рН нормальной мочи колеблется от 4,8 до 7,0, составляя в среднем 6,0. Кислотность нормальной мочи зависит главным образом от соотношения NaH2PO4 и Na2HPO4. На величину рН мочи влияет характер пищи. При различных заболеваниях могут наблюдаться сдвиги рН как в кислую, так и в щелочную стороны.
Каплю мочи стеклянной палочкой наносят на полоску индикаторной бумаги. Определяют значение рН, сравнивая полученную окраску с цветной шкалой.
2. Определение неорганических составных частей мочи. При выпаривании суточного объема мочи остается сухой остаток в количестве 47-65 г, из них 15-25 г составляют неорганические вещества. Наиболее важные катионы мочи Na+, K+, NH4+, Са2+, Mg2+, анионы - С1-, SO42-, Н2РО4-, НРО2-, РО43-, НСО3-, СО2-, С2О42-. В незначительных количествах могут присутствовать микроэлементы.
2.1. Открытие фосфатов в моче. В моче встречаются фосфаты щелочноземельных и щелочных металлов. Фосфатов за сутки выделяется с мочой около 2,5 г (в расчете на Р2О5).
3—5 мл мочи подщелачивают несколькими каплями раствора аммиака и ждут 2—3 минуты до полного осаждения фосфатов кальция, магния и двойного фосфата магния и аммония. Осадок отфильтровывают, а фильтрат, содержащий растворимые фосфаты натрия и калия, сохраняют. Воронку с осадком на фильтре переставляют в другую пробирку, промывают осадок 2 раза дистиллированной водой и растворяют на фильтре в 1—2 мл 10% раствора азотной кислоты. К азотнокислому раствору добавляют 1 мл раствора молибдата аммония и нагревают. Выпадает желтый кристаллический осадок фосфоромолибдата аммония. К сохраненному фильтрату добавляют по каплям магнезиальную смесь до образования белого кристаллического осадка MgNH4PO4, в виде которого выпадают растворимые фосфаты натрия и калия (NaH2PO4, КН2РО4, К2НРО4).
2.2. Открытие кальция и магния в моче. Кальций и магний выделяются кишечником, в меньшей степени — почками. При смешанной пище в норме суточное содержание кальция 0,3—0,4 г (в расчете на СаО), магния — 0,06—0,2 г (в расчете на MgO).
В пробирку вносят 1 мл мочи, прибавляют 2 капли 10% раствора уксусной кислоты и 3-5 капель насыщенного раствора оксалата аммония. Жидкость в пробирке встряхивают. Белый кристаллический осадок оксалата кальция отделяют фильтрованием. К фильтрату добавляют 4—5 капель 10% раствора аммиака (до щелочной реакции на лакмус). Постепенно выпадает осадок (в виде мути) двойного фосфата магния и аммония, не растворимый в аммиаке, но растворяющийся в органических и минеральных кислотах.
2.3. Открытие аммонийных солей в моче. В пробирку наливают 2 мл мочи и 1 мл известкового молока. Подносят к отверстию пробирки смоченную водой красную лакмусовую бумажку, не прикасаясь ею к стенкам пробирки. Через некоторое время лакмусовая бумажка синеет вследствие выделения аммиака.
3. Органические составные части мочи. К органическим составным частям мочи относятся пировиноградная кислота, мочевые пигменты, мочевина, креатинин, мочевая кислота, аминокислоты, гиппуровая кислота и др. С мочой выводятся также некоторые ферменты, витамины, гормоны. К патологическим составным частям мочи относятся белок, глюкоза, ацетоновые тела, желчные и кровяные пигменты, гомогентизиновая и фенилпировиноградная кислоты.
3.1. Качественное обнаружение и количественное определение белка в моче. В норме в моче человека содержится минимальное количество белка (у взрослого от 20 до 60 мг, у детей — от 3 до 47 мг за 24 часа), присутствие которого не может быть доказано обычно применяемыми в лаборатории реакциями. При ряде заболеваний количество белка в моче увеличивается, и он начинает определяться обычными методами. Цветные реакции не пригодны для открытия белка в моче из-за наличия собственной окраски у мочи. Кроме того, она может содержать вещества, препятствующие появлению характерной окраски. Чувствительность реакций на белок в моче меняется в зависимости от состава мочи.
3.1.1. Проба кипячением в слабокислой среде. В пробирку вносят 1 мл мочи и проверяют ее реакцию на лакмус. Если моча щелочная, то ее предварительно очень слабо подкисляют на лакмус добавлением 1% раствора уксусной кислоты, а затем кипятят. В присутствии белка образуется муть или осадок. При кипячении мочи может выпадать осадок фосфатов и карбонатов кальция и магния. В этом случае осадок растворяется при добавлении 1—2 капель 10% раствора уксусной кислоты и повторном кипячении.
3.1.2. Проба Геллера. В пробирку помещают 1 мл концентрированной азотной кислоты и осторожно из пипетки, спуская по стенке пробирки, наслаивают мочу. При наличии белка на самой границе двух жидкостей образуется белый аморфный осадок или муть в виде кольца. Если белка в моче мало, то кольцо образуется не сразу, а через 2—4 минуты. Проба с концентрированной азотной кислотой чувствительна — она открывает до 0,033 г/л белка.
3.1.3. Проба с сульфосалициловой кислотой. Проверяют реакцию мочи. Мочу щелочной реакции подкисляют 2-3 каплями 5-10% раствора уксусной кислоты. В пробирку наливают 3 мл мочи и прибавляют 6 капель 20% раствора сульфосалициловой кислоты. Моча, содержащая белок, мутнеет (положительная проба). Результаты читают на темном фоне.
Проба с сульфосалициловой кислотой одна из самых чувствительных, она открывает белок при содержании его в моче до 0,015 г/л. Однако проба дает ложноположительные результаты с некоторыми лекарствами (производными пенициллина).
3.1.4. Количественное определение белка в моче по методу разведения (метод Брандберг—Роберте— Стольникова). Экспериментально установлено, что если при взаимодействии слоя азотной кислоты и слоя мочи образование белкового кольца произойдет между 2 и 3 минутами, то в данной моче содержится 0,033 г/л белка.
В пробирку помещают 1 мл 50% раствора азотной кислоты (или реактив Ларионовой) и осторожно по стенке пробирки наливают такое же количество мочи. При рассмотрении на темном фоне появление тонкого белкового кольца между 2-й и 3-й минутами на границе двух жидкостей указывает на наличие в моче 0,033 г/л белка. Если кольцо появляется раньше двух минут после наслоения, мочу следует развести водой и произвести повторное наслоение разведенной мочи. При этом подбирают такое разведение мочи, при наслоении которой кольцо образуется между 2-й и 3-й минутами. Если кольцо имеет нитевидную форму, мочу нужно развести в 2 раза, при широкой форме кольца — в 4 раза и при компактной форме — в 8 раз. Количество белка вычисляют путем умножения 0,033 г/л на степень разведения.
Расчет количества белка в зависимости от разведения мочи представлен в таблице.
Количество мочи, мл | Количество воды, мл | Кратность разведения | Количество белка,г/л |
0,066 | |||
0,099 | |||
0,132 | |||
0,165 |