Бактериологический метод Исследуемый материал: при кишечных эшерихиозах испражнения, при парентеральных — материал из соответствующего инфекционного очага (моча, отделяемое раны, кровь, ликвор )
1 день посев испражнений на ДДС: 2 день Учет характера роста на средах
на среде Эндо (бледно-розовая) Лактоза +красные с металлическим блеском | на среде Левина (фиолетовая) Лактоза +фиолетовые с металлическим блеском | на среде Плоскирева (оранжевая) Лактоза +красные |
Отбор колоний малиново-красного цвета цвета для реакции агглютинации с адсорбированной поливалентной ОК-сывороткой (смесью ОК-сывороток). Постановка РА с целью отбора колоний энтеропатогенных кишечных палочек
Название реакции Реакция агглютинации на стекле
ОКВ | Физ.р-р |
Исследуемый материал 3-5 лак+ колоний со среды Эндо
Диагностический препарат поливалентная эшерихиозная сыворотка ОКВ(содержит антитела к антигенам E.coli О20:К84, О26:К60, О55:К59, О111ab:К58)
Результат реакции: положительная, предварительно выделена патогенная E.coli
Колония, культура из которой дает положительную реакцию агглютинации, откалывается на скошенный МПА и/или среду Клиглера.
День
Серотипирование выделенной культуры: Реакция агглютинации на стекле с моновалентными адсорбированными сыворотками, входящими в состав поливалентной сыворотки E.coli
Исследуемый материал чистая культура со среды Клиглера или косяка МПА
Диагностический препарат моновалентные эшерихиозные сыворотки входящие в поливалентную ОКВ:О20:К84; О26:К60; О55:К59; О111ab:К58.
О20:К84 | О26:К60 | О55:К59 | О111ab:К58 | Физ.р-р |
Результат реакции: положительная, предварительно выделена патогенная E.coli О20:К84
Постановка: 1) биохимических тестов для серотипованной культуры Е. соIi ("пестрый" ряд Гисса или планшеты); 2) теста определения чувствительности диско-диффузионым методом на среде Мюллера-Хинтона
День
Учет биохимических свойств Е. соIi в "пестром" ряду Гисса или на планшетах результат должен соответствовать биохимическим свойствам E.coli О20:К84 | |
Определение спектра антибиотикорезистентности выделенной культуры диско-диффузионым методом на среде Мюллера-Хинтона |
ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА ДИЗЕНТЕРИИ
Бактериологический метод
1 день Исследуемый материал испражнения, ректальный мазок со слизистой прямой кишки посев на среды Эндо и Плоскирева или Левина и Плоскирева
2 день
1) Учет характера роста на средах: | 2) Приготовление мазков из лактозонегативных (бесцветных) колоний. Окраска по Граму и микроскопия. | 3) Откол бесцветных колоний колоний на среду Клиглера | |
Эндо (бледно-розовая) | Плоскирева (оранжевая) | ||
3день. Учет биохимических свойств на среде Клиглера
Результат: глюкоза ферментирована с образованием кислоты (К+), лактоза не фементирована, сероводород не образуется
Вывод по первичным биохимическим признакам выделенная культура предварительно является шигеллой
Серотипирование выделенной культуры в реакции агглютинации на стекле Исследуемый материал чистая культура со среды Клиглера Диагностический препарат Поливалентная шигеллезная и видовые шигеллезные кроличьи сыворотки
Поливалентная | Видовые сыворотки к возбудителям | Физ. р-р | |||
шигеллезная сыворотка | S.dysenteriae | S.flexneri | S.boydii | S.sonnei | |
Результат положительная реакция агглютинации с поливалентной шигеллезной сывороткой и видовой шигеллезной сывороткой к шигелле Зоне; Вывод предварительно выделен возбудитель острой дизентерии S.sonnei (сообщение лечащему врачу)
Постановка тестов для определения антибиотикорезистентности, внутривидовое типирование по биохимическим свойствам и антигенной структуре
4 день. Учет результатов.
а) Определение антибиотикорезистентности диско-диффузионым методом на среде Мюллера-Хинтона
б) Биохимическая активность шигелл ("пестрый" ряд Гисса или планшеты)
Вид | лактоза | глюкоза | маннит | мальтоза | сахароза | пептонная вода | |
Н2S | индол | ||||||
S.dysenteriae | К+ | - | + или- | - | - | - или + | |
S. flexneri | К+ | К+ | + или- | - | - | - или + | |
S. boydii | - | К+ | К+ | - | - | - | - или + |
S. sonnei | - или К+ 2сутки) | К+ | К+ | К+ | - или К+(2сут) | - | - |
Заключение: выделенная культура по биохимическим свойствам идентифицирована, как шигелла Зонне
Выдача результатов.