Иммунопрофилактика и иммунотерапия инфекционных

Классификация диагностикумов

1. Бактериальные - во всех реакциях серодиагностики бактериальных инфекций, кроме РПГА.

2. Вирусные - во всех реакциях серодиагностики вирусных инфекций, кроме реакции нейтрализации
вируса (РН).

3. Эритроцитарные - только в РПГА в серодиагностике бактериальных и вирусных инфекций.
Получение диагностикумов

Бактериальный диагностикум - это стандартная взвесь убитых бактерий (исключая живой леп-тоспирозный диагностикум), реже - отдельные антигены микроорганизмов (О-, Н-, Vi-атигены брюшно­тифозных бактерий, гонококковый антиген).

Эритроцитарный диагностикум - это антигены микроорганизмов, адсорбированные на эритроци­тах I группы крови человека, предварительно обработанные танином или формалином для улучшения адсорбционных свойств последних.

 

РЕАКЦИИ СЕРОИНДИКАЦИИ

Реакция иммунофлюореспенции (РИФ) - проводится с целью сероиндикации бактериальных инфекций. Компонентами реакции являются исследуемый материал и диагностическаясыворотка - люминесцирующая. Ставится на стекле. Учет в люминесцентном микроскопе.

Реакция пассивной (непрямой) гемаггл ютинации (РПГА, РИГА) - проводится с целью серо-
индикации бактериальных инфекций. Компонентами реакции являются исследуемый материал и диагнос-
тическая сыворотка - суспензионные антитела. Ставится на стекле. Учет визуальный по выпадению
хлопьев.

Реакция преципитации (термокольцепреципитации) - проводится с целью сероиндикации бактериальных инфекций. Используется для диагностики сибирской язвы у животных - реакция Ас коли. Компонентами реакции являются термоэкстракт из шерсти животного (исследуемый материал, подготов­ленный специальным образом - кипятится шерсть животного в физ. растворе, разрушаются термолабиль­ные антигены микроорганизмов, но сохраняется термостабильный соматический О-антиген) и диагности­ческая сыворотка - преципитирующая. Ставится в узких пробирках. Учет визуальный по кольцу преципитации на границе двух сред.

РЕАКЦИИ СЕРОИДЕНТИФИКАЦИИ

Реакция агглютинации - проводится с целью сероидентификации чистой культуры в Ш этапе бактериологического метода (идентификация по антигенным свойствам). Компонентами реакции являются чистая культура (неидентифицированная) и диагностическая сыворотка - агглютинирующая. Ставится настекле. Учет визуальный по выпадению хлопьев.

Реакция преципитации (в геле) - используется в диагностике дифтерии для определения токси-генности штамма. Компонентами реакции являются чистая культура (идентифицированная) и диагности­ческая сыворотка - антитоксическая. Ставится в чашках Петри с питательной средой. В центр чашки помещается полоска фильтровальной бумаги, пропитанная антитоксической противодифтерийной сыво­роткой, а по бокам от нее засеваются чистьте культуры. Учет визуальный по образованию усов преципита­ции рядом с чистой культурой,

 

1. Просмотр и запись вакцин и лечебно-профилактических сывороток по схеме: что содержит, как получен и для чего применяется данный препарат. Вакцины Живые:

вакцина чумная ЕВ живая

вакцина сибиреязвенная СТИ живая

вакцина бруцеллезная живая

вакцина туляремийная Гайского-Эльберта живая вакцина туберкулезная БЦЖ живая

вакцина туберкулезная БЦЖ-м живая

вакцина гриппозная аллантоисная живая

вакцина коревая культуральная живая

вакцина краснушная живая вакцина кори, краснухи и паротита живая

вакцина полиомиелитная культуральная живая вакцина паротитная культуральная живая

Корпускулярные (убитые, инактивированные):

вакцина лептоспирозная инактивированная

вакцина холерная инактивированная корпускулярная

вакцина брюшнотифозная спиртовая

вакцина брюшнотифозная, обогащенная ВИ-антигеном

вакцина антирабическая культуральная инактивированная вакцина гепатита А культуральная инактивированная

вакцина герпетическая инактивированная

вакцина гриппозная инактивированная

вакцина клещевого энцефалита культуральная инактивированная

вакцина полиомиелитная культуральная инактивированная

Химические и анатоксины:

