Острого стресса у мышей
| № се-рии | Группа наблюдения, доза препарата (количество животных) | Масса внутренних органов, % к норме | Количество язв в слизистой желудка (Х ± m) | Количество мышей с язвами, % | Выраженность стресс-реакции (балл) | ||
| Селезенки | Тимуса | Надпочечников | |||||
| 1. | Контроль-стресс (12) | 54,4* | 66,1* | 159,8 | 1,2 ± 0,4 | 58* | |
| Экстракт бадана, 5мл/кг (9) | 63,9* | 97,5* | 175,4 | 0,3 ± 0,2 | 22* | ||
| Контроль-стресс (9) | 45,5* | 40,4* | 126,7 | 1,0 ± 0,4 | 56* | ||
| Экстракт бархата, 1 мл/кг (9) | 66,3* | 59,6* | 158,7* | 0,1 ± 0,1 | 11* | ||
| Экстракт бархата, 5 мл/кг (9) | 52,8 | 44,98 | 112,0 | 0,1 ± 0,1 | 11* | ||
| 3. | Контроль-стресс (10) | 62,2 | 64,5* | 76,7 | 1,3 ± 0,7 | 40* | |
| Экстракт календулы, 5 мл/кг (10) | 79,5 | 95,4* | 86,0 | 0,2 ± 0,1 | |||
| Экстракт маклеи, 5 мл/кг (10) | 65,4 | 52,8* | 72,1 | 0,1 ± 0,1 | 10* | ||
| 4. | Контроль-стресс (9) | 45,5* | 40,4* | 126,7 | 1,0 ± 0,4 | 56* | |
| Экстракт левзеи, 1 мл/кг (10) | 61,8* | 39,5 | 128,0 | 0,3 ± 0,2 | |||
| Экстракт левзеи, 5 мл/кг (9) | 47,5 | 46,1 | 118,7 | 0,2 ± 0,1 | |||
| 5. | Контроль-стресс (12) | 54,4* | 66,1* | 159,8 | 1,2 ± 0,4 | 58* | |
| Экстракт леспедеци, 5 мл/кг (10) | 67,9 | 79,6 | 67,6* | 1,0 ± 0,3 | |||
| 6. | Контроль-стресс (9) | 82,5 | 70,0* | 79,5 | 0,7 ± 0,2 | 56* | |
| Экстракт коры и побегов облепихи, 1 мл/кг (9) | 71,7 | 62,8 | 106,8* | 0* | |||
| 7. | Контроль-стресс (10) | 84,9* | 132,1* | 89,7 | 1,7 ± 0,4 | 90* | |
| Экстракт коры облепихи, 5 мл/кг (8) | 109,3 | 96,3 | 98,5 | 0,1 ± 0,1* | 13* | ||
| 8. | Контроль-стресс (10) | 115,2 | 83,1* | 126,7 | 1,6 ± 0,5 | 80* | |
| Экстракт ореха, 1 мл/кг (10) | 123,2 | 76,9 | 108,0 | 0,1 ± 0,1* | 10* | ||
| Экстракт ореха, 5 мл/кг (8) | 96,7 | 122,7 | 0* | 0* | |||
| 9. | Контроль-стресс (9) | 57* | 56* | 6,9 ± 1,6 | 90* | ||
| Экстракт осины, 100 мг/кг (10) | 3,4 ± 1,1 | ||||||
| Экстракт осины 200 мг/кг (10) | 50,1 | 1,7 ± 0,7* | 60* | ||||
| 10. | Контроль-стресс (9) | 63,0* | 105,5 | 137,7* | 0,8 ± 0,1 | 80* | |
| Подорожник, 2,5 мл/кг (10) | 69,3 | 96,8 | 100* | 0,1 ± 0,1* | 10* | ||
| Подорожник, 5 мл/кг (10) | 77,7 | 110,6 | 128,98 | 0,2 ± 0,1* | 20* | ||
| 11. | Контроль-стресс (10) | 90,5* | 78,7* | 84,0* | 0,2 ± 0,2 | ||
| Экстракт чистотела, 1 мл/кг (10) | 100,1 | 77,2 | 76,6 | ||||
| Экстракт чистотела, 5 мл/кг (10) | 90,4 | 56,0* | 87,2 | 0,3 ± 0,2 | |||
| 12. | Контроль-стресс (10) | 89,1* | 64,5* | 138,4* | 1,8 ± 0,6 | 83* | |
| Экстракт шлемника, 1,0 мл/кг (6) | 106,8 | 93,6* | 103,5* | 0* | |||
| Экстракт шлемника, 50 мг/кг (6) | 108,9 | 96,98* | 111,6* | 0* |
Примечание: * – отмечены достоверные изменения показателей: контрольной группы к интактным мышам; опытных групп – к стресс-контролю. Изменения массы внутренних органов в % к норме рассчитаны на мышь массой 20 г.
Введение крысам эпиталамина ослабляло повреждающее влияние стрессорного воздействия на тимус, в то время как в контрольной группе масса этого органа достоверно снижалась (эпиталамин – 301,7±23,7 мг; стресс-контроль – 269,2±21,9 мг; интактные – 353,2±44,8 мг). Кроме того, эпиталамин препятствовал повышению уровня кортизола в плазме крови: его содержание составляло 157 % от нормы, а у стрессированных животных – 571 % (рис. 3). Под влиянием эпиталамина тяжесть повреждения внутренних органов снизилась до 12 баллов против 14 у стресс-контроля.
Рис. 3. Влияние эпиталамина на уровень кортизола в плазме крови
у беспородных крыс, подвергавшихся стрессорному воздействию
(* – изменения достоверны по сравнению с соответствующим контролем)
При изучении препаратов из растений антистрессорное действие обнаружено у 11 из 12 исследованных (препарата подорожника и экстрактов бадана тихоокеанского, бархата амурского, календулы лекарственной, левзеи сафлоровидной, леспедеци двуцветной, облепихи крушиновидной, ореха маньчжурского, осины обыкновенной, чистотела большого, шлемника байкальского). Введение животным перечисленных экстрактов препятствовало повреждению внутренних органов, возникающему в результате подвешивания мышей за шейную складку.
Так, масса селезенки достоверно возрастала под влиянием экстрактов бадана тихоокеанского, бархата амурского, левзеи сафлоровидной (табл. 3). Этот показатель сохранялся на уровне интактных животных при введении экстрактов коры облепихи крушиновидной, шлемника байкальского, а при использовании календулы лекарственной, ореха маньчжурского, препарата подорожника, чистотела большого выявлена тенденция к увеличению массы селезенки.
Снижению массы тимуса в результате стрессорного воздействия препятствовали экстракты бадана тихоокеанского, бархата амурского, календулы лекарственной, ореха маньчжурского, шлемника байкальского (табл. 3). Менее выраженные изменения этого органа наблюдались у мышей, получавших экстракты коры облепихи крушиновидной, осины обыкновенной.
Использование препарата подорожника и экстрактов шлемника байкальского, облепихи крушиновидной способствовало нормализации массы надпочечников у стрессированных животных (табл. 3). Тенденция к сохранению массы этого органа выявлена при использовании экстрактов календулы лекарственной, левзеи сафлоровидной, ореха маньчжурского, осины обыкновенной.
