой антиоксидант как витамин У, что предотвращает окисление липидов. Клетки млекопитающих могут использовать этаноламин для синтеза фосфотидилэтаноламина. Для роста гибридомных клеток этаноламин является обязательным компонентом среды.
