Микрофлора ротовой жидкости

Ротовая жидкость является резервуаром микрофлоры и пищевых ос­татков, из которых формируются зубные отложения; определена тесная корреляция между численностью микроорганизмов в зубных отложе­ниях и в ротовой жидкости. Учитывая это, а также то, что ротовая жид­кость — более доступный для исследования материал, чем зубной налет, в клинической практике чаще изучают содержание микроорганизмов в слюне и по результатам исследования косвенно судят о качестве зуб­ных отложений.

1. Бактериологическое определение концентрации Streptococcus mutans. Ротовую жидкость (3—5 мл) собирают в пробирку и передают ее в ла­бораторию. Материал разводят, засевают на селективную питатель­ную среду и инкубируют его. Учитывают число колоний, выросших из 1 мл слюны. Результат вычисляется в КОЕ — колониеобразующих единицах, и часто именуется индексом стрептококков. Величина ин­декса стрептококков более 2-10⁵ КОЕ/мл рассматривается как фактор риска развития кариеса.

2. Бактериологическое определение концентрации Lactobacillus. Техни­ческое выполнение метода отличается от определения S. mutans лишь селективными условиями выращивания колоний. При индексе лакто­бацилл, превышающем 1*1О⁶ КОЕ/мл, делают вывод о значительном риске развития кариеса. Указывают, что величина индекса Lactobacillus коррелирует с уровнем потребления сладостей и с КПУЗ, но не соот­носится с количеством зубных отложений, определяемым по индексам гигиены.

3. Определение концентрации Streptococcus mutans методом погружен­ных стекол. Для упрощения этапов забора ротовой жидкости, транспор­тировки, подбора сред и условий для инкубации материла, в течение последних 30 лет производятся бактериологические тест-системы, при­менимые в «полевых» условиях. Тест-система представляет собой фла­кон, наполненный селективной питательной средой (содержащей в том числе антибиотик бацитрацин, угнетающий рост всех других оральных микроорганизмов, способных к росту на этой среде, кроме S. mutans и S. sobrinus), к крышке которого присоединен небольшой пластиковый стеклянный шпатель. Для забора материла достаточно поместить шпа­тель под язык, так как S. mutans быстро прикрепляются к любой гладкой поверхности. Флакон плотно закрывают, шпатель при этом погружается в питательную среду. После инкубации флакона в термостате в течение 4 сут. изучают количество (плотность) колоний, выросших на шпателе.

Оценку проводят, зрительно сравнивая свой материал с фотография­ми — шаблонами, полученными изготовителями тест-систем в ходе калибровочных бактериологических исследований и соответствующих КОЕ/мл=1*10³; 1*1О⁴; 1*1О⁵; 1*1О⁶. При КОЕ/мл=10⁵ диагностируют вы­сокий риск кариеса (рис. 5.25).

4. Определение концентрации Lactobacillus в ротовой жидкости ме­тодом погружных стекол. Тест-система состоит из флакона и поме­щенного в него шпателя (предметного стекла), покрытого селективной средой. Поверхность шпателя поливают свежесобранной стимулиро­ванной слюной (считают, что на поверхности шпателя остается около

1 мл слюны), помещают его в пустой флакон и инкубируют в течение

2сут. (рис. 5.26). Результаты оценивают при помощи фотографий-шаб­лонов, так же как и при определении количества стрептококков.

5.Титр лактобактерий. Материал (ротовую жидкость) собирают че­рез 1—3 ч после еды. В бактериологической лаборатории ротовую жид­кость последовательно десятикратно разводят на 7—9 порядков (10^-9) и засевают каждым «разведением» отдельный флакон с питательной средой. Логарифмический показатель наибольшего разведения, давше­го рост лактобацилл, называют титром. Титр <10^-4считают повышен­ным, соответствующим высокому риску развития кариеса.