Гастрозащитное действие обнаружено у экстрактов бадана тихоокеанского, бархата амурского, маклеи мелкоплодной, облепихи крушиновидной, ореха маньчжурского, осины обыкновенной, подорожника большого, шлемника байкальского (табл. 3). Эти препараты вызывали снижение числа животных с язвами и количества изъязвлений в слизистой оболочке желудка, в некоторых случаях полностью подавляли процесс язвообразования (экстракты коры и побегов облепихи, ореха маньчжурского, чистотела большого, шлемника байкальского).
Данные, полученные при изучении действия препаратов природного происхождения на метастазирование 3LL и развитие у животных стрессорной реакции, позволили отобрать средства, обладающие антиметастатической и/или антистрессорной активностью, для дальнейшего исследования их влияния на развитие процесса диссеминации при удалении опухолевого узла. Большой интерес представляла группа препаратов, в которую вошли тималин, препарат подорожника и экстракты бадана тихоокеанского, левзеи сафлоровидной, облепихи крушиновидной, шлемника байкальского, существенно подавляющие развитие метастатического процесса и рост опухоли, а также обладающие антистрессорным действием. Основанием для исследования влияния на развитие процесса метастазирования при хирургических вмешательствах эпиталамина и экстрактов леспедеци двуцветной и осины обыкновенной явились их антистрессорные свойства. Кроме того, для дальнейшего изучения были отобраны также экстракт одуванчика лекарственного и глицирам, которые в проведенных ранее экспериментах повышали антиметастатическую активность цитостатика [Амосова Е.Н., Зуева Е.П., Разина Т.Г., Крылова С.Г., 2003], а экстракт одуванчика лекарственного обладает антистрессорной активностью [Рузляева Е.А., 1996].
Исследование действия препаратов природного происхождения на процесс метастазирования при удалении основного опухолевого узла проводили в экспериментах на мышах с 3LL, которую перевивали двумя способами: в подушечку задней лапы или подкожно. Модель хирургического удаления опухоли наиболее адекватно отражает клинические условия, когда у больного в результате операции убирается основной опухолевый узел. Мышей оперировали под эфирным наркозом на фоне уже сформировавшихся метастазов (9-16 сут после перевивки).
Высокую антиметастатическую активность в этих условиях обнаружили препараты полипептидной природы тималин и эпиталамин, а также экстракты бадана тихоокеанского, левзеи сафлоровидной, облепихи крушиновидной, одуванчика лекарственного, осины обыкновенной, препарата подорожника (табл. 4).
Курсовое лечение мышей с перевитой в подушечку задней лапы 3LL тималином, который в дозе 5 мг/кг начинали вводить за 10 сут до операции (9 введений) и продолжали до конца эксперимента (10 введений), приводило к достоверному снижению частоты метастазирования до 15 % против 47 % у оперированных мышей, а ИИМ составлял 62 %.
Введение эпиталамина в дозе 1 мг/кг, начатое за 1 ч до удаления у мышей с 3LL лапы с опухолью, вызывало достоверное уменьшение частоты метастазирования до 9 %, тогда как в контроле этот показатель составлял 56 %, а также массы легких, ИИМ составлял 98 %. В то же время, при удалении опухолевого узла эти показатели изменялись не достоверно (частота метастазирования 27 %).
Тималин и эпиталамин существенно ингибировали процесс метастазирования и в том случае, когда в результате удаления лапы с опухолью наблюдалась стимуляция диссеминации (ИИМ = + 153 %), ИИМ составлял 26 % и 27 % соответственно. Под действием этих препаратов достоверно снижалось число метастатических узлов в легких (контроль – 1,88 ± 0,35; операция – 4,75 ± 1,73; операция + тималин – 1,40 ± 0,24, P < 0,01; операция + эпиталамин – 1,38 ± 0,26, P < 0,01).
Экстракт бадана тихоокеанского в дозе 1 мл/кг при удалении у мышей с 3LL подкожно перевитой опухоли вызывал достоверное снижение частоты метастазирования, ИИМ оказался равен 52 % (табл. 4).
Существенно ингибировал процесс диссеминации у мышей-самок после удаления подкожно перевитой опухоли экстракт левзеи сафлоровидной: метастазы в легких обнаружены только у 55 % животных, тогда как все оперированные мыши, имели метастатическое поражение легких, ИИМ был равен 79% (табл. 4). Под влиянием экстракта левзеи количество метастазов снижалось (в 3,5 раза) и достоверно отличалось от контроля, в то время как операция вызывала увеличение этого показателя (в 1,8 раза). При этом площадь метастатического поражения уменьшилась по сравнению с оперированными животными в 6,7 раза (рис. 4).
Высокая антиметастатическая активность выявлена у экстрактов как из побегов, так и из коры облепихи, а также комплексного препарата, приготовленного из побегов и коры этого растения. Экстракт коры облепихи вызывал у оперированных мышей уменьшение площади метастатического поражения (в 3,1 раза), не изменяя частоты метастазирования и количества метастазов в легких (табл.4). Снижение этого показателя оказалось достоверным (в 4,8 раза) при определении его для имеющих метастазы животных (операция – 24,86 ± 9,98 мм2; операция + облепиха – 5,23 ± 1,63 мм2; P < 0,05). Под влиянием экстракта из побегов облепихи в дозе 200 мг/кг происходило достоверное уменьшение как количества метастазов (в 2,7 раза), так и их площади (в 3,8 раза) по сравнению с соответствующим контролем (табл. 4). Менее эффективным оказался препарат в дозе 100 мг/кг (табл. 4).
Таблица 4
Влияние экстрактов из лекарственных растений на метастазирование
карциномы легких Льюис у мышей после удаления опухолевого узла
| Название препарата | Доза мл или мг/кг | ИИМ (+ стимуляция), % | Частота метастазирования, % | Количество метастатических узлов в легких на одно животное (Х ± m) | |||||
| о | о + п | к | о | о + п | к | о | о + п | ||
| Опухоль перевита в подушечку задней лапы | |||||||||
| Препарат подорожника | 5 мл | 23* | 1,9±0,9 | 0,6±0,4 | 0,3±0,2 | ||||
| +229 | 0,3±0,1 | 0,53±0,17 | |||||||
| Экстракт леспедеци | 5 мл | 0** | 3,9±2,6 | 0,5±0,2 | |||||
| Экстракт шлемника | 5 мл | 0** | 3,9±2,6 | 0,5±0,2 | |||||
| Экстракт коры осины | 100 мг | 56* | 13,2±3,8 | 2,9±1,1* | 2,6±0,8* | ||||
| Экстракт коры облепихи | 100 мг | 56* | 13,2±3,8 | 2,9±1,1* | 3,3±0,8* | ||||
| Опухоль перевита под кожу спины | |||||||||
| Экстракт бадана | 1 мл | 78** | 16,8±3,8 | 12,0±2,2 | 10,4±3,1 | ||||
| Экстракт левзеи | 2,5 мл | 33,7±7,9 | 11,5±3,7* | 4,4±1,9** | |||||
| +137 | 100* | 55** | 9,8±2,6 | 17,4±11,9 | 2,8±1,0* | ||||
| Экстракт леспедеци | 5 мл | 21,5±7,6 | 4,9±1,2 | 8,9±1,9 | |||||
| Экстракт одуванчика | 100 мг | 35,1±7,0 | 22,2±7,2 | 19,5±5,4* | |||||
| 200 мг | 57* | 16,8±7,4 | 6,5±1,8 | 1,7±0,8** | |||||
| Экстракт коры осины | 1мл | 53* | 9,5±2,8 | 6,7±1,9 | 2,5±1,2** | ||||
| 5 мл | 9,5±2,8 | 6,7±1,9 | 5,8±1,6 | ||||||
| Экстракт побегов облепихи | 100 мг | 60* | 5,1±0,9 | 3,8±1,6 | 3,6±2,2* | ||||
| 200 мг | +17 | 15,0±4,5 | 17,5±4,9 | 6,4±2,2** | |||||
| Экстракт побегов и коры облепихи | 1 мл | +18 | 21,7±3,5 | 25,6±5,3 | 6,3±2,3** | ||||
| Экстракт шлемника | 50 мг | 86* | 9,7±1,8 | 7,4±1,3 | 4,1±0,8** | ||||
| 100мг | 9,7±1,8 | 7,4±1,3 | 4,6±0,9** | ||||||
| Экстракт шлемника | 1 мл | +63 | 58* | 93** | 10,7±0,8 | 4,1±1,4* | 18,7±3,9** | ||
| 5 мл | +21 | 7,8±2,0 | 8,4±2,3 | 6,3±1,2 | |||||
| Глицирам | 25 мг | 52,4±7,1 | 29,1±8,2* | 14,2±3,6* |
Примечание: здесь и на рис. 4 к – контрольная группа; о – группа мышей, у которых удаляли опухолевый узел; о + п – группа оперированных животных, получавших экстракт из растений. * - Р< 0,05 по сравнению с животными контрольной группы; ** Р< 0,05 по сравнению с группой оперированных животных.
