Методы определения железа сыворотки

Колориметрические методы: батофенантролиновый и феррозиновый. Эти методы основаны на образовании комплексов, интенсивность окрашивания которых оценивается фотометрически.

Определение общей (ОЖСС) и ненасыщенной железосвязывающей способности сыворотки крови (НЖСС)

Содержащееся в сыворотке (плазме) крови железо связано с белком β₁-глобулиновой фракции – трансферрином, который синтезируется в печени и препятствует накоплению в плазме свободных токсических ионов железа. В норме этот белок насыщен железом на 30%. Общая железосвязывающая способность сыворотки крови (ОЖСС) отражает наибольшее количество железа, которое может присоединить трансферрин. Она складывается из связанной, насыщенной железом части (сывороточное железо) и ненасыщенной (латентной) железосвязывающей способности сыворотки (НЖСС, ЛЖСС) крови.

Ненасыщенная (латентная) железосвязывающая способность сыворотки крови (НЖСС, ЛЖСС)

НЖСС - это произвольный показатель, получаемый в результате математической разницы значений общей железосвязывающей способности сыворотки (ОЖСС) и сывороточного железа (ЖС):

НЖСС (ЛЖСС) = ОЖСС – ЖС. Косвенно отражает количество в сыворотке крови «свободного» («несвязанного с железом») трансферрина, т.е. апоферритина.

Коэффициент (процент) насыщения трансферрина железом (КНТ, НТЖ) - показатель, отражающий удельный вес «связанного с железом трансферрина» среди общего количества сывороточного трансферрина:

К (%) = (Сывороточное железо / ОЖСС) ∙ 100.

Нормы:

ОЖСС: 44,8-71,6 мкмоль/л, 3-4 мг/л (мкг/100 мл = 5,585 мкмоль/л)

НЖСС (ЛЖСС): 26,8-41,2 мкмоль/л, 1,5-2,5 мг/л

КНТ (НТЖ) - около 30% (20-55%).

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЧАСТЬ

Определение железа и железосвязывающей способности сыворотки крови »

1. Приготовить рабочее место: наборы реактивов, согласно инструкциям к набору реактивовдля определения железа и железосвязывающей способности сыворотки крови, штатив, химические пробирки, механические пипетки, наконечники для пипеток, биологический материал.

2. Провести определение концентрации железа и ОЖСС сыворотки крови.

3. Сделать расчет ЖС, ОЖСС, ЛЖСС и КНТ.

Оформление протокола исследования.

1. Записать принципы метода.

2. Записать схему проведения анализа.

3. Оформить результаты.

4. Сделать расчеты.

5. Выписать нормальные значения.

6. Сделать вывод: сравнить полученный результат с нормой.

7. Выписать из инструкции особенности особенность преаналитического этапа и влияющие факторы.

Интерпретация результатов:

1. Транспортный фонд железа оценивают на основе показателей: сывороточное железо (СЖ), общая железосвязывающая способность сыворотки (ОЖСС), латентная (ненасыщенная) (ЛЖСС, НЖСС), коэффициент насыщения трансферрина (КНТ).

2. Запасы железа в организме оценивают, определяя уровень ферритина в сыворотке. Однако следует учитывать, что диагностическая значимость этого показателя снижается при воспалительных процессах в организме, т.к. ферритин относится к белкам острой фазы.

3. Эффективность эритропоэза оценивают по уровню трансферриновых рецепторов (TfR) в сыворотке крови. Наибольшее количество этих рецепторов находится на клетках-предшественниках эритроцитов. По мере созревания эти клетки теряют свои рецепторы, и концентрация TfRвозрастает в сыворотке при усилении эритропоэза.

Клинико-диагностическое значение определения железа и железосвязывающей способности сыворотки крови

Таблица 1. Причины дефицита железа

Хроническая кровопотеря · Желудочно-кишечная (язвы и опухоли, грыжи пищевода и кишечника). · При менструациях и родах. · Легочная. · Через моче-половой тракт (заболевание почек, урологическое заболевание). · Рецидивирующие носовые кровотечения.

Нарушение всасывания. · Резекция желудка и 12-перстной кишки, атрофические изменения слизистой желудка. · Недостаточность поджелудочной железы. · Глютеновая энтеропатия (целиакия) и спру.

Повышение потребности · Быстрый рост (недоношенные новорожденные, дети, подростки). · Беременные и лактация.

Бедная железом диета.

