Стійкість до фізичним і хімічним антигенів

АДЕНОВІРУСИ ЛЮДИНИ

Морфологія

Віріони форми икосаедра d 70-90 нм, який складається з 252 капсомірів з діаметром 7-9 нм. З них 240 капсомірів утворюють 20 рівносторонніх трикутників, кожен має шість сусідніх капсомірів і тому називається гексоном.

Гексон побудований з 3-6 молекул білка II, що становить близько 50% від всіх білків віріона. Групи з дев'яти гексонів пов'язані з двома додатковими мінорними білками (VIII і IX). На дванадцяти вершинах икосаедра є шпилькоподібні виступи довжиною від 8 до 30 нм з голівкою на кінці величиною 4 нм. Вони відходять від вершин дванадцяти капсомірів, що мають п'ять сусідніх. Ці капсоміри разом з виступами називаються пентонами, капсоміри - підставою пентонов, нитки - фібрами. Всередині капсида знаходиться серцевина діаметром 66 нм, що представляє правильно організовану структуру з 12 петель. Вершини петель збігаються з вершинами капсида, і на зрізі віріона серцевина утворює фігуру, подібну квітці. Петлі утворені дезоксирибонуклеопротеидом, що складається з ДНК і асоційованим з ним білком VII. Другий внутрішній білок V знаходиться на зовнішній поверхні петель. У серцевині локалізуються також білки VI, X.

Хімічний склад і физико-хімічні властивості

Віріони містять ДНК і білки. Серед білків є глікопротеїди у складі фібр. ДНК становить 12-13 % від сухої маси, капсидні білки - 60%, внутрішні білки - 12-20. Віріони не містять ліпідів. Плавуча щільність їх у хлориді цезію 1,328-1,340 м/мл, коефіцієнт седиментації 560-800S, молекулярна маса 170- 103-175- 106.

Геном аденовірусів представляє двухнитчату лінійну ДНК з молекулярною масою 20 * 106-25* 106 (частіше 22' 106). ДНК містить термінальні інвертовані повтори довжиною 100-140 нуклеотидних пар, що дозволяють утворювати кільцеві молекули. На 5'-кінці обох ниток ДНК знаходиться ковалентно пов'язаний з залишком дезоксицитидиловой кислоти термінальний білок, який необхідний для ініціації реплікації ДНК: його видалення призводить до значного зниження інфекційної активності. Аденовіруси, що володіють онкогенними властивостями для тварин, за нуклеотидним складом ДНК відрізняються від неонкогенних вірусів. Для найбільш онкогенних вірусів зміст ГЦ-пар дорівнює 48-49 %, у менш онкогенных - 49-52 %, у неонкогенних - 56-59 %. За функцію трансформації клітин відповідає ген, що становить 12-14 вірусного генома з лівого боку.

Білки, антигени

Білки складають 86-88 % маси віріона, кількість їх більше 20. У складі віріона містяться як мажорні, так і мінорні білки. У віріоні є не менш 7 антигенів. Чотири комплементзв'язуючих антигена позначені літерами А, В, С і Р. А-антиген пов'язаний з гексоном, В-антиген - з основою пентона, С-антиген - з фібрами, Р-антиген є внутрішнім антигеном, який звільняється при руйнуванні віріона; цей антиген відрізняється нестабільністю. А-антиген є групоспецифічним, загальним для всіх аденовірусів людини. Однак у гексонів є і типоспецифічні детермінанти. Р-антиген є також групоспецифічним. По В-антигену, який є підгруповим антигеном, всі аденовіруси людини розділені на 3 підгрупи. С-антиген є типоспецифічним антигеном.

