Упражнение №1. Определение зависимости оптической плотности

От концентрации раствора.

1. Подключить фотометр в сеть и включить тумблер «СЕТЬ».
2. При открытой дверке кюветного отделения прогреть прибор в течение 30 мин.
3. Установить в кюветное отделение кювету с дистиллированной водой и исследуемым раствором, начиная с наименьшей концентрации. При работе с кюветами нельзя касаться пальцами рабочих поверхностей, на них не должны оставаться следы жидкости.
4. Установить длину волны в 405 нм.
5. Определить оптическую плотность раствора рибофлавина, последовательно увеличивая концентрации.
6. Полученные данные занести в таблицу.

 

С%	0,75	1,5
Д

 

 

1. По полученным данным построить график зависимости оптической плотности Д от концентрации С.

 

Упражнение №2. Определение зависимости оптической плотности растворов от длины световой волны.

1. В 6-% -ном растворе рибофлавина для указанных в таблице длинах световых волн определить оптическую плотность раствора Д.
2. В кюветное отделение поместить 3-%-ный раствор рибофлавина и определить оптическую плотность для тех же длин волн.
3. Полученные данные занести в таблицу.

 

l (нм)
6 %
3 %

1. По данным таблицы на одной координатной плоскости построить графики зависимости оптической плотности Д от длины световой волны l.
2. Сделать выводы с учетом полученных результатов.

 

Контрольные вопросы

1. Закон Бугера (с выводом). Натуральный показатель поглощения.
2. Закон Бугера–Ламберта–Бера (с выводом). Натуральный молярный показатель поглощения и его физический смысл. Молярный показатель поглощения.
3. Коэффициент пропускания и оптическая плотность растворов.
4. Рассеяние света. Закон Рэлея.
5. Фотобиологические процессы. Спектры фотобиологического действия.
6. Оптическая схема фотоэлектроколориметра (спектрофотометра) и работа с ним.
7. Применение спектрофотометрии в биологии и медицине.

Тестовые задания

1. В дифференциальном уравнении, описывающем поглощение света: , величина коэффициента пропорциональности k зависит от:

а) толщины поглощающего слоя;

б) интенсивности падающего света;

в) интенсивности света, прошедшего через вещество;

г) поглощающей среды и длины световой волны;

д) времени действия света на вещество.

 

2. В законе Бугера: является:

а) молярным показателем поглощения;

б) натуральным молярным показателем поглощения;

в) натуральным показателем поглощения;

г) монохроматическим показателем поглощения;

д) натуральным показателем рассеяния.

 

3. Укажите формулу, выражающую закон Бугера для поглощения света:

а) ; б) ; в) ; г) ; д) .

 

1. Укажите формулу, выражающую закон Бугера – Ламберта – Бера:

а) ; б) ; в) ;

г) ; д) .

 

5. Укажите связь между молярным показателем поглощения ε и натуральным молярным показателем поглощения :

а) ; б) ; в) ;

г) ; д) .

 

6. Укажите формулу молярной концентрации:

а) ; б) ; в) ; д) .

 

7. В законе Бугера – Ламберта – Бера величина есть:

а) молярный показатель поглощения;

б) натуральный показатель поглощения;

в) натуральный молярный показатель поглощения;

д) натуральный показатель рассеяния.

 

8. Укажите формулу коэффициента пропускания:

а) ; б) ; в) ;

г) ; д) .

 

9. Укажите формулу оптической плотности раствора:

а) ; б) ; в) ;

г) ; в) .

10. Спектр поглощения выражает зависимость:

а) б)

в) г)

 

11. К негативным фотобиологическим процессам относятся:

а) зрение;

б) фотопериодизм;

в) фототоксические и фотоаллергические;

г) образование витамина Д под действием УФ.

 

12. К позитивным фотобиологическим процессам относятся:

а) фототоксические;

б) образование витамина А;

в) фотоаллергические;

г) зрение, фотопериодизм, образование витамина Д.

 

13. Что является первой стадией любого фотобиологического процесса:

а) внутримолекулярные процессы размена энергии;

б) фотохимический акт;

в) межмолекулярный перенос энергии;

г) поглощение кванта света;

д) биохимические реакции с участием фотопродуктов.

 

14. Чем заканчивается фотобиологический процесс:

а) межмолекулярным переносом энергии;

б) биохимическими реакциями с участием фотопродуктов;

в) темновыми превращениями первичных фотохимических продуктов;

г) общефизиологическим ответом.

 

15. Спектром фотобиологического действия называется:

а) зависимость биологического эффекта от времени действия света;

б) зависимость оптической плотности раствора от интенсивности действующего
света;

в) зависимость коэффициента пропускания от концентрации раствора;

г) зависимость фотобиологического эффекта от длины волны действующего
света.

 

16. В результате процесса поглощения скорость изменения концентрации n фермента в растворе определяется формулой:

а) ; б) ;

в) ; г) .

17. Укажите формулу дозы облучения:

а) ; б) ;

в) ; г) .

 

18. Укажите формулу эффективного сечения поглощения молекулы фермента:

а) ; б) ;

в) ; г) .

19. Укажите вид графика, выражающего зависимость: :

а б

 

в г

 

20. Укажите вид закона Рэлея для мелкодисперсной среды, а также при молекулярном рассеянии света:

а) ; б) ; в) ; г) .

21. Укажите, как будет выглядеть закон Бугера с учетом процессов поглощения и рассеяния:

а) б)

в) г)

 

22. Монохроматический свет – это свет:

а) с переменной длиной волны;

б) с постоянной частотой и фазой;

в) с постоянной длиной волны;

г) с наложением волн различных частот.

23. Натуральный молярный показатель поглощения – суммарное эффективное сечение поглощения всех молекул растворенного вещества, содержащихся:

а) в 1 м³; б) в одном моле;

в) в 1 см³; г) в 1 дм³.

 

24. Натуральный молярный показатель поглощения определяется по формуле:

а) ; б) ;

в) ; г) .

25. В оптической схеме спектрофотометра кювета расположена между:

а) диафрагмой и пластиной, делящей световой поток на две части;

б) монохроматором и пластиной, делящей световой поток на две части;

в) пластиной, делящей световой поток на две части и фотоэлементом;

г) конденсором и объективом.

 

26. Пластина в фотоэлектроколориметре делит световой поток так, что:

а) 90 % света направлено на фотодиод, 10 % – на фотоэлемент;

б) 50 % на фотодиод, 50 % – на фотоэлемент;

в) 10 % света направлено на фотодиод, 90 % – на фотоэлемент;

г) 30 % света направлено на фотодиод, 70 % – на фотоэлемент.

 

27. После включения спектрофотометра:

а) можно сразу приступать к работе с ним;

б) нужно прогреть прибор в течение 5 мин;

в) нужно прогреть прибор в течение 10 мин;

г) нужно прогреть прибор в течение 30 мин.

 

28. График, выражающий закон Бугера, имеет следующий вид:

а б

 

в г

 

29. Оптическая плотность растворов Д имеет следующую единицу измерения:

а) м; б) ; в) безразмерная величина; г) .

30. Уравнение для вывода закона Бугера имеет следующий вид:

а) ; б) ;

в) ; г) .

 

 

Лабораторная работа №12