Таблица 2. Стадии железодефицитного состояния (ЖДС) и их основные характеристики

Стадия ЖДС	Основные характеристики
Предлатентный дефицит железа	· Увеличение всасывания железа в ЖКТ. · Клинические симптомы отсутствуют. · Лабораторные показатели в пределах нормы.
Латентный (скрытый) дефицит железа Снижение запасов железа – первая стадия развития ЖДС	· Снижение тканевых запасов железа. · Уровень показателей транспортного фонда в норме. · Гемоглобин в норме. · Клинических проявлений нет. · Снижен уровень ферритина сыворотки, повышены трансферриновые рецепторы.
Латентный (скрытый) дефицит железа. Железо-дефицитный эритропоэз – вторая стадия развития ЖДС	· Истощение тканевых запасов железа. · Гемоглобин в норме; анемии нет. · Имеются клинические проявления (сухость кожи, ломкость ногтей, ангулярный стоматит, извращения вкуса и т.д.). · Снижен уровень ферритина сыворотки; повышение ОЖСС и растворимых рецепторов для трансферрина; СЖ снижен, но может быть в норме.
Железодефицитная анемия (ЖДА) Заключительная стадия дефицита железа в организме - клинически манифестное состояние	· Запасы железа в организме истощены; гемоглобин снижен. · Микроцитоз; анизоцитоз; пойкилоцитоз. · Уменьшен СОК (МCV), ССГ (MCH) и СКГ (MCHC). · Возникает гипохромия эритроцитов. · СЖ снижено до 5 мкмоль/л (может быть на нижней границе нормы); ОЖСС повышена (> 75 мкмоль/л); сывороточный ферритин значительно снижен (обычно не определяется, т.е. < 5 мкмоль/л); КНТ (НТЖ) ˂15%. · Анемические гипоксидистрофические изменения в органах и тканях.

Таблица 3. Клинические проявления ЖДС у детей раннего, старшего возраста и взрослых.

Признаки	Дети раннего возраста	Дети старшего возраста и взрослые
Пол	Чаще дефицит встречается у мальчиков	Чаще у девочек и женщин (менструальные потери)
Бледность кожи и видимых слизистых оболочек	Выражены у 90% детей с ЖДА и у 50% с ЛДЖ	Выражены у большинства больных, нередка пастозность лица, рук и голеней, у девушек с хлорозом - «алебастровая бледность», кожа с зеленоватым или бледно-голубоватым оттенком.
Эпителиальный синдром (сухость кожи, глоссит, стоматит, ломкость, слоистость ногтей, их поперечная исчерченность и ложкообразная форма (койлонихии).	Практически не встречается.	Выраженность зависит от длительности сидеропении. Трофические нарушения волос и ногтей наблюдается у 1/3 детей, ангулярный стоматит («заеды» в уголках губ) - у ¼ пациентов. Глоссит при тяжелом течении часто.
Извращение вкуса	Редко	Тяга к острой и соленой пище, и парарексия: выражено влечение к употреблению несъедобных веществ – мела, зубного порошка, глины, земли, песка, льда, угля, штукатурки и др. Больные часто едят сырые продукты – крупы, тесто, фарш. Чаще - у девочек.
Извращение обоняния	Возможны	Пристрастие к необычным запахам - керосина, бензина, ацетона, лака, гуталина, выхлопных газов автомашин, свежей типографской краски (газеты, книги), свежей побелки и т.д.
Снижение аппетита	Снижен	Чаще снижен.
Астено-вегетативные нарушения Сердечно-сосудистая система	Родители обращают внимание на вялость ребенка, быструю утомляемость	Выражена одышка при небольшой нагрузке. Характерно появление систолического шума над всей поверхностью сердца и над крупными сосудами, синусовая тахикардия, синусовая аритмия. При длительном малокровии наступает дистрофия миокарда.
Синдром мышечной гипотонии	Выражен	Выражен у большинства больных.
Нарушение мочеиспускания	Сложно определить	Императивные позывы на мочеиспускание; ночное неудержание мочи, чаще у девочек; неудержание мочи при смехе, кашле.
Синева склер	Редко	Выражена у 80% больных.

Высокое содержание железа наблюдается при повышенном поступлении в организм, при недостаточном использовании его в кроветворных органах, недостаточном использовании для образования ферритина при заболеваниях печени; при пернициозной анемии, гемолитической анемии, талассемиях, дефиците витамина В₁₂ (макроцитарная, гиперхромная анемия), гломерулонефрите, избыточной терапии препаратами железа. Наследственное нарушение механизма, ограничивающего всасывание железа в ЖКТ, приводит к повышенному поступлению железа в организм и развитию гемохроматоза – отложению железа в паренхиматозных органах в виде гемосидерина: отложение железа в печени приводит к ее циррозу, в поджелудочной железе – к сахарному диабету, в коже – к пигментации.