Віруси мають гемагтлютинуючу активність, яка обумовлена пентоном. "За особливості аглютинувати різні види еритроцитів аденовіруси діляться на 3 підгрупи. Віруси підгрупи А аглютинують еритроцити макак резусів, але не щурів (типи 3, 7, 11, 14, 16, 20, 21, 25, 28). Віруси підгрупи В аглютинують еритроцити щурів, але не мавп (типи 8, 9, 10, 13, 15, 17, 19, 22, 24, 26, 27, 29, 30). Нарешті, підгрупа З слабо аглютинує еритроцити щурів і не аглютинує еритроцити мавп (типи 1, 2, 4, 5, 6). Типи 12, 18 і 31 не мають гемагтлютинуючу активність. РТГА використовується для типоспецифічної ідентифікації вірусів.

Стійкість до фізичним і хімічним антигенів

Аденовіруси більш стійкі у зовнішньому середовищі, ніж інші віруси людини. Вони стійкі в межах рН 5,0-9,0, витримують прогрівання при температурі 50° С до 70 днів зберігають активність при температурі 4° С, зберігаються без втрати активності в замороженому стані і при ліофілізації. Оскільки віруси не містять ліпіди, вони стійкі до дії ефіру, хлороформу, детергентів.

Репродукція

Віріони прикріплюються фібрами до специфічних рецепторів клітини і проникають в них шляхом рецепторного эндоцитоза. Роздягання їх починається в цитоплазмі і завершується в ядрі. Кінцевим продуктом роздягання є ДНК, асоційована на 5'-кінці з термінальними білками. Транскрипція генома здійснюється клітинною ДНК-залежною РНК-полімеразою. У ранній стадії відбувається лише обмежена транскрипція, яка йде на чотирьох окремих ділянках генома, продуктами її в основному є іРНК для неструктурних білків. Пізня транскрипція йде в напрямку, протилежному ранньої транскрипції з утворенням близько 13 класів іРНК. Пізня транскрипція відбувається після синтезу вірусної ДНК і її продуктами в основному є іРНК для структурних білків.

Реплікація ДНК відбувається в ядрах і забезпечується клітинними системами синтезу ДНК, а також вірусопецифічними ферментами - продуктами ранньої транскрипції.

Зборка віріонів відбувається в ядрах і є багатоступінчастим процесом. Спочатку поліпептиди утворюють мультимірні білкові структури - фібри і гексони, потім утворюються капсиди і більш великі структури - незрілі віріони. Віріони утворюють в ядрі кришталевоподібні укладання. В ядрі накопичуються і порожні капсиди, в яких немає серцевини, а також віріони з меншою кількістю ДНК (неповні форми). Вихід віріонів відбувається при руйнуванні клітини. Кожна клітина здатна продукувати близько мільйона вірусних частинок, проте лише невелика їх кількість виходить з клітки, а інші залишаються пов'язаними з клітинним ядром. В ядрах скупчуються вірусопецифічні продукти, які порушують функцію ядра. В ураженій клітині з'являються внутрішньоядерні включення, вона округлюється і дегенерує. Інфекційний цикл триває 14-24 год.

Аденовіруси людини за онкогенними властивостями поділяють на три групи: А - високоонкогенні, Б - слабоонкогенні і В - неонкогенні. У людини аденовіруси навіть при тривалій персистенції не викликають неопластичних процесів, що трансформують властивості виявлені в дослідах на культурах клітин і лабораторних тварин - хом'яків, щурів, мишей, кроликів. При трансформації відбувається інтеграція генома аденовірусів з клітинним геномом. Аденовіруси (за винятком серотипов 38-41) добре розмножуються в первинних і перетравлених культурах клітин різного походження, викликаючи два типи цитопатичних змін: округлення клітин та їх скупчення, що нагадують грона винограду, які незабаром відстають від скла, і дрібноклітинну дегенерацію з утворенням дрібних круглих клітин, дифузно розташованих по всьому шару культури. У культурах фібробластів цитопатогенна дія виражена набагато слабкіше, ніж у культурах епітеліальних клітин. В заражених клітинах з'являються внутрішньоядерні включення.