Значительной антиметастатической активностью при хирургическом удалении опухоли обладал комплексный препарат облепихи. У мышей, получавших экстракт, обнаружено значительное снижение числа метастатических узлов и их площади по сравнению с оперированными (в 4,1 и 10,4 раза соответственно), ИИМ составлял 74 % (табл. 4, рис. 4). При этом масса легких и масса метастазов оказалась в 1,4 и 20,8 раза меньше, чем соответствующие показатели у оперированных животных, ТМ составляло 89 %, тогда как у нелеченых мышей после операции выявлена стимуляция метастазирования (+121 %). У большинства животных, которым вводили комплексный препарат, встречалась 1 степень поражения легких метастазами (78 %), в то время как 75 % оперированных имели 2 – степень, а у 12,5 % мышей выявлена 3 степень поражения. Наряду с антиметастатическим экстракт оказывал противорецидивное действие: число мышей с рецидивами снижалось до 38 % мышей против 78 % в группе с удаленной опухолью (Р < 0,05).
- Контроль - Операция - Операция + препарат
Рис. 4. Влияние препаратов растительного происхождения на площадь
метастатического поражения легких у мышей с карциномой
легких Льюис после удаления опухолевого узла
(* – достоверные изменения по сравнению с контролем; ** – с оперированными мышами)
Введение экстракта одуванчика лекарственного в дозе 200 мг/кг мышам с удаленной опухолью вызывало достоверное снижение частоты метастазирования до 57 % против 100 % в группе оперированных, причем все животные имели метастатическое поражение 1 степени тяжести (операция – 25 % мышей со 2 степенью). В то же время, в легких у этих мышей метастазов обнаружено достоверно меньше (в 3,8 раза), чем в оперированном контроле, уменьшалась и площадь метастатического поражения, а ИИМ составил 93 % (табл. 4, рис. 4). При снижении дозы экстракта до 100 мг/кг отмечено снижение числа животных с 3 степенью поражения до 17 %, а в группе нелеченых мышей с удаленной опухолью – 58 %. Следует отметить, что в результате введения экстракта одуванчика в дозе 200 мг/кг количество мышей с рецидивами достоверно уменьшилось до 31 % против 67 % в соответствующем контроле.
Лечение мышей экстрактом осины обыкновенной в дозе 1 мл/кг существенно ингибировало метастатический процесс, ИИМ составлял 83 % против 35% в оперированном контроле. При этом наблюдалось снижение числа метастатических узлов в легких в 2,7 раза, а также тенденция к уменьшению их площади по сравнению оперированными животными (табл.4, рис. 4). О наличии у экстракта антиметастатического действия свидетельствовало и достоверное снижение массы легких (операция – 192,2 ± 14,9 мг; операция + осина – 152,5 ± 4,9 мг; Р < 0,05), ТМ составило 84 %. Менее эффективным оказался препаратов дозе 5 мл/кг. Введение оперированным мышам сухого экстракта осины не оказывало влияния на развитие метастатического процесса (табл.4).
Введение мышам после ампутации лапы с опухолью препарата подорожника приводило к достоверному уменьшению числа животных с метастазами по сравнению с неоперированными. Кроме того, в этой группе отмечена тенденция к снижению как количества метастатических узлов, так и их площади, ИИМ составил 94 %. Антиметастатическое действие препарата оказалось еще более выраженным в том случае, когда препарат подорожника вводили в течение 10 сут до операции, метастазов у этих мышей не обнаружено, тогда как удаление лапы с опухолью стимулировало процесс диссеминации (табл. 4).
Выраженное антиметастатическое действие при введении мышам с удаленной опухолью оказывал глицирам, ИИМ составлял 75 % против 44 % в группе оперированных. У этих животных достоверно уменьшилось количество метастазов (в 2 раза) и их площадь (в 4,6 раза) по сравнению с оперированным контролем (табл. 4, рис. 4), а также масса легких и масса метастазов в 1,4 и 2,4 раза соответственно, ТМ составляло 63 % (оперированные – 10 %).
Исследуемые препараты оказывали антиметастатическое действие при курсовом введении, с началом лечения за 1 час до удаления опухолевого узла. При профилактическом назначении растительных средств (введение за несколько сут до операции) на примере экстрактов осины обыкновенной, облепихи крушиновидной и препарата подорожника обнаружено, что они ингибируют распространение и рост метастазов у оперированных мышей, как при профилактическом использовании, так и при введении за 1 час до операции.
Неоднозначные данные получены при изучении влияния экстрактов леспедеци двуцветной и шлемника байкальского на процесс метастазирования при удалении первичного опухолевого узла. Так, у мышей с 3LL, перевитой в подушечку задней лапы, эти экстракты в дозе 5 мл/кг полностью подавляли процесс метастазирования (табл. 4). При введении экстракта леспедеци в дозе 5 мл/кг мышам после удаления подкожно перевитой 3LL влияния препарата на процесс метастазирования не обнаружено (табл. 4), а при использовании меньшей дозы 1 мл/кг отмечено его стимулирующее действие на диссеминацию опухоли. Выявлено, что сухой экстракт шлемника обладает антиметастатической активностью, вызывая подавление процесса диссеминации у мышей после удаления опухоли перевитой подкожно, причем антиметастатическое действие оказалось выше при использовании препарата в дозе 50 мг/кг. У экстракта в дозе 5 мл/кг обнаружено существенное противометастатическое действие при введении его мышам с опухолью перевитой в подушечку задней лапы, у животных с подкожно перевитой опухолью лечение экстрактом в дозе 1 мл/кг, напротив, стимулировало процесс метастазирования.
У глицирама, экстрактов одуванчика и коры и побегов облепихи наряду с антиметастатической активностью обнаружено антирецидивное действие, сочетание этих свойств представляет большой интерес. Следует отметить, что глицирам и экстракт коры осины, не оказавшие влияния на развитие 3LL, но повышающие антиметастатическую активность циклофосфана, ингибировали процесс диссеминации при удалении опухолевого узла.
