Методические указания
по теме 2.7: «Патогенные возбудители зооантропонозных
бактериальных инфекций».
Тема 2.7.3: «Бруцеллы».
I Бруцеллы
1. Таксономия:
Отдел Gracilicutes не имеет определенного
Таксономического положения, род Brucella
включает 6 видов бруцелл:
- Br.melitensis – вид, являющийся возбудителем бруцеллеза мелкого рогатого скота (овец и коз); он включает 3 серовара (1, 2, 3); этот вид является наиболее вирулентным для человека;
- Br.abortus – бычий вид, вызывает бруцеллез крупного рогатого скота; он объединяет 9 биоваров (1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9); у людей вызывает спорадические случаи бруцеллеза;
- Br.suis – возбудитель бруцеллеза свиней; этот вид объединяет 5 биоваров (1, 2, 3, 4, 5) и у людей вызывает спорадические случаи заболевания;
- Br.ovis – овечий вид, вызывающий у баранов эпидидимит и аборты у овец;
- Br.neotomae – вид, вызывающий бруцеллез у лесных крыс;
- Br.canis – вид, вызывающий бруцеллез гончих собак.
2. Br.melitensis, Br.abortus, Br.suis являются основными возбудителями бруцеллеза у человека.
Бруцеллез – это хронически протекающая болезнь с поражением опорно-двигательного аппарата, нервной, мочеполовой и сердечно-сосудистой систем (артриты, радикулиты, невриты, фиброзиты, эпидидимиты, эндометриты и др.).
3.Материал для исследования: кровь (в некоторых случаях костный мозг), моча, желчь, грудное молоко, мокрота, ликвор, экссудат при бурситах и другие выделения.
4.Элективные питательные среды и характер роста:
Для культивирования бруцелл используют сывороточно-декстрозный агар, агар на картофельном настое с сывороткой, питательный агар с дрожжевым автолизатом (агар «Д»), печеночный агар и бульон, кровяной агар, эритрит-агар, полусинтетическую среду «Альбими», а также жировые яйца и куриные эмбрионы.
На агаровых средах – колонии бруцелл выпуклые, круглые, правильно контурированные, бесцветные с перламутровым оттенком, гомогенные или с нежной зернистостью от 0,1-0,5мм в диаметре, т.е. типичные S-формы колоний (наряду с S-формами существуют и R-формы колоний и L-формы).
На скошенных элективных средах бруцеллы образуют нежный, блестящий, прозрачный налет.
На жидких элективных средах – бруцеллы образуют помутнение и небольшой осадок; пленка не образуется и только в старых культурах иногда отличается кольцевидный рост по периферии стекла, слегка приподнимающийся над уровнем жидкости.
Бруцеллы в первых генерациях растут очень медленно, 2-3 недели, но не раньше 7-10 дней, в то время как лабораторные культуры бруцелл вырастают уже через 24-48 часов.
5. Методы лабораторной диагностики:
1.Серологический – основной
2. Аллергический
3. Бактериологический
4. Биологический
5.Микроскопический
6. Тесты идентификации бруцелл:
1. Проверяют однородность выделенной чистой культуры, т.е. делают мазок со скошенной элективной среды, окрашивают по Граму и микроскопируют.
2. Делают посев на короткий «пестрый» ряд Гисса и элективный бульон с 2 индикаторными бумажками (на индол и сероводород) → 37оС 24-48 час.
3. Ставят РА на стекле с поливалентной бруцеллезной сывороткой и чистой культурой.
4. С чистой культурой ставят РИФ.
5. Чистую культуру проверяют на фаголизабильность с помощью бруцеллезного бактериофага диагностического → 37оС 24-48 час.
6. Делают посев на среду с мочевиной → 37оС 24-48 час, (определяют уреазную активность).
7. Проверяют бактериостатическое действие красителей, т.е. делают посевы чистой культуры на плотные элективные среды в чашках Петри с фуксином и тионином → 37оС 1-2-5 суток.
8. Ставят РА на стекле с моноспецифическими бруцеллезными сыворотками (видовыми).
9. Проба на чувствительность к антибиотикам.
PS. Выделение и идентификация культур допускается в специальных лабораториях (ООИ) при строгом соблюдении правил техники безопасности.
1. 1) Средства специфической терапии:
- антибиотики с учетом антибиотикограммы;
- вакцинотерпия: убитая бруцеллезная вакцина;
- противобруцеллезный иммуноглобулин.
2) Средства специфической профилактики:
- живая бруцеллезная вакцина (из вакцинного штамма коровьего вида - Br.abortus 19-ВА).