Патогенез

Аденовіруси розмножуються в епітелії слизової оболонки верхніх дихальних шляхів; в клітинах епітелію з'являються характерні внутрішньоядерні базофільні включення й скупчення специфічних антигенів. Вірус може проникати в легені, розмножуватися в епітелії слизової оболонки бронхів і альвеол і викликати важкі пневмонії. Аденовіруси можуть потрапляти в кишечник і розмножуватися в епітелії слизової оболонки кишківника, викликаючи гастроентерити (серотипи 40 і 41); при цьому вони у великій кількості виділяються з фекаліями хворих. В кишківник віруси потрапляють фекально-оральномим шляхом або заносяться кров'ю.

Аденовіруси вражають лімфоїдну тканину: мигдалини, аденоїди, регіонарні лімфатичні вузли. Часто зустрічається вірусемія.

Клініка

Аденовіруси вражають дихальний тракт, очі, лімфоїдне кільце глотки, кишківник, сечовий міхур, викликаючи різною мірою виражену загальну реакцію (лихоманку, інтоксикацію), пов'язану з вірусімією. Найбільш часті ураження дихального тракту: риніти, ларингіти, бронхіти, пневмонії, описані як фарингоконъюнктивальна лихоманка. При захворюваннях, викликаних типами 3 і 7, рідше типами 1, 2, 5 і 6, основним симптомом є кон'юнктивіт. Типи 8 і 19 викликають епідемічний кератокон’юнктивіт, типи 11 і 21 - гострі геморагічні цистити у дітей, типи 40 і 41 - гастроентерити. Характерною рисою аденовірусних захворювань є більш тривалий інкубаційний період порівняно з таким інших респіраторних інфекцій (6-9 днів), повільний розвиток і тривалий перебіг. Респіраторний, кон'юнктивальний і кишковий синдроми захворювання можуть поєднуватися з домінуванням одного з них або зустрічатися порізно. Вірус здатний тривало персистувати в тканині мигдалин і аденоїдів, періодично викликаючи ангіни або призводячи до розвитку хронічного тонзиліту.