Для оценки роли стресса в метастазировании опухоли и исследования действия на этот процесс препаратов природного происхождения использовали модель «пробной лапаротомии». Операцию проводили в опытах на крысах с перевитой подкожно LS-Плисса. В качестве средств, ослабляющих стрессорное воздействие на организм, использовали тималин, эпиталамин и препарат подорожника. Проведение «пробной лапаротомии» в большинстве случаев приводило к стимуляции процесса метастазирования у крыс с LS-Плисса. Тималин и препарат подорожника при их введении в условиях операционного стресса не оказывали влияния на рост опухолевого узла, однако подавляли распространение и рост метастазов, вызывая снижение количества животных с метастазами и массы подмышечных лимфатических узлов, в которые преимущественно метастазировала опухоль (рис. 5).
 | |||
| |||
- Контроль - Операция - Операция + препарат
Рис. 5. Влияние препаратов природного происхождения на метастазирование
лимфосаркомы Плисса у крыс после операции «пробная лапаротомия»
(* – изменения достоверны по сравнению с контролем; ** – с оперированными крысами)
Эпиталамин не только ингибировал развитие метастазов у оперированных крыс с LS-Плисса, но и подавлял рост опухолевого узла (ТРО = 35-45 %). Антиметастатическое действие препарата подорожника оказалось более выраженным в том случае, когда операция вызывала стимуляцию метастатического процесса (рис. 5).
Влияния эпиталамина и препарата подорожника на рост и метастазирование LS-Плисса у неоперированных крыс с не обнаружено, а тималин ингибировал процесс диссеминации (частота метастазирования в лимфоузлы: контроль – 86 %; тималин – 38 % Р < 0,05).
Известно, что в процессе развития метастазирующих опухолей у животных происходят фазные изменения в нервной и эндокринной системах: на ранних этапах роста опухоли наблюдается активация гипофизарно-надпочечниковой и симпатоадреналовой систем, что может стимулировать процесс метастазирования опухолевых клеток. В период, предшествующий появлению метастазов, отмечается стабилизация нейрогормональных показателей [Балицкий К.П. и др., 1991]. В поздние сроки, когда опухоль достигает больших размеров и начинает некротизироваться, вызывая интоксикацию организма, бурно развиваются метастазы, наблюдается спад нейрогормональной активности. Среди факторов, способных вызвать эндокринный дисбаланс, в первую очередь следует назвать стрессорные нагрузки [Першин С.Б. и др., 1985; Шапот В.С., Шелепов В.П., 1983]. Известно, что хирургическое удаление опухоли и эмоционально-болевой стресс, оказывая существенное влияние на нейрогуморальный статус организма, могут стимулировать процесс метастазирования [Балицкий К.П., Шмалько Ю.П., 1987].
В наших исследованиях для оценки влияния тималина, эпиталамина и препарата подорожника на функциональную активность надпочечников у оперированных крыс с LS-Плисса определяли содержание 11-оксикортикосте-роидов в плазме крови.
Данные экспериментов показали, что развитие опухолевого процесса может вызывать у животных, как повышение (209 % от нормы), так и снижение (65 % от нормы) содержания 11-ОКС, что свидетельствовало о различном функциональном состоянии коры надпочечников.
Операционное воздействие вызывало у животных с опухолью подъём 11-ОКС: через сутки после проведения «пробной лапаротомии» отмечался максимальный подъём гормонов, по сравнению с контрольной группой их содержание достоверно возросло в 1,5 раза и значительно (в 2,2 раза) превышало значения этого показателя у здоровых крыс. Повышение по сравнению со здоровыми животными уровня 11-ОКС в крови контрольных и оперированных крыс на 46 % и 117 % соответственно сопровождалось достоверным увеличением массы подмышечных лимфатических узлов в конце опыта (рис. 6).
Показана прямая корреляционная связь между уровнем 11-ОКС через сутки после операции и массой лимфоузлов в конце опыта: коэффициент корреляции составлял в контрольной группе r =+ 0,056; в группе оперированных крыс – r = + 0,477.
%
Контроль Операция Операция + Операция +
Эпиталамин подорожник
- Масса подмышечных лимфоузлов - Содержание 11-ОКС
Рис. 6. Масса подмышечных лимфоузлов и содержание 11-ОКС в плазме крови крыс линии Wistar с лимфосаркомой Плисса в условиях операционного стресса под действием эпиталамина и препарата подорожника (через сут после операции)
(* – достоверны изменения по сравнению с соответствующим контролем)
В конце эксперимента (на 19 – 22 сут после перевивки) различий в концентрации гормонов у оперированных животных и крыс с опухолью, не подвергавшихся стрессорному воздействию, не обнаружено. В то же время, тималин, эпиталамин и препарат подорожника при введении их оперированным крысам с опухолью оказывали регулирующее действие на функциональное состояние надпочечников, о чем свидетельствовала нормализация содержания 11-ОКС в плазме крови (рис. 6, 7). Следует отметить, что введение исследуемых препаратов животным с опухолью, не подвергавшимся стрессорному воздействию, не влияло на содержание гормонов.
Результаты исследования показали, что тималин, эпиталамин и препарат подорожника, обладающие антистрессорной активностью, оказывают регулирующее влияние на гипофизадреналовую систему у крыс с LS-Плисса в условиях операционного стресса, что сопровождается подавлением метастатического процесса (рис. 5,6, 7).
В настоящее время препараты пептидной природы считают универсальными регуляторами при нейроиммуноэндокринных нарушениях. Они обладают широким спектром биологического действия и оказывают модулирующее влияние на процессы развития и функции организма, координируя процессы биосинтеза в клетках путем воздействия на экспрессию генов [Хавинсон В.Х., Малинин В.В., 2006]. Эти препараты снижают скорость накопления патологических изменений (повреждения ДНК, мутации, опухолевая трансформация) и повышают активность репаративных процессов.
%
Здоровые
крысы
Контроль Операция Операция + тималин
- масса подмышечных лимфоузлов - содержание 11-ОКС
Рис. 7. Масса подмышечных лимфоузлов и содержание 11-ОКС в плазме крови крыс линии Wistar с лимфосаркомой Плисса под действием тималина в условиях операционного стресса (в конце опыта)
(* – достоверные изменения массы подмышечных лимфоузлов и 11-ОКС по сравнению с соответствующим контролем)
Наличие любого злокачественного новообразования вызывает у больного высокое психоэмоциональное напряжение и депрессию. Накоплен большой материал о том, что стресс и психосоциальное состояние оказывает отрицательное влияние на функциональное состояние иммуной системы [Рабсон А. И др., 2006; Miller A.H. et al., 1991; Penninx B.W. et al., 1998]. Полагают, что существенное влияние на депрессию и тревогу оказывает гормон боли, представляющий собой нейропептид, который связывается с клеточными нейрокин-1 рецепторами и активно действует как в головном мозге, так и на периферии [Гариб В.Ф., 2004]. Широко исследуются различные обезболивающие средства, в эксперименте изучается их влияние на развитие опухолевого процесса [Бруслова К.М. и др., 2003; Бесова Н.С. и др., 2004; Lennernäs B. et al., 2005]. При сравнительном изучении анальгетиков различной природы (анальгин, промедол, омнопон) на рост и гематогенное метастазирование саркомы 37 показано, что 3-кратное введение препаратов в условиях хирургической травмы предупреждает её стимулирующее влияние на рост опухоли, а многократное – стимулировало гематогенное метастазирование [Беляев Д.Г. и др., 1985]. В связи с этим представляла интерес оценка влияния экстрактов из растений на развитие у мышей болевой реакции.
