Биохимические методы применяются в диагностике генных болезней, которые связаны с генными мутациями. Для исследования берут кровь, лимфу, мочу, слюну, пот, околоплодные воды. В них изучают структуру белков, промежуточные продукты обмена веществ, определяют активность ферментов.
202. Метод генетики соматических клеток в генетическом анализе человека. Его возможности.
Из организма выделяют соматические клетки и помещают их в питательную среду. В питательной среде клетки живут, функционируют и выделяют продукты функциональной активности генов (белки). Эти продукты жизнедеятельности изучают и делают выводы о работе соответствующих генов. Кроме того, можно провести гибридизацию клеток (in vitro – в стекле), т.е. соединить соматические клетки различных видов организмов и получить гибридные клетки. Чаще всего проводят гибридизацию клеток человека и мышей. В гибридных клетках изучают работу соответствующих генов. Метод позволяет выявлять генные мутации, а также определять локализацию генов, используется для построения генетических карт хромосом человека.
Популяционно-статистические методы генетического анализа человека. Его возможности.
Этот метод основан на законе Харди – Вайнберга.
Его математическое выражение: (Р+ g)2 = P2 + 2Pg + g2 = 1
Р – частота встречаемости доминантного гена
g – частота встречаемости рецессивного гена.
Суммы всех частот аллельных генов (и генотипов) = 1.
Метод позволяет рассчитать частоту гомозигот и гетерозигот в популяции, а также частоту доминантных и рецессивных генов в популяции.
204. Молекулярно-цитогенетический метод генетического анализа человека (FISH). Его возможности.
Молекулярно-генетический метод (ДНК-диагностика) позволяет изучить последовательности нуклеотидов в пределах гена, что используется в диагностике генных мутаций. Экспериментально получают определенные последовательности нуклеотидов или ДНК-зонды, соответствующие тем или иным генам. ДНК-зонды помечают радиоактивной меткой (фосфор-32) или флюоресцентным веществом. Из хромосомы человека выделяют ген, который должен взаимодействовать с ДНК-зондом. Если взаимодействия нет, то делают вывод о соответствующей генной мутации.
Сущность молекулярно-генетических методов генетического анализа человека (ДНК-диагностика). Возможности этих методов.
Экспериментально получают ДНК зонды или РНК зонды, представляющие определенную последовательность нуклеотидов. Их метят радиоактивной меткой (Р32). Затем из клеток человека выделяют фрагменты ДНК, и к каждому фрагменту подводят зонд. Если фрагмент ДНК и зонд взаимодействуют (по принципу комплементарности), то на рентгеновской пленке появится характерное свечение. Зная последовательность нуклеотидов в зонде можно узнать последовательность нуклеотидов во фрагменте ДНК человека. Если взаимодействия нет, можно сделать вывод о генной мутации. В настоящее время получены зонды к 21 хромосоме и к У-хромосоме. Метод удобен тем, что диагностику хромосомных болезней можно проводить на стадии интерфазы митоза.
206. Что представляет собой пренатальная диагностика наследственных болезней. Назовите, известные Вам, непрямые методы пренатальной диагностики.
Пренатальная диагностика — комплексная дородовая диагностика с целью обнаружения патологии на стадии внутриутробного развития. Непрямые методы – обследование беременной женщины. Используются различные методы – генеалогический, цитогенетический, биохимический, иммунологический, серологический, бактериологический, молекулярно-биологический. При использовании непрямых методов о состоянии плода судят по биохимическим изменениям в крови и моче беременной женщины, а также по результатам других предусмотренных в таких случаях методах.