Дослідження проб на наявність аденовірусів 40-41 типів Мiнiстерство охорони здоров'я україни з метою науково-методичного забезпечення державного санітарно-епідеміологічного нагляду у 2007 році затвердило методичні вказівки "Санітарно-вірусологічний контроль водних об'єктів" Методичні вказівки призначені для використання приздійсненні контролю якості води (питної, господарсько-побутовогопризначення, відкритих водойм, стічної, води для зрошеннясільськогосподарських угідь тощо) за вірусологічними показникамипід час проведення державного санітарно-епідеміологічного наглядута можуть бути використані для проведення відомчого та всіх іншихвидів контролю, незалежно від підпорядкованості і форм власностілабораторій. Санітарно-вірусологічне дослідження води складається з етапів: - відбір проб для дослідження; - підготовка проб для дослідження (первинна обробкаматеріалу); - концентрація вірусів у пробах води; - деконтамінація вірусного концентрату; - вірусологічне дослідження (виділення вірусу або виявленняйого антигенів та фрагменту геному). Відбір проб води здійснюють, дотримуючись загальних вимог, щозабезпечують збереження вірусів у пробі та не допускають забруднення вторинною мікрофлорою. Відбір проб води здійснюють, дотримуючись загальних вимог, що забезпечують збереження вірусів у пробі та не допускають забруднення вторинною мікрофлорою. Iндикацію аденовірусів людини в елюатах, отриманих післяконцентрування, проводять методами електронної мікроскопії, в РНГАіз специфічним рідким діагностикумом "Аденотест", ПЛР, IХА. Виділення та ідентифікацію аденовірусів з проб водиздійснюють у культурі клітин. Електронна мікроскопія Для приготування препарату на предметну сітку, вкритувуглецево-формваровою плівкою-підкладкою, наносять концентрат(елюат). Після негативного контрастування фосфорно-вольфрамовоюкислотою препарати досліджують при інструментальному збільшенніу 30-50 тисяч разів Належність виявленихчасток до аденовірусів визначають за характерною морфологією тарозміром. Реакція непрямої гемаглютинаціїВикористовують еритроцитарний аденовірусний імуноглобуліновийрідкий діагностикум для РНГА "АДЕНОТЕСТ" для виявлення ікількісного визначення титрів аденовірусів 40-41 типів. До складу тест-системи "АДЕНОТЕСТ" входять три компоненти: 1) діагностикум еритроцитарний аденовіруснийімуноглобуліновий рідкий (ЕД); 2) імунна асцитна рідина (IАР); 3) антиген аденовірусів (АГ). Реакцію проводять у мікропланшетах для імунологічних реакційв об'ємі 75 мкл. В кожну лунку двох рядів мікропланшета вносять по25 мкл стабілізованого 0,9% розчину NaCl. По 25 мкл концентрату,додають в перші лунки вказаних рядів, після чого готують йогопослідовні дворазові розведення (від 1:2 до 1:256). Далі в лункипершого ряду додають по 25 мкл 0,9% розчину NaCl, а в лункидругого ряду - по 25 мкл IАР. Планшет струшують та залишають при кімнатній температурі на20 хв. для утворення комплексу антиген-антитіло в лунках другогоряду. Після цього в усі лунки вносять по 25 мкл ЕД. Планшет зновуструшують і залишають на 1,5-2 годин для специфічної взаємодії АГаденовірусу з антиаденовірусними імуноглобулінами ЕД. Реакція супроводжується такими контролями: - контроль неспецифічної аглютинації ЕД (в 3 лунки вносять по50 мкл 0,9% розчину NaCl та додають по 25 мкл ЕД в кожну); - контроль специфічної взаємодії ЕД та IАР. Його виконують завищеописаною методикою РНГА, використовуючи замість досліджуваноїпроби АГ аденовірусу, який титрують від 1:64 до 1:2048. Антигенвходить до складу тест-системи у розведенні 1:32. Цей контрольпроводять після отримання комплекту, а потім - за необхідністю. Облік результатів у контролях: у першому контролі спонтаннааглютинація ЕД повинна бути відсутня. УВ контролі специфічноївзаємодії ЕД та IАР в першому ряду ЕД повинен реагувати зантигеном в розведенні не менш ніж 1:256, а в другому ряду IАРповинна знижувати титр АГ не менше ніж в 4 рази. Позитивний результат