Данные экспериментов показали, что экстракт бадана тихоокеанского, облепихи крушиновидной и осины обыкновенной обладают анальгетической активностью (рис. 8). Введение этих экстрактов мышам снижало чувствительность животных к боли, о чем свидетельствовало уменьшение количества «корчей», вызванных уксусной кислотой. У 25 % животных, которые получали экстракт левзеи сафлоровидной в дозе 1 мл/кг, болевой реакции не отмечено. Экстракт леспедеци двуцветной в дозе 5 мл/кг достоверно увеличивал латентное время до возникновения «корчей», кроме того, наблюдалась тенденция к уменьшению их количества.
Осина 100 мг/кг
Облепиха 1 мл/кг
Леспедеца 1 мл/кг
Левзея 1 мл/кг
Бадан 1 мл/кг
Снижение болевой чувствительности, %
Рис. 8. Влияние экстрактов из растений на болевую чувствительность
мышей (* – изменения достоверны по сравнению с контролем)
Следует отметить, что эффективность обезболивающего действия экстрактов облепихи крушиновидной и осины обыкновенной оказалось сопоставимо с таковой у индометацина, который использовали в качестве препарата сравнения. Этот препарат применяется в онкологической практике как обезболивающее и противовоспалительное средство. Кроме того, экспериментальные исследования показали, что индометацин ингибирует пролиферацию опухолевых клеток за счет угнетения ангиогенеза [Wan Hong-mei, 2004].
Обезболивающая активность экстрактов бадана тихоокеанского, облепихи крушиновидной и осины обыкновенной, по-видимому, связана с наличием в этих растениях дубильных веществ, полифенолов, обладающих противовоспалительными свойствами и подавляющих высвобождение гистамина, кининов, простагландинов [Максютина Н.П., 1985; Крылова С.Г.]. Экстракт облепихи содержит алкалоиды. Как известно, многие вещества этой группы обладают анальгетической активностью. Свойство растительных препаратов снижать болевую чувствительности при удалении опухоли может ослаблять силу стрессорного воздействия операции на организм. К.П. Балицким и Ю.П. Шмалько (1987) установлена высокая степень корреляции между чувствительностью животных к боли и выраженностью стрессорных реакций в послеоперационный период и интенсивностью метастазирования.
Стимулирующее влияние стресса на развитие метастатического процесса реализуется, в том числе, через системы, обеспечивающие неспецифическую противоопухолевую резистентность. Особое значение при этом имеет влияние стрессирующих факторов на функциональную активность иммунокомпетентных клеток [Балицкий К.П., Шмалько Ю.П., 1987]. Комплексное действие повреждающих факторов, таких, как операция, кровопотеря, общая анестезия оказывает неблагоприятное влияние на иммунную систему [Булава Г.В. и др., 2002]. Послеоперационные иммунные сдвиги по степени выраженности коррелируют с тяжестью операционной травмы и длительное время сохраняются, вызывая вторичные иммунодефициты и возникновение хронических инфекционно-воспалительных процессов [Китиашвили И.З. и др., 2005].
Иммунодепрессия и опухолевая прогрессия у больных со злокачественными новообразованиями связана с нейрогуморальными и метаболическими изменениями, развивающимися в организме. Уже на ранних этапах злокачественной трансформации метаболиты, синтезируемые опухолью, вызывают снижение активности Th1 лифоцитов и активируют Th2 лимфоциты, макрофаги и секрецию интерлейкина-1 фактора, некроза опухолей (TNFα). Известно, что интерлейкин-1 может проникать через гематоэнцефалических барьер, стимулируя секрецию кортикотропин-релизинг гормона (КРГ), который увеличивает в гипофизе синтез адренокортикотропного гормона (АКТГ), что, в свою очередь, вызывает в надпочечниках выработку глюкокортикоидных гормонов. Всё это приводит усилению воздействия стрессорных факторов на организм и существенно ингибирует экспрессию интерлейкиновых генов, что препятствует активации иммунной системы. Повышение уровня глюкокортикоидов вызывает снижение числа Т- и В-лимфоцитов, моноцитов, эозинофилов и базофилов, а также ограничивает у макрофагов способность к фагоцитоцу и киллингу трансформированных клеток [Антонов В.Г., Козлов В.К., 2004].
Учитывая перечисленные выше факты, представляло интерес изучение влияния препаратов природного происхождения на функциональную активность иммунокомпетентных клеток. Состояние клеток лимфоузлов исследовали с помощью теста нейтрализации опухолевых клеток [Winn H.J., 1961]. Этот метод позволяет оценить активность иммунокомпетентных клеток, поскольку в лимфатических узлах представлены популяции Т- и В-лимфоцитов, макрофаги. Тестируемые клетки получали от леченных исследуемыми препаратами мышей с 3LL и перевивали животным-реципиентам смесь лифоидных и опухолевых клеток в соотношении 10: 1. Активность клеток оценивали по их способности ингибировать рост и метастазирование 3LL.
Клетки лимфоузлов, полученные от мышей, леченных препаратами природного происхождения, при их совместном введении с опухолевыми клетками вызывали существенное торможение метастатического процесса, о чем свидетельствовало снижение частоты метастазирования и количества метастазов по сравнению с мышами, которым опухолевые клетки вводили вместе с клетками лимфоузлов от животных-доноров с 3LL (рис. 9). В группе, которой вводили клетки лимфоузлов от мышей, леченных тималином, ИИМ составил 94 %. При использовании клеток лимфоузлов животных-доноров, получавших препарат подорожника или экстракт шлемника байкальского, ИИМ составлял 99 %. Клетки лимфоузлов от мышей, получавших экстракт шлемника, достоверно тормозили рост первичного опухолевого узла: масса опухоли снизилась в 9,0 раз по сравнению с контролем (ТРО – 89 %).
- 1 - 2 - 3
Рис. 9. Влияние препаратов природного происхождения на функциональную
активность клеток лимфоузлов мышей линии С57Вl/6 с карциномой легких Льюис в тесте нейтрализации опухолевых клеток Винна
(1 –опухолевые клетки; 2 – опухолевые клетки + клетки лимфоузлов от мышей с 3LL; 3 – опухолевые клетки + клетки лимфоузлов леченных мышей; * – изменения достоверны по сравнению с 1 группой; ** – со 2 группой)
Основной функцией естественных клеток-киллеров (ЕКК) является уничтожение опухолевых клеток [Чекменев С.Б., 1999; Фрейдлин И.С., 2000]. Накоплено много фактов о снижение цитотоксической активности ЕКК у больных со злокачественными опухолями [Билынский Б.Т. 1991; Сорокин А.А., 2003; Эллиниди В.П. и др., 2005; Carson W.T. et al., 2001; Eremin O. et al., 2001; Paholyuk T.D. et al., 2004]. Доказанным является и то, что повышение в результате стрессорной реакции уровня кортикостероидов вызывает подавление активности ЕКК [Антонов В.Г., Козлов В.К., 2004].
Оценка влияния экстракта коры и побегов облепихи на функциональную активность ЕКК показала, что однократное введение препарата вызывает у здоровых животных повышение цитотоксической активности ЕКК селезенки [Стахеева М.Н. и др. 1994].
