ГБОУ ВПО Волгоградский государственный медицинский университет
Министерства здравоохранения и социального развития
Российской Федерации
Кафедра биологии
«Утверждаю»
Зав. кафедрой биологии,
д.м.н.
М.В. Черников__________
''____'' _________ 2011 г
Методические рекомендации для студентов 1 курса медико-биологического факультета к лабораторным занятиям по учебно-биологической практике.
Для специальности: 060601 «Медицинская биохимия»
Тема: Обработка собранных в полевых условиях образцов почвы, воды и биологического материала.
Цель: Обработка собранных в полевых условиях образцов почвы, воды и биологического материала:
1. Проведение дополнительной фиксации собранных животных. 2. Тестирование на загрязненность образцов воды и почвы. 3.Проведение паразитологического обследования моллюсков, определение наиболее распространенных видов личинок трематод. 4. Составление экологического паспорта. 5. Оформление дневника практики.
Подготовка группы студентов к выходу в полевые условия: 1) разбор рабочего плана; 2) подготовка инструментария и фиксирующих жидкостей.
Перечень знаний и практических навыков:
1. Знать основные методы сбора, хранения и тестирования на загрязненность образцов почвы.
2. Знать основные методы сбора, хранения и тестирования на загрязненность образцов воды.
3. Знать жизненный цикл и морфологию наиболее распространенных видов трематод.
4. Уметь проводить паразитологическое обследование моллюсков – промежуточных хозяев трематод.
Основные вопросы темы:
1. Понятие об экологическом мониторинге.
2. Основные методы сбора, хранения и тестирования на загрязненность образцов почвы.
3. Основные методы сбора, хранения и тестирования на загрязненность образцов воды.
4. Жизненный цикл и морфология наиболее распространенных видов трематод.
5. Паразитологическое обследование моллюсков – промежуточных хозяев трематод.
Краткое содержание темы
Современный термин «мониторинг» обозначает наблюдение, анализ и оценку состояния окружающей среды, её изменений под влиянием хозяйственной деятельности человека, а также прогнозирование этих изменений.
Выбор объектов мониторинга при исследовании почв
На ключевых участках должны быть представлены наиболее типичные экосистемы. Биоценоз внутри каждого участка должен быть однородным, что свидетельствует об однородности почвообразующих пород, рельефа, характера увлажнения, микроклимата, типа почвы. Одни ключевые участки (опытные) располагаются на территориях с экологической напряженностью (в населенных пунктах, на промплощадках, в зонах интенсивной эксплуатации природных ресурсов), а другие (контрольные) – на чистых, фоновых территориях в естественных природных условиях
Отбор образцов почвы
На изучаемой территории при наличии одного источника загрязнения выделяют два участка 25 м2 каждый: один вблизи источника загрязнения (опытный), другой – вдали (контрольный). Контрольный выбирают с таким расчетом, чтобы он был заведомо незагрязненным и имел одинаковый почвенный состав с опытным.
Пробы почвы отбираются на каждом из участков в его пяти точках по диагонали или по «конверту» (четыре точки по углам и одна в центре). Если исследователя интересуют последствия непосредственного внесения химического вещества в почву, то пробы отбираются поверхностно (0-1 см) стерильным инструментом (нож, шпатель) в количестве 0,3-0,5 кг в одной точке.
Если изучается воздействие химического вещества на микрофлору почвенного горизонта, то для отбора проб почвы пользуются следующей методикой. Каждая точка, в которой проводится отбор проб почвы, представляет собой центр выбранного для исследования 1 м2 территории. Здесь выкапывается шурф размером 0,3х0,3 м и глубиной 0,2 м. Поверхность одной из стенок шурфа очищают стерильным ножом. Затем из этой стенки вырезают почвенный образец, размер которого обусловлен заданной навеской. Так, если необходимо отобрать 200 г почвы, размер образца 20 см х3 см х 3 см; 500 г – 20 см х 5 см х30 см.
При изучении воздействия пестицидов и других химических веществ на микрофлору и процессы самоочищения в более глубоких слоях почвы, для отбора проб почвы пользуются шурфом глубиной до 1 м. Пробы отбираются из стенки шурфа стерильным инструментом через каждые 10 см.
Отобранные образцы помещают в стерильную посуду и доставляют в лабораторию. При невозможности приступить к исследованию почвы немедленно, допускается хранение образца при температуре 4-5 °С, но не более 24 часов.
Подготовка и обработка почвы для анализа. Для приготовления среднего образца объемом 0,5 кг почву всех образцов одного участка высыпают на стерильный плотный лист бумаги, тщательно перемешивают стерильным шпателем, отбрасывают камни и прочие твердые предметы. Затем почву распределяют на месте ровным тонким слоем в форме квадрата.
Диагоналями почву делят на 4 треугольника. Почву из двух противоположных треугольников отбрасывают, а оставшуюся вновь перемешивают, опять распределяют тонким слоем и делят диагоналями и так до тех пор, пока не останется примерно 0,5 кг.
Перед посевом почву диспергируют, т.е. почву с соблюдением условий стерильности просеивают через сито диаметром 3 мм. При просеивании сито сверху покрывают стерильной бумагой.
Выбор объектов мониторинга при исследовании воды
При исследовании качества воды на всем протяжении водотока места отбора проб выбирают через равные интервалы от истока до устья. Если исследуется влияние конкретного источника загрязнения, качество воды может определяться на небольшом числе участков ниже и выше по течению от него. Очень важно, чтобы в пробах накаждом из обследованных участков были представлены донные организмы различных биотопов: илистых, песчаных и каменистых грунтов; скоплений растительности, а также ее остатков; погруженных в воду стволов, веток и иных предметов.