на наявність аденовірусу дають у випадкуповного гальмування аглютинації в другому ряду РНГА не менше ніжна 2 розведення (в 4 рази) в порівнянні з першим рядом. Постановка контролів є обов'язковою при одержанні новоїтест-системи. В разі їх невідповідності тест-система вважаєтьсянепридатною для застосування. Полімеразна ланцюгова реакція ПЛР призначена для виявлення в пробах води або в концентраті(елюаті) фрагментів послідовностей ДНК-геному аденовірусу прибагаторазовому збільшенні (ампліфікації) кількості цих фрагментівз подальшим ідентифікуванням їх відомими методами - молекулярноюгібридизацією, електрофорезом у агарозному чи поліакриламідномугелі (ПААГ). Принцип реакції полягає у багаторазовому повторенніциклів синтезу вірусспецифічної послідовності ДНК за допомогоютермостабільного ферменту Tag ДНК-полімерази та двох специфічнихзатравок (праймерів). Виявленння ДНК аденовірусів в пробах води методомполімеразної ланцюгової реакції (ПЛР) Для проведення аналізу використовуються проби води без етапуконцентрації вірусу та концентрат (елюат), отриманий післяконцентрування (див. Розділ 6). Цей зразок в кількості 0,5-1 млпереносять в пробірки типу "еппендорф", що вільні від РНКаз таДНКаз. Зберігають проби при 2-8 град. С не більше 1 доби, тривало -при мінус 70 град. С. Допускається тільки одноразовезаморожування-відтаювання матеріалу. Доставка проб здійснюється в спеціальному термоконтейнеріз охолоджуючими елементами. Проведення аналізу Опис етапів ПЛР-аналізу ПЛР-аналіз складається з трьох етапів: - виділення ДНК; - ампліфікація ділянки ДНК - полімеразная ланцюгова реакція(ПЛР); - електрофоретичний аналіз продуктів ПЛР та облік результатівПЛР-аналізу. Облік результатів Облік результатів ПЛР-аналізу проводиться по наявності абовідсутності на електрофореграмі специфічних смуг амплифікованоїкДНК (va284282-07). Електрофореграмма результатів тестування зразків на наявність ДНК Adenovirus (va284282-07) Довжина специфічних смуг амплифікованих фрагментів кДНК:аденовірусу - 462 п.н. Позитивними вважаються зразки, які містять специфічнусмугу, що світиться, на рівні 462 п.н. більшої або меншоїінтенсивності. Негативними вважаються зразки, які не містять ніяких смуг Iмунохроматографічний аналіз IХА-тести засновані на тих самих принципах імунологічнихреакцій, застосуванні таких самих імунобіологічних продуктів, що ідобре відомі класичні IФА тест-системи. Але твердим носіємімунокомпонентів є НЦМ. Їм притаманна висока чутливість таспецифічність. Принцип комбінованого тесту "CITO TEST ROTA-ADENO". Тестпобудований на використанні унікальної комбінації кон'югатівмоноклональних антитіл проти аденовірусу та ротавірусу з часткамибарвника - колоїдного золота. В тесті використовуються такожантиаденовірусні та антиротавірусні поліклональні антитіла, яківибірково зв'язуються з вірусами у пробі. Механізм тестування полягає у наступному: під час проходженнядосліджуваної проби крізь адсорбуючу зону тестового приладумічений кон'югат зв'язуються з аденовірусами у пробі, утворюючисиню смугу у тест-зоні. За наявності у пробі ротавірусівформується рожева або червна смуга. Компоненти тесту, якіне вступили в реакцію, забезпечують виявлення зеленої смуги уконтрольній зоні, що свідчить про функціонально активний станреагентів та правильне проведення тесту. Процедура тесту: IХА-теств упаковці та досліджувані проби води або концентрат передпочатком тестуванням витримують при кімнатній температурі. Тествиконують методом занурення - тримаючи тест на вертикально,занурюють білим кінцем тесту в зразок, не перевищуючи обмеженнязанурення, вказаного на тесті стрілками. Облік результату теступроводиться через 10 хв. без подальшого втручання(va284282-07).Iнтерпретація результату Негативний результат: лише одна смуга зеленого кольору(контрольна лінія) з'являється на білій центральній ділянці тесту(контрольна ділянка тесту). Позитивний результат: в доповнення до зеленої контрольноїсмуги також з'являється одна чітка червона смуга або одна чіткасиня смуга або обидві смуги одночасно (лінія результату) на білійцентральній зоні тесту (ділянка результату тесту). Наявністьчервоної і зеленої смуги свідчать про виявлення ротавірусів.