Обнаружено, что тималин, препарат подорожника и экстракт облепихи оказывают иммуномодулирующее действие на ЕКК селезенки при их введении мышам с 3LL.
В результате лечения препаратом подорожника мышей с 3LL цитотоксическая активность ЕКК селезенки на 18 сут после перевивки существенно повышалась: индекс цитотоксичности (ИЦ) достоверно увеличился как при соотношении эффекторов и мишеней 50: 1 (в 1,4 раза), так при соотношении 25: 1 и (в 1,6 раза) по сравнению с интактными животными, тогда как у мышей с опухолями этот показатель не изменялся. При введении тималина мышам с опухолью наблюдалась тенденция к увеличению ИЦ на 18 сут после транстлантации опухолевых клеток. Рост опухоли сопровождался достоверным увеличением клеточности селезенки. Способность ЕКК лизировать клетки-мишени, выраженная в литических единицах (ЛЕ), у получавших подорожник и тималин мышей достоверно возросла по сравнению с контролем в 2,3 и 2,5 раза соответственно и составляла 650 % и 709 % по отношению к здоровым животным против 286 % у мышей с 3LL. Иная картина наблюдалась на 24 сут опыта: в контрольной группе индекс цитотоксичности достоверно увеличился при соотношении эффекторов и мишеней в соотношении 100: 1, кроме того, у животных с опухолью возрастала клеточность селезенки (в 1,6 раза). Лечение препаратом подорожника и тималином вызывало статистически значимое снижение индекса цитотоксичности ЕКК по сравнению с нелеченым контролем, значения этого показателя при соотношении эффекторов и мишеней 100: 1 составляло от уровня интактных мышей 79 % и 86 % соответственно, тогда как у животных с 3LL – 138 %. Аналогичная картина наблюдалась и при соотношении эффекторов и мишеней 50: 1 и 25: 1.
Экстракт коры и побегов облепихи оказывал модулирующее действие на цитотоксическую активность ЕКК у мышей с 3LL, а также при введении его здоровым животным, подвергавшимся хирургическому воздействию “пробная лапаротомия”. Введение экстракта облепихи оперированным мышам препятствовало снижению активности ЕКК через сутки после хирургического вмешательства: этот показатель в ЛЕ на селезенку составлял 79 % от нормы против 49 % в группе оперированных. У животных с 3LL на 15 сут после перевивки наблюдалась значительное повышение цитотоксической активности ЕКК, которая составляла 537 % от нормы, к 22 сут этот показатель снизился до 8 %. В то же время, у мышей, которым вводили экстракт облепихи, менее выраженным оказалось как повышение активности ЕКК на 15 сутки (347 % от нормы), так и снижение этого показателя на 22 сут (25 % от нормы).
В экспериментах на мышах с 3LL обнаружено, что экстракт шлемника байкальского на фоне цитостатической терапии оказывает модулирующее влияние на функциональную активность ЕКК, макрофагов и продукцию цитокинов у животных, а также стимулирует гуморальный иммунитет [Шерстобоев Е.Ю. и др., 2004; Капля О.А. и др., 2004].
Данные наших исследований, а также результаты работы Стахеевой М.Н. (1993) показали, что цитотоксичность ЕКК селезенки в процессе развития у мышей 3LL изменяется. Так, на ранних этапах опухолевого роста активность этих клеток снижалась, к 15-м сут отмечена их активация, которая однако не приводила к ингибиции опухоли, в поздние сроки (22-24 сут) выявлено истощение функциональных возможностей ЕКК [Стахеева М.Н., 1993]. Н.Н. Беляевым с соавт. (2003) обнаружено, что в процессе роста опухоли в популяции мононуклеаров селезенки при снижении естественной киллерной активности происходит повышение спонтанной супрессорной активности, причем выявлены 2 субпопуляции ЕКК, взаимоотношения между которыми требуют дальнейших исследований.
Проявления иммунодепрессии при развитии новообразования различно на разных этапах опухолевого роста. На начальных стадиях важную роль имеют нарушения экспрессии антигенов (МНС I и II классов), костимулирующих молекул на дендритных клетках и несостоятельность антигенраспознающих рецепторов на Т-хелперах. На поздних сроках опухолевого процесса происходит снижение количественных и качественных показателей клеточного иммунитета (Т-лимфоциты, NK-клетки, цитотоксические моноциты и LAK-клетки) [Антонов В.Г., Козлов В.Л., 2004].
Как показали исследования, проведенные ранее на животных с перевиваемыми опухолями, тималин, препарат подорожника, экстракт шлемника байкальского увеличивали функциональную активность нейтрофилов. Наряду с существенным повышением эффективности цитостатической терапии, эти препараты ослабляли ее иммунодепрессивное действие [Амосова и др., 1987; Гольдберг Е.Д., Зуева Е.П., 2000].
Таким образом, тималин, препарат подорожника и экстракты коры и побегов облепихи и шлемника байкальского оказывают модулирующее воздействие на функциональную активность иммунокомпетентных клеток, причем изменение активности этих клеток сопровождается повышением противоопухолевой резистентности организма, о чем свидетельствует подавление процесса метастазирования.
Известно, что препараты солодки оказывают иммуномодулирующее действие: увеличивают пролиферативную активность спленоцитов, повышают образование цитотоксических Т-лимфоцитов в селезенке и цитотоксическую активность перитонеальных макрофагов, ослабляют иммунодепрессию, вызванную цитостатиками [Сергеев А.В. и др., 2004, 2006]. В 60-х годах предпринимались попытки исследования действия тритерпеновых соединений из солодки голой на рост ряда перевиваемых опухолей мышей и крыс, при этом отмечено подавление развития асцитной гепатомы Зайдела, саркомы 37, опухоли Эрлиха [Шварев И.Ф. и др., 1966]. О наличии у солодки антибластомной активности свидетельствуют также данные других авторов [Павлова С.И. и др., 2003; Толстиков Г.А., 2007].
Глицирам, полученный из солодки, представляет собой моноаммонийную соль глицирризиновой кислоты. Этот препарат увеличивает фагоцитарную активность. Существуют данные о том, что глицирам уменьшает сосудистую проницаемость, и это свойство препарата может оказывать существенное влияние на процесс диссеминации. В экспериментах на иммунодепрессивных мышах обнаружено, что глицирризиновая кислота активирует макрофаги, нормальные киллеры, Т-лимфоциты и моноциты. Она стимулирует образование интерферона-γ, интерлейкина-2 и 12. У облученных животных гицирризин и глицирризиновая кислота стимулируют восстановление селезенки и тимуса и оказывают модулирующее действие на клеточный иммунитет. Показано, что глицирризиновая кислота и её препараты в малых дозах оказывают иммуностимулирующее действие, а в больших – иммунодепрессивное. У пациентов, получающих кортикостероидную терапию, предварительное введение этой кислоты нормализует состояние системы иммунитета. Внутривенное введение добровольцам глицирризиновой кислоты вызывало повышение уровня интерферона (на 45%) и количества нормальных киллеров (на 75 %) [Толстиков Г.А., 2007].
