Подсчёт лейкоцитарной формулы в клиническом мазке крови.

1. Техника приготовления мазка крови. Предметные стёкла, на которых будут делаться мазки крови, должны быть хорошо обезжирены и промыты. Перед употреблением их сушат, вынув предварительно из смеси спирт-эфир.

К капле крови прикасаются предметным стеклом так, чтобы оно не касалось пальца. Капля крови переходит на стекло. Для того, чтобы мазок был величиной в ½ - ¾ предметного стекла, капля должна быть диаметром 2-5 мм. Предметное стекло берут в левую руку большим, указательным и средним пальцами так, чтобы капля крови была сверху. Шлифованное стекло, которым будут делать мазок, ставят под углом 30-45⁰ на расстоянии 1-2 мм перед каплей, держа его большим и указательным пальцами правой руки. Шлифованное стекло сдвигают назад так, чтобы оно коснулось капли крови, и капля растекалась в углу между предметным и шлифованным стеклом (движение назад помогает убрать также лишнюю кровь, если капля была слишком большой). Затем быстрым движением руки вперёд делают мазок. Нужно, чтобы при приготовлении мазка большой и указательный пальцы правой руки скользили по краям предметного стекла и создавали необходимую опору для равномерного наложения слоя крови. Шлифованное стекло должно быть уже, чем предметное, чтобы края предметного стекла были свободны от мазка.

2. Окрашивание мазков крови. Приготовленные указанным способом мазки крови подсушивают на воздухе, затем фиксируют с помощью метилового спирта (3-5 мин.), или абсолютного спирта (100%) – 10-15 мин., или ацетона (5 мин.), или спирта 96 (25 мин.). После фиксации и высушивания мазков приступают к их окрашиванию. Обычно применяют метод Романовского-Гимзы. Краситель Романовского-Гимзы состоит из щелочной (азур II) и кислой (эозин) частей. Азур II окрашивает структуры клеток в ярко-синей цвет, а эозин в розово-красный. Щелочные части клеток связываются и окрашиваются кислыми красителями, а кислые – щелочными. Окраску мазков производят по методу Романовского-Гимзы следующим образом. Препарат помещают мазком вниз на две стеклянные палочки, положенные на дно чашки Петри. Краску подливают под препарат. Окрашивают 20-40 мин. Затем мазок промывают под струёй воды, сушат и микроскопируют. При окращивании мазков крови по методу Романовского-Гимзы эритроциты окрашиваются в бледно-розовый цвет, ядра клеток – в сине-фиолетовый, гранулы эозинофилов – в ярко-красный, базофилов – в синий, цитоплазма лимфоцитов и моноцитов – в голубой цвет.

3. Подсчёт лейкоцитарной формулы. Лейкоцитарную формулу подсчитывают в окрашенных мазках крови. Находят 100 лейкоцитов и выражают соотношение отдельных их видов в %.

Подсчёт клеток крови проводится в полях зрения микроскопа по зигзагу, перемещаясь по мазку сверху вниз, слева направо, снизу вверх, слева направо.

Подсчёт лейкоцитов проводится путём заполнения подготовленной сетки с квадратами объёма 10х10 = 100 квадратов. В каждый квадрат вписывается буквенным выражением одна лейкоцитарная клетка. При заполнении всех 100 квадратов, ведётся процентный подсчёт каждой разновидности:

 

 

Результаты подсчёта вписываются в таблицу – лейкоцитарную формулу.

 

Анализ полученного результата.

Необходимо сравнить полученные результаты с нормой лейкоцитов и дать своё заключение.

Занятие №5.

Ткани внутренней среды. Мезенхима. Кровь. Лимфа.

Гемопоэз и его регуляция.

Контрольные вопросы:

1. Мезенхима, её производные (морфофункциональная характеристика, пути развития).

2. Общая характеристика опорно-трофических тканей, их классификация, источники развития, функциональное значение, регенерация.

3. Понятие о системе крови и её тканевых компонентах. Характеристика крови как ткани. Формула крови. Возрастные изменения.

4. Эритроциты, их количество, размеры, форма, строение, химический состав, продолжительность жизни. Ретикулоциты.

5. Кровяные пластинки (тромбоциты), их количество, размеры, строение, функции, продолжительность жизни.

6. Общая морфофункциональная характеристика лейкоцитов. Классификация и особенности строения в зависимости от степени зрелости. Лейкоцитарная формула. Её возрастные особенности.

7.  Зернистые лейкоциты (гранулоциты), их разновидность, количество, размеры, строение и функции, продолжительность жизни.

8. Незернистые лейкоциты (агранулоциты), их разновидность, количество, размеры, функции, продолжительность жизни. Понятие о Т- и В-лимфоцитах.

9. Лимфа.

10. Гемопоэз. Понятие о стволовых и полустволовых клетках, дифферонах. Понятие о жизненном цикле клеток и его этапах. Морфофункциональная характеристика гемопоэтических клеток разной степени зрелости в составе дифферона.

11. Этапы кроветворения в эмбриональном и постэмбриональном периодах развития и их биологическое значение.

12. Взаимоотношение стромальных и кроветворных элементов. Морфофункциональные свойства полипотентной стволовой клетки крови («самоподдержание», «хоминг-эффект» и др.). Способ, позволяющий изучать стволовые клетки крови. Вклад А.А. Максимова в развитие учения о кроветворении.

13. Эритроцитопоэз, тромбоцитопоэз в эмбриональный и постнатальный периоды онтогенеза.

14. Лейкоцитопоэз в эмбриональный и постнатальный периоды онтогенеза.

 

 

Занятие №6.

Соединительные ткани: