Принцип метода - основан на реакции Златкис-Зака. Холестерин при взаимодействии с хлоридом железа (+3) в присутствии смеси серной, фосфорной и уксусной кислот образует окрашенный продукт, оптическая плотность его раствора пропорциональна концентрации холестерина.
Ход работы: В двух чистых пробирках приготовить растворы – опыт (оп) и стандарт (ст), как указано в таблице № 1.
Таблица № 1.
| Реагенты | Объем пробы оп (мл) | Объем пробы ст (мл) |
| Стандартный р-р ХС | - | 0,2 |
| Сыворотка крови | 0,2 | - |
| Уксусная к-та (лед) | 3,0 | 3,0 |
| Рабочий р-р FeCI3 | 2,0 | 2,0 |
Содержимое пробирок перемешать и инкубировать при комнатной температуре 15 минут, затем определить оптическую плотность против воздуха, используя зеленый светофильтр.
Расчет концентрации холестерина провести по формуле:
СХС = ЕОП/ЕСТ . 1,29 ммоль/л (или 50 мг%)
Содержание общего холестерина колеблется в пределах 3,6 – 6,7 ммоль/л; рекомендуемые значения < 5,2; пограничные 5,2 – 6,5; повышенные > 6,5 ммоль/л.
Клинико-диагностической значение: Исследование уровня ХС в сыворотке крови не даёт точной диагностической информации о конкретном заболевании, а лишь отражает патологию обмена липидов в организме. Его содержание исследуется для уточнения диагноза типа липидемии, а также для расчёта коэффициента атерогенности (см. ниже) и прогноза развития коронарного артериосклероза.
Гиперхолестеринемия -повышенный уровень ХС - наблюдается при IIа, IIб, III типах липидемий, сахарном диабете, ожирении, алкоголизме, холестазе и др. Гипохолестеринемия - при голодании, синдроме мальабсорбции, гипертиреозе, онкологической кахексии, туберкулёзе, анемиях.
Вывод: В клинической практике для оценки атерогенности дислипопротеинемий пользуются расчетным индексом атерогенности(ИА), или коэффициентом атерогенности (КА), который рассчитывается как отношение показателей.
ХС общ - ХС(ЛПВП)
И.А.(К.А) = ————————
ХС(ЛПВП)
Числитель представляет собой суммарное содержание холестерина в атерогенных фракциях (ЛПОНП и ЛПНП)
В норме КА не должен превышать 3,3 В противном случае ставится диагноз - атеросклероз.
При нормолипидемии, чем ближе значение И.А.(КА) к верхней допустимой границе, тем выше вероятность развития атеросклероза. Коэффициент КА позволяет выявлять клинические и доклинические стадии атеросклероза.
7 КОНТРОЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ ПО ТЕМЕ ЗАНЯТИЯ: смотри задание для студентов к практическому занятию.
8. ЛИТЕРАТУРА ДЛЯ ПОДГОТОВКИ
Основная
1.Биохимия: Учебник /Под ред. Е.С. Северина. – М.: ГЭОТАР-МЕД. 2003. – 784 с.: ил. – (Серия «XXI век») С.409 -417, 439 -444..
2.Биохимия с упражнениями и задачами: Учебник/ Под. Ред чл.-корр. РАН. Проф. Е.С.Северина.-М.: ГЭОТАР-Медиа, 2008.-384с. С.225 - 219.
3.Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия. – 3-е изд., перераб. и доп. –М.: Медицина. – 2004. – 704с.
4. Биохимия.Тестовые вопросы. Учебное пособие/ Под ред. Д.М. Зубаирова, Е.А.
Пазюк.-М.: «ГЭОТАР-Медиа»2010.-960с.
Дополнительная
1.Биологическая химия:учебник / В.К.кухта, Т.С.Морозкина,Э.И.Олецкий, А.Д.Таганович. под ред. Тагановича-Минск. Агар, М.: Издательство БИНОМ,2008.-688с.
2..Марри Р., Греннер Д., Мейес П., Родуэлл В. Биохимия человека: в 2-х томах. Т. 1. Пер. с англ.: – М.: Мир, – 1993. – 384 с.
3.Зайчик А.Ш., Чурилов Л.П. Основы общей патологии. Часть 2. Основы
патохимии (Учебное пособие для студентов медицинских ВУЗов) – СПб. – 2000. – 686 с.
4. Л.А. Данилова Анализы крови м и мочи -СПб,1999. 128 с.
Методические указания подготовлены
Доц. каф. биохимии к.х.н. Каминская Л.А.
ГОУ ВПО УГМА РОСЗДРАВА
кафедра биохимии
Утверждаю
Зав. каф. проф., д.м.н.
Мещанинов В.Н.
_____‘’_____________2010 г
Биохимия
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ДЛЯ СТУДЕНТОВ
К ПРАКТИЧЕСКОМУ ЗАНЯТИЮ
Факультет: стоматологический
1 курс. 2. семестр
1. ТЕМА ЗАНЯТИЯ Биохимия липидного обмена – 5. Регуляция липидного обмена. Патология липидного обмена.
2. ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ:
Изучить представления о существовании уровней регуляции липидного обмена, молекулярных причинах и направлениях развития патологии липидного обмена
3. ЗАДАЧИ ЗАНЯТИЯ:
3.1. Изучить значение и особенности каждого уровня биохимической
регуляции липидного обмена(центрального, межорганного,
клеточного)
3.2. Изучить молекулярные механизмы развития патологии липидного
обмена (дислипопротеинемии, атеросклероз, стеатоз, ожирение, кахексия), направления лабораторной диагностики: исследование липидограммы, индекса атерогенности.
4. ПРОДОЛЖИТЕЛЬНОСТЬ ЗАНЯТИЯ: 2 акад. часа.
5. ЗАДАНИЕ СТУДЕНТАМ:
5 1. Сделать конспект объяснения преподавателя
5. 2 Ответить на вопросы преподавателя..
5.3. Ответить на вопросы тестового контроля