Литературные данные свидетельствует о наличии иммуномодулирующего действия у тритерпенов и полисахаридов растительного происхождения, причем в том случае, когда последние находятся в комплексе с флавоноидами, их активность возрастает [Бакуридзе А.Д. и др., 1993; Ильичева Т.Н. и др., 2001; Белоногова В.Д., 2003; Сергеев А.В., 2007]. Результаты работы Разиной Т.Г. (2006) показали, что полисахариды из растений ингибируют развитие опухолевого процесса у мышей с 3LL. Считают, что растительные полисахариды, обладающие иммуномодулирующей и противоопухолевой активностью, могут быть использованы для химиопрофилактики рака [Сергеев А.В., 2007]. Существуют данные о том, что подорожник индуцирует выработку интерферона и интерлейкина [Вершинина С.Ф., Потявина Е.В., 2003].
Иммуностимулирующее действие на клеточный и гуморальный иммунитет выявлено у экдистероидсодержащих растений, к которым относится левзея сафлоровидная [Тренин Д.С. и др., 1996; Ивановский А.А., 2000].
Известно, что важную роль в процессе диссеминации имеет комплекс нарушений в регуляции свертывающей системы крови. Обнаружено, что в процессе развития лимфосаркомы Плисса у крыс отмечаются нарушения тромбоцитарного гемостаза, проявляющиеся как в понижении, так и в повышении агрегационной активности тромбоцитов. Выявлена прямая корреляционная зависимость между показателями функциональной активности тромбоцитов и тяжестью метастатического поражения. Экстракт шлемника байкальского наряду с противоопухолевой и антиметастатической активностью оказывает нормализующее действие на измененные показатели тромбоцитарного гемостаза [Разина Т.Г., 1989].
Секретируемые опухолевыми клетками факторы оказывают депрессивное действие на красный кровяной росток, что приводит к снижению числа эритроцитов. Кроме того, у этих клеток снижается способность к переносу кислорода в количестве, оптимальном для нормальных тканей, что обусловлено связыванием с мембраной эритроцитов опухолевых антигенов и атакой на них цитотоксических клеток. В связи со снижением числа и функциональных возможностей эритроцитов нормальные ткани получают меньше кислорода. Гипоксия приводит, с одной стороны, к увеличению потребления глюкозы нормальными клетками, а с другой, к повышению продукции катехоламинов и глюкокортикоидов. Воздействие этих гормонов на метаболизм вызывает увеличение в крови содержания неэтерифицированных жирных кислот (НЭЖК) и глюкозы, что ухудшает её транспортные и реологические свойства [Антонов В.Г., Козлов В.К., 2004].
Экспериментально доказано, что фитоэкдистероиды оказывают стимулирующее действие на эритропоэз и способствуют ускорению процессов восстановления красной крови при гемотоксической фенилгидразировой анемии [Сыров В.Н., 1997]. Исследования Алиева О.И. (2004) показали, что экдистероид- и флавоноидсодержание растения ограничивают развитие синдрома повышенной вязкости крови у животных с сердечно-сосудистой патологией, воздействуя на клеточные и плазменные факторы, определяющие вязкостные свойства крови. Содержащий экдистероиды экстракт левзеи сафлоровидной, оказывает влияние на липидный состав мембран эритроцитов и препятствует их деградации. Под действием препарата в меньшей степени снижаются как общие липиды, так и фосфолипидная фракция [Плотников М.Б. и др., 1999; Алиев О.И., 2004]. Можно полагать, что растения, содержащие экдистероиды и флавоноиды, нормализуют транспортные и реологические свойства крови.
Операционная травма, кровопотеря и сопровождающая её гипоксия являются мощными стрессорными факторами. Как известно, в адаптации организма к этим воздействиям участвует система крови [Гольдберг Е.Д. и др., 2000, 2006; Юшков Б.Г., 2006]. Кроме того, при лечении больных со злокачественными новообразованиями используют комплексные методы лечения, включающие, наряду с удалением опухоли, химиотерапию. Большинство цитостатиков оказывает существенное влияние на кроветворение, подавляя клетки-предшественники гемопоэза, что вызывает развитие лейкопении, тромбоцитопении, анемии [Гершанович М.Л., 1982; Константинова М.М., 2002]. В связи с этим, представляется важным то, что тималин, глицирам, препарат подорожника, экстракты шлемника байкальского, левзеи сафлоровидной, одуванчика лекарственного не только повышают эффективность химиотерапии, но и препятствуют развитию лейкопении при введении цитостатиков [Амосова Е.Н. и др., 1987, 1991, 1994, 2003; Гольдберг Е.Д., Зуева Е.П., 2000; Разина Т.Г. и др., 1998, 1999].
Экстракт шлемника байкальского стимулирует функциональную активность кроветворных клеток-предшественников эритро- и грануломоноцитопоэза при гипоплазии, вызванной у животных введением цитостатиков. Этот препарат повышает продукцию короткодистантных гуморальных регуляторов клеточными элементами микроокружения. Клинические исследования показали, что применение экстракта шлемника у больных раком легкого, получающих химиотерапию, вызывало значительное повышение абсолютного числа эритроцитов, ретикулоцитов, нейтрофильных гранулоцитов, моноцитов и лимфоцитов в крови, а также содержание циркулирующих клеток-предшественников эритро- и грануломоноцитопоэза [Гольдберг Е.Д., Дыгай АМ., Литвиненко В.И. и др., 1994]. Установлено также, что экстракт препятствует снижению относительного числа Т-лимфоцитов и повышает содержание Т-хелперов [Матяш Г.М., 1996].
Введение мышам глицирама стимулирует процессы восстановления костномозгового гранулоцитопоэза и, в меньшей степени, других ростков гемопоэза в условиях гемодепрессий, вызванных различными по механизму действия цитостатическими препаратами [Дыгай А.М., Жданов В.В., Хлусов И.А. и др., 1995; Жданов В.В. и др., 1996, 1997].
Вероятно, повышение противоопухолевой резистентности организма под действием растительных препаратов может быть связано с антиоксидантной активностью входящих в их состав флавоноидов, дубильных веществ, витаминов С, Е. Известно, что опухолевая прогрессия сопровождается повышением количества свободных радикалов и снижением антиоксидантной активности, что вызывает активацию процессов свободнорадикального окисления. Так, у больных с опухолями и метастазами в печень обнаружен дефицит биоантиоксидантов и ферментов антиоксидантной защиты [Горожанская Э.Г. и др. 1995]. Развитие острой стрессорной реакции также сопровождается комплексом окислительно-восстановительных процессов: стимуляцией перекисного окисления липидов и нарушением липидного биослоя клеточных мембран [Меерсон Ф.З., Пшенников М.Г., 1988]. В экспериментах на мышах с 3LL показано, что после хирургического удаления опухоли происходит значительное повышение антиокислительной активности (АОА), при этом в кровеносных сосудах легких отмечено угнетение переокисления липидов [Балицкий К.П., Шмалько Ю.П., 1987]. При снижении АОА в стенках сосудов наблюдается увеличение активности перекисного окисления липидов (ПОЛ). Существенное влияние на стенки сосудов оказывают чрезмерные концентрации котехоламинов и глюкокортикоидов, которые инициируют ПОЛ. По мнению авторов, повышение АОА после операции является фактором, стимулирующим диссеминацию опухоли.
