Лабораторная работа 1
ПРИГОТОВЛЕНИЕ НЕРВНО-МЫШЕЧНОГО ПРЕПАРАТА ЛЯГУШКИ
Большинство работ по физиологии возбудимых тканей проводится на нервно-мышечном препарате лягушки, отсюда вытекает необходимость овладения методикой и техникой его приготовления. Нервно-мышечный препарат состоит из седалищного нерва с кусочком позвоночника, части бедренной кости и икроножной мышцы с ахилловым сухожилием.
Цель работы: овладеть методикой и техникой приготовления нервно-мышечного препарата лягушки.
Для работы необходимы: лягушка, бинт, набор инструментов для препарирования, раствор Рингера. Исследование проводят на лягушке.
Ход работы
1. Изучите с помощью рис.1 и 2 основные способы обездвиживания лягушки.
Разрушение спинного и головного мозга препаровальной иглой. Возьмите завернутую в бинт лягушку в левую руку спиной вверх так, чтобы большой палец лежал на ее спине. Указательный палец положите на верхнюю челюсть лягушки и наклоните ее голову вниз. В таком положении хорошо видно место расположения затылочной ямки. Через ямку между затылочной костью и позвоночником введите препаровальную иглу в спинномозговой канал и разрушьте спинной мозг. Затем поверните иглу в противоположном направлении, введите ее в полость черепа и разрушьте головной мозг. Общее расслабление мышц лягушки и отсутствие у нее рефлекторных реакций свидетельствуют о полном разрушении спинного и головного мозга.
Рис. 1. Последовательность разрушения головного и спинного мозга препаровальной иглой
Декапитация с последующим разрушением спинного мозга. Возьмите лягушку в левую руку, а правой введите как можно глубже нижнее лезвие ножниц в рот под заднюю часть верхней челюсти. Для разрушения головного мозга быстрым движением отрежьте верхнюю челюсть на уровне заднего конца барабанных перепонок (нижнюю челюсть сохраните). В отверстие спинномозгового канала введите препаровальную иглу и разрушьте спинной мозг.
Рис. 2. Декапитация лягушки
2. Для овладения техникой обездвиживания разрушьте головной и спинной мозг лягушки двумя описанными выше способами: сначала первым, а затем вторым (неважно, что мозг уже разрушен − важно научиться делать перерезки на нужном уровне и вставлять иглу в спинномозговой канал).
3. Изучите с помощью рис. 3 этапы приготовления нервно-мышечного препарата.
После обездвиживания лягушки возьмите ее левой рукой за бедра. В этом положении хорошо выделяется позвоночник. Перережьте позвоночник на 1-1,5 см выше места отхождения тазовых костей (рис. 3, А).
 | |||
| |||
Рис. 3. Последовательные этапы (А-Ж) приготовления
нервно-мышечного препарата лягушки
Свисающую переднюю часть туловища и внутренности удалите. Остаток позвоночника крепко держите пинцетом или левой рукой. Другим пинцетом или пальцами через бинт захватите кожу и снимите ее с лапок (рис. 3, Б). Препарат положите на дощечку и залейте раствором Рингера. Захватите пинцетом или рукой кусочек позвоночника и подогните его вниз так, чтобы лапки висели под углом к позвоночнику и хорошо выделялась копчиковая кость. Осторожно вырежьте копчиковую кость. При этом ножницы держите как можно ближе к кости, чтобы не повредить идущие параллельно с обеих сторон нервы (рис. 3, В). Снова положите препарат на дощечку и разделите его на две половины. Для этого перережьте вдоль сначала кусочек позвоночника, а затем – лобковое сочленение (рис. 3, Г). Одну лапку оставьте в качестве запасной в стаканчике с раствором Рингера и периодически обновляйте раствор для лучшей сохранности тканей. Другую лапку положите на спинную сторону и отделите ножницами подвздошную кость, предварительно захватив пинцетом кусочек позвоночника и отведя нерв в сторону. При помощи двух пинцетов раздвиньте мышцы на спинной стороне поверхности бедра по средней линии (рис. 3, Д). Захватите пинцетом кусочек позвоночника и распрямите нерв, не натягивая его. Осторожно, не касаясь ножницами нерва, отделите его от окружающих тканей вдоль всего бедра. Нерв отведите в сторону и удалите все мышцы с бедренной кости (рис. 3, Е). Перережьте бедренную кость, оставив прилежащую к голени ее часть длиной 1 см. На голени отделите от кости икроножную мышцу, подрезав ахиллово сухожилие, и привяжите к нему нитку. Голень и лапку отрежьте ниже коленного сустава (рис. 3, Ж). Во время приготовления нервно-мышечного препарата необходимо периодически увлажнять его раствором Рингера.
Для закрепления навыков в приготовлении нервно-мышечного препарата можно его приготовить и из другой лапки.
Контрольные вопросы
Какие структуры входят в нервно-мышечный препарат и чем обусловлен этот выбор?
_____________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Для каких целей используют нервно-мышечный препарат?
_____________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________
Подпись преподавателя ______________________
Лабораторная работа 2