секста-анатоксин тетра-анатоксин три-анатоксин

вакцина коклюшно-дифтерийно-столбнячная адсорбированная (АКДС-вакцина, АКДС-м-вакцина)

анатоксин дифтерийно-столбнячный адсорбированный (АДС-анатоксин, АДС-м-анатоксин)

вакцина тифозно-паратифозно-столбнячная химическая сорбированная (ТАВте-вакцина)

анатоксин столбнячный адсорбированный

анатоксин дифтерийный адсорбированный

вакцина брюшнотифозная ВИ-полисахаридная

вакцина холерная бивалентная химическая (холероген-анатоксин + О-антиген) вакцина менингококковая группы А полисахаридная

вакцина менингококковая групп А и С полисахаридная

вакцина гриппозная полимер-субъединичная тривалентная

Генно инженерные:

вакцина гепатита В рекомбинантная дрожжевая

Лечебные вакцины:

лечебная бруцеллезная вакцина гоновакцина

Гетерологичные сыворотки и иммуноглобулины:

иммуноглобулин противосибиреязвенный лошадиный иммуноглобулин противолептоспирозный воловий

сыворотки противоботулинические типов А, В и Е моновалентные антитоксические

сыворотка противостолбнячная антитоксическая

сыворотка противогангренозная поливачентная антитоксическая

иммуноглобулин против клещевого энцефалита лошадиный

иммуноглобулин антирабический лошадиный

сыворотка противодифтерийная лошадиная

Гомологичные иммуноглобулины:

иммуноглобулин донорский нормальный

иммуноглобулин противостолбнячный человека антитоксический иммуноглобулин против клещевого энцефалита иммуноглобулин антирабический иммуноглобулин человека против гепатита В иммуноглобулин противококлюшный антитоксический

 

ПОЯСНЕНИЯ К ЗАНЯТИЮ

Серодиагностика - это определение неизвестных специфических антител в сыворотке крови боль-
ного с помощью заведомо известных антигенов (диагностикумов)

Реакции серодиагностики

Для серодиагностики применяют РА, РПГА, РСК, нРИФ, ИФА.

Реакция связывания комплемента (РСК). Предложена Ж. Бордэ и О. Жангу в 1901 году. Ис­пользуется для серодиагностики бактериальных инфекций. Для постановки РСК требуется предваритель­ная подготовка ингредиентов реакции, особенно комплемента, в качестве которого используют сыворотку крови морской свинки с установкой рабочей дозы. В последние десятилетия выпускается сухой оттитро­ванный комплемент, что значительно облегчило постановку реакции. Исследуемые сыворотки крови и антигены обязательно контролируются на антикомплементарность. Постановку основного опыта произво­дят в пробирке путем внесения в нее определенного объема сыворотки крови, антигена (диагностикума) и рабочей дозы комплемента. Смесь инкубируют в термостате при 37°С в течение часа. Регистрацию результатов реакции проводят по гемолизу сенсибилизированных эритроцитов барана. Их приготавливают при смешивании гемолитической сыворотки кролика с эритроцитами барана. При внесении комплемента в эту смесь происходит реакция гемолиза. Таким образом, в тех случаях, когда комплемент не связывается с исследуемой системой антиген-антитело, т.е. остается свободным, наблюдается полный гемолиз бара­ньих эритроцитов, который свидетельствует об отрицательной реакции. Отсутствие гемолиза указывает на связывание комплемента с системой антиген-антитело, т.е. на положительную реакцию, которая обо­значается крестами. Интенсивность задержки гемолиза оценивается по четырехкрестной системе, при этом полное отсутствие гемолиза обозначается ++++.

Реакция иммунного лизиса. В основе реакции лежит способность специфических антител образо­вывать иммунные комплексы с клетками, в том числе с эритроцитами, бактериями, что приводит к акти­вации системы комплемента по классическому пути и лизису клеток. Из реакций иммунного лизиса чаще других применяется реакция гемолиза и редко - реакция бактериолиза.