Наявність синьої та зеленої смуги - про виявлення аденовірусів.Наявність трьох смуг (червоної, синьої та зеленої) - про одночасневиявлення двох збудників (ротавірусу та аденовірусу). Тест недійсний: відсутність контрольної зеленої смугинезалежно від появи чи відсутності результативної лінії (червоноїабо синьої). Недостатня кількість зразку, неправильна технікавиконання тесту чи псування реагентів є вірогіднішими причинамивідсутності контрольної лінії. Iнтенсивність синьої та червоної лінії на тестовій ділянцітесту залежить від концентрації вірусів, присутніхв досліджуваному зразку. Виділення та ідентифікація виділеного агентув культурі клітин Аденовіруси можуть культивуватися на багатьох типах культурклітин. Для їх виділення у лабораторній практиці частішевикористовуються перещеплювані лінії клітин епітелію людини (HeLa,HEp-2, КВ, L-41) і рідше - клітини приматів (Vero та інші).Найбільшу чутливість до аденовірусів мають первинні або диплоїднікультури клітин нирок ембріону людини. При їх використанніцитопатогенний ефект (ЦПД) проявляється набагато швидше, ніж уперщеплюваних культур клітин, тобто на 2-4 добу після інфікування.Час появи ЦПД залежить від типу вірусу та його концентрації.Ознаками ЦПД, що вказують на наявність аденовірусів у інфікованихчутливих культурах клітин, є округлення клітин, збільшеннязернистості у цитоплазмі, формування скупчень клітин різнихрозмірів, які іноді нагадують виноградні грона. Моношар також моженагадувати сітку з розтягнутими вічками. Для вирощування культур клітин використовують середовищеросту, яке складається з 90% мінімального середовища Iгла (нарозчині Ерла) і 10% телячої ембріональної сироватки. Для підтримки культур клітин використовують мінімальнесередовище Iгла (на розчині Ерла) з 2% телячої ембріональноїсироватки. Проте, при спостеріганні за інфікованими клітинамикожні 4-5 діб потрібна заміна середовища на нове. При необхідності зберігання матеріалів до двох тижнів длявиділення аденовірусів їх поміщають у транспортне середовищеЛейбовиця (NaCl - 4 г; KCl - 0,2 г; K HPO - 1,7 г; деревне (бактеріологічне) вугілля - 10 г; агар - 4 г). Сольові компонентирозчиняють у 500,0 мл дистильованої води і додають вугілля. Агартакож розчиняють у 500,0 мл дистильованої води. Змішують обидварозчини і автоклавують при 121 град. С (1 атм.). Суміш переносятьв стерильну колбу з магнітом і перемішують на магнітному змішувачіпоки температура не знизиться до 40 град. С, далі розливають по8,0 мл в пробірки з нагвинчуючимися пробками. При тривалому зберіганні зразків проб (більше двох тижнів) їхзаморожують при температурі 15-30 град. С. Вищезазначене транспортне середовище слід використовувати призберіганні матеріалів при температурі + 2 - +8 град. С. При виділенні аденовірусів із проб, відібраних із об'єктівдовкілля, проводять роботу у такій послідовності: - змінюють середовище росту на підтримуючи у пробірочнійкультурі клітин з суцільним моношаром; - проби матеріалів вносять по 0,2 мл в 2-3 пробірки, в якихпопередньо замінили середовище росту на середовище підтримки; - після інфікування пробірки з культурою клітин поміщають втермостат при температурі 37 град. С, витримують протягом 7 діб тамікроскопують з однодобовим інтервалом. При відсутності ЦПД при інфікуванні культур клітин доцільнепроведення двох "сліпих" пасажів. Iдентифікують та типують виділені у культурі клітинаденовіруси за допомогою типоспецифічних сироваток у реакціїнейтралізації (РН) та реакції гальмування гемаглютинації (РГГА)згідно з інструкцією виробника щодо використання. Iндикацію аденовірусного антигену в культурах інфікованихклітин можна здійснювати одним з вищенаведених методів.