Природные антиоксиданты могут изменять состояние мембран клеток, воздействуя на их физико-химические и биологические свойства, а также препятствовать активации свободно-радикальных реакций, которые оказывают существенное влияние на организм, в том числе, и на иммунокомпетентные клетки [Бакуридзе А.Д. и др., 1993; Белоногова В.Д., 2003]. Антиоксидантными свойствами обладают препараты солодки, флавоноиды шлемника байкальского и одуванчика лекарственного, экстракт левзеи сафлоровидной [Осинская Л.Ф. и др., 1992; Сайфутдинов Р.Р., 1997; Кузьменко А.И. и др., 1999; Володин В.В. и др., 2003; Никонов Г.К., 2003; Толстиков Г.А., 2007]. Об эффективности антиоксидантов в терапии злокачественных новообразований свидетельствуют клинические данные. Так, использование антиоксидантного комплекса, включающего альфа-токоферол, ретинол и аскорбиновую кислоту, в оперативном лечении больных с первичным и метастатическим раком печени приводило к снижению эндогенной интоксикации и гнойно-септических осложнений и повышению антиоксидантных ферментов [Горожанская Э.Г. и др. 1995].
Опухолевая прогрессия сопровождается развитием воспалительного ответа на новообразование и увеличением числа клеток-эффекторов, при активации которых возрастает уровень противоспалительных цитокинов в крови, что, в свою очередь, увеличивает продукцию глюкокортикоидов [Антонов В.Г., Козлов В.К., 2004]. В связи с этим, представляется важным наличие у тималина, эпиталамина, глицирама, препарата подорожника и экстрактов коры осины, облепихи крушиновидной, одуванчика лекарственного противовоспалительных свойств [Юшков В.В., Хавинсон В.Х., 1993; Рузляева Е.А., 1996; Соколов С.Я., 2000; Крылова С.Г.; 2005]. Наличие этих свойств позволяет предположить, что названные средства могут оказывать положительное влияние на оперированных больных, снижая количество послеоперационных осложнений.
Среди исследованных нами препаратов тималин, эпиталамин, экстракты из левзеи сафлоровидной, подорожника большого, солодки голой обладали антиканцерогенной активностью, подавляя у животных развитие индуцированных опухолей [Беспалов В.Г. и др., 2005].
Использование тималина в комплексном лечении больных раком шейки матки приводило к восстановлению числа лейкоцитов и Т-лимфоцитов при облучении и химиотерапии, а также улучшало их состояние в послеоперационном периоде [Декстер Л.И. и др., 1984]. При лечении тималином больных раком легких обнаружено психотропное действие препарата, о чем свидетельствовала коррекция психоэмоционального статуса и улучшение качества жизни больных [Марасанов С.Б. и др., 2000].
Перечисленные выше факты свидетельствуют, что препараты природного происхождения обладают широким спектром фармакологической активности и оказывают модулирующее влияние на гомеостаз организма.
Результаты наших исследований показали, что тималин, эпиталамин, глицирам, препарат подорожника и экстракты бадана тихоокеанского, левзеи сафлоровидной, облепихи крушиновидной, одуванчика лекарственного, осины обыкновенной ингибируют процесс диссеминации при удалении опухолевого узла. В исследования на моделях перевиваемых опухолей, выполненных в лаборатории онкофармакологии ГУ НИИ фармакологии ТНЦ СО РАМН, убедительно доказано, что тималин, глицирам, препарат подорожника и экстракты левзеи сафлоровидной, облепихи крушиновидной, одуванчика лекарственного, солодки голой и шлемника байкальского повышают эффективность химиотерапевтического лечения и ослабляют токсическое действие цитостатиков на организм [Амосова Е.Н. и др., 1987, 1991, 1994, 2003; Гольдберг Е.Д., Зуева Е.П., 2000; Гольдберг Е.Д., 2007; Разина Т.Г. и др., 1998, 1999; 2006]. Поскольку при хирургическом удалении опухоли широко применяется адьювантная терапия, которую проводят курсами с использованием высоких доз цитостатиков, то тималин, глицирам, препарат подорожника и экстракты левзеи сафлоровидной, облепихи крушиновидной, одуванчика лекарственного, солодки голой и шлемника байкальского могут быть использованы и на этом этапе лечения. Увеличение под действием этих средств эффективности хирургического и химиотерапевтического лечения, ослабление побочных эффектов цитостатической терапии и влияние на различные регуляторные системы организма позволяют отнести их группе модификаторов биологических реакций и с успехом использовать на различных этапах специфического лечения больных со злокачественными новообразованиями в качестве средств дополнительной терапии.
Выводы
- Препараты природного происхождения тималин и экстракты бадана тихоокеанского, бархата амурского, водяники черной, дудника даурского, левзеи сафлоровидной, леспедеци двуцветной, лопуха войлочного, облепихи крушиновидной, ореха маньчжурского, подорожника большого, секуринеги полукустарниковой, солодки голой, чистотела большого, шлемника байкальского ингибируют развитие метастатического процесса у мышей с карциномой легких Льюис (ИИМ > 50 %), вызывая достоверное снижение частоты метастазирования, количества метастазов и/или их площади.
- Препараты природного происхождения: тималин и экстракты бадана тихоокеанского, левзеи сафлоровидной, облепихи крушиновидной, ореха маньчжурского, подорожника большого, чистотела большого, шлемника байкальского наряду с антиметастатической активностью обладают свойством ингибировать рост опухолевого узла у мышей с карциномой легких Льюис.
- Препараты природного происхождения тималин, эпиталамин и экстракты бадана тихоокеанского, бархата амурского, календулы лекарственной, левзеи сафлоровидной, леспедеци двуцветной, облепихи крушиновидной, ореха маньчжурского, подорожника большого, чистотела большого, шлемника байкальского обладают антистрессорной активностью, препятствуя повреждению внутренних органов, возникающему в результате иммобилизационного стресса.
- Препараты полипептидной природы тималин и этиталамин, а также экстракты бадана тихоокеанского, левзеи сафлоровидной, облепихи крушиновидной, одуванчика лекарственного, осины обыкновенной, препарата подорожника и глицирам ингибируют процесс диссеминации при удалении основного опухолевого узла у мышей с карциномой легких Льюис, о чем свидетельствовало достоверное снижение частоты матастазирования, количества и площади метастатических узлов, степени метастатического поражения, массы легких и торможение роста метастазов.
- В условиях операционного стресса у крыс с лимфосаркомой Плисса тималин, эпиталамин и препарат подорожника подавляют процесс метастазирования, вызывая снижение количества животных с метастазами и массы подмышечных лимфатических узлов, в которые преимущественно метастазирует опухоль. Эпиталамин не только ингибирует развитие метастазов, но и вызывает торможение роста опухолевого узла у оперированных животных. Антиметастатическое действие препарата подорожника наиболее выражено в том случае, когда оперативное вмешательство вызывает стимуляцию метастатического процесса.
- В условиях операционного стресса у крыс с лимфосаркомой Плисса тималин, эпиталамин и препарат подорожника оказывают регулирующее действие на функциональное состояние надпочечников, нормализуя содержание 11-ОКС в плазме крови животных.
- Экстракты бадана тихоокеанского, облепихи крушиновидной и осины обыкновенной обладают анальгетической активностью, снижая чувствительность животных к боли.
- Тималин, препарат подорожника и экстракт побегов и коры облепихи крушиновидной оказывают иммуномодулирующее действие на функциональную активность естественных клеток-киллеров селезенки у мышей с карциномой легких Льюис. Введение экстракта побегов и коры облепихи на фоне операционной травмы (пробная лапаротомия) предупреждает снижение цитотоксической активности естественных клеток-киллеров спустя сутки после хирургического вмешательства и способствует сохранению высокого уровня их функциональной активность на 6 сутки после операции