Реакция гемолиза. Под влиянием реакции с антителами в присутствии комплемента мутная взвесь эритроцитов превращается в ярко-красную прозрачную жидкость - «лаковую кровь» вследствие выхода гемоглобина. При постановке диагностической реакции связывания комплемента реакция гемолиза ис­пользуется как индикаторная: для тестирования присутствия или отсутствия свободного комплемента.

Реакция агглютинации (РА). С целью серодиагностики компонентами РА являются исследуемая сыворотка и бактериальный диагностикум. Повысить специфичность и чувствительность реакции можно путем разведения (титрования) исследуемой сыворотки. Для большинства инфекций существует диагно­стический титр, по которому судят о текущей инфекции. При некоторых заболеваниях необходимо прово­дить РА с парными сыворотками, т.е. двукратно через временной интервал, для того чтобы увидеть нара­стание титра антител в динамике. Ставится в пробирках, в развернутом виде, с учетом диагностического титра. Учет реакции визуальный по выпадению хлопьев.

Реакция пассивной (непрямой) гемагглютинации (РПГА, РИГА). С целью серодиагностики компонентами реакции являются исследуемая сыворотка и эритроцитарный диагностикум. Ставится в планшетах в развернутом виде, с учетом диагностического титра. Учет реакции визуальный («зонтики» -положительная реакция, << пуговки (диски) >> - отрицательная реакция).

Существуют реакции, основанные на выявлении взаимодействия антигена с антителом с образованием иммунного комплекса по метке одного из участников реакции (РИФ, ИФА).

С целью серодиагностики применяют непрямую р еак цию иммуно флюорес пенпии (нРИ Ф). Компонентами реакции являются сыворотка больного, диагностикум и меченная флюорохромом (люминофором) антитлобулиновая сыворотка. Учет реакции производится с помощью люминесцентного микроскопа.

Аналогично нРИФ проводится нммуноферментный анализ (ИФА). Компонентами реакции явля­ются сыворотка больного, диагноситкум и антиглобулиновая сыворотка, меченная ферментом. Учет ре­акции визуальный по изменению окраски соответствующего субстрата.

 

ИММУНОПРОФИЛАКТИКА И ИММУНОТЕРАПИЯ ИНФЕКЦИОННЫХ

ЗАБОЛЕВАНИЙ

Одним из важнейших направлений прикладной микробиологии является создание эффективных пре­паратов для иммунопрофилактики и иммунотерапии инфекционных заболеваний.

Иммунопрофилактика - применение иммунологических препаратов для создания искусственного иммунитета (активного или пассивного).

Иммунотерапия - применение иммунологических препаратов для лечения больных.

Среди препаратов для иммунопрофилактики и иммунотерапии различают:

• вакцины - содержат антигены, индуцируют в организме развитие гуморального и клеточного им мунного ответа, то есть формируют активный иммунитет, который, как правило, развивается через сколько недель и сохраняется достаточно долго (от 6 месяцев до 10 и более лет);

•гипериммунные сыворотки и иммуноглобулины - содержат готовые антитела, при их введении возникает пассивный иммунитет, который возникает немедленно после введения препарата, но сохраняется недолго (период полувыведения гетерологичных антител составляет около 2 недель, а гомологичных -около 4 недель).

Вакцинотерапия - введение лечебных вакцин - антигенных препаратов для перевода хронической формы инфекции в обострение при хронических вялотекущих инфекциях (гонорея, бруцеллез).

Вакцинопрофилактика - введение профилактических вакцин - антигенных препаратов для созда­ния искусственного активного приобретенного иммунитета. Обладают высокой иммуногенностью (обес­печивают надежную противоинфекционную защиту), ареактивностью (не дают выраженных побочных реакций), безвредностью для макроорганизма и минимальным сенсибилизирующим действием.

По назначению вакцины делятся на:

• профилактические

• лечебные

По характеру микроорганизмов, из которых они созданы:

• бактериальные

• вирусные

• риккетсиозные

По способу приготовления:

• живые

• убитые

• химические

• анатоксины

• искусственные

• генноинженерные

• антиидиотипические (в стадии разработки)

• липосомальные (в стадии разработки)

 

Серопрофилактика и серотерапия - введение лечебно-профилактических сывороток и иммуно­глобулинов - биологических препаратов, содержащих антитела, для лечения и экстренной профилактики путем создания пассивного антитоксического, антибактериального или антивирусного иммунитета.