 

Лабораторія в кишені

Аденовіруси є основними збудниками інфекційних гастроентеритів як у дітей (в тому числі і немовлят), так і у дорослих. Основним механізмом передачі інфекції є фекально-оральний.

Симптомами вірусного гастроентериту є секреторна діарея, блювота, головний біль, лихоманка, кишкові кольки. Взагалі, при аденовірусному гастроентериті симптоми розвиваються протягом 1-2 днів і продовжуються до 5-8 днів.

Блістер-тест на аденовіруси є якісним імунохроматографічним аналізом для виявлення антигенів аденовірусів у зразках фекалій.

Під час тестування зразок вступає в реакцію із фарбованим комплексом (анти-аденовірусні моноклональні антитіла – блакитні мікросфери), який був заздалегідь нанесений та висушений на мембрані тесту. Суміш мігрує вздовж мембрани під дією капілярної сили. У випадку позитивного результату, специфічні антитіла, які присутні на мембрані, будуть захвачувати фарбоване сполучення. Суміш продовжує просовуватися вздовж мембрани до імобілізованих антитіл, розміщених на контрольній ділянці тесту і лінія зеленого кольору завжди буде з’являтися. Наявність цієї зеленої лінії служить підтвердженням достатньої кількості використаного зразку, заповнення капілярів мембрани, а також як внутрішній контроль якості для реагентів.

Зразки фекалій слід збирати в чисту ємкість. Тестування повинно бути проведено відразу після забору зразку.

 

Процедура тесту

Доведіть тест, зразки фекалій до кімнатної температури (15-30ºC) перед тестуванням. Не відкривати пакет поки Ви не готові до проведення аналізу. Перед відкриванням упаковки необхідно довести до кімнатної температури необхідну для проведення аналізу кількість тестів. Існує два можливих варіанти виконання тесту:

A) Використання однієї упаковки блістер-тесту як тест-картки:

1. Відріжте від блістеру одну упаковку тесту, тримаючись за незапаяний бік тесту, відкрийте його, знімаючи верхній шар фольги. Не виймайте тест з блістерної упаковки і використайте як можна швидше.

2. Заздалегідь збовтайте пробірку для того, щоб отримати суспензію зразку. Відламайте кінчик кришечки пробірки (3).

3. Покладіть одну упаковку блістер-тесту горизонтально. Внесіть 5 крапель чи 150 µL отриманого зразку на білу ділянку тесту (4). Використовуйте окрему пробірку та тест-систему для кожного зразку фекалій. Облік результату тесту проводиться через 10 хвилин без подальшого втручання.

B) Використання однієї упаковки блістер-тесту як тест-смужки методом занурення:

1. Відріжте від блістеру одну упаковку тесту, тримаючись за незапаяний бік тесту, відкрийте його, знімаючи верхній шар фольги.

2. Заздалегідь збовтайте пробірку для того, щоб отримати суспензію зразку. Відламайте кінчик кришечки пробірки (3).

3. Внесіть 10 крапель отриманого зразку в іншу пробірку (5). Тримаючи блістер-тест вертикально, занурте білим кінцем тесту в зразок, не перевищуючи обмеження занурення, вказаного на тесті стрілками. Облік результату тесту проводиться через 10 хвилин без подальшого втручання.

В залежності від концентрації антигенів аденовірусів у зразку, позитивний результат може бути виявлений через 3 хвилини. Однак, остаточний результат слід інтерпретувати через 10 хвилин.

 

 

Негативний: лише одна лінія зеленого кольору (контрольна лінія) з’явиться на білій центральній ділянці тесту (контрольна ділянка тесту)

Позитивний:в доповнення до зеленої контрольної лінії також з’являється чітка блакитна лінія (лінія результату) на білій центральній зоні тесту (ділянка результату тесту)

Недійсний: відсутність контрольної лінії (зеленої) незалежно від появи чи відсутності результативної лінії (блакитної). Недостатня кількість зразку, неправильна техніка виконання тесту чи псування реагентів є вірогіднішими причинами відсутності контрольної лінії. Перегляньте техніку виконання та повторіть процедуру тестування з новим тестом. Якщо проблема залишається, припиніть тестування та зв’яжіться з вашим місцевим дистриб’ютором.

Примітка до інтерпретації результату тесту

Інтенсивність блакитної лінії на тестовій ділянці тесту буде залежати від концентрації антигенів, присутніх в зразку. Однак ні кількісний вміст, ні ступінь підвищення антигенів не можливо визначити даним якісним тестом.

За допомогою даного тесту можна встановити припустимий діагноз аденовірусної інфекції. Остаточний діагноз повинен бути встановлений лікарем після всіх клінічних та лабораторних досліджень.