Заболевания, вызываемые хламидиями.

Методические указания

по теме 2.12: «Возбудители с внутриклеточным паразитизмом»

Тема 2.12.2 «Хламидии. Микоплазмы»

I Хламидии.

Хламидии – порядок мелких бактериоподобных неподвижных аспорогенных бескапсульных грам- облигатно-внутриклеточных паразитов млекопитающих и птиц из класса риккетсий. Описано одно семейство Chlamydiaceae, входит в порядок Chlamydiales, класс Rickettsii.

Семейство Chlamydiaceae включает в себя один род Chlamydia, в который входят 2 вида:

Ch.trachomatis – возбудитель трахомы, конъюктивита с включениями и венерической гранулемы.

Ch.psittaci – возбудитель пситтакоза и орнитоза.

Морфология и физиология:

Хламидии представляют собой облигатные внутриклеточные паразиты кокковидной формы, диаметром 0,30 – 0,45 (0,2-1,5) мкм, не образуют спор и капсул, не имеют жгутиков; грам-.

Хламидии размножаются только в цитоплазме клеток позвоночных. Метаболическая активность у них понижена, культивируются при 33-41^оС в желточном мешке куриного эмбриона. Они не способны синтезировать АТФ, и в этом отношении полностью зависимы от клетки, в которой развиваются. Их культивируют и в культурах клеток (HeLa и др.). До настоящего времени ещё не удавалось культивировать хламидии на питательных средах.

При подавлении кофакторов, в которых они нуждаются, хламидии могут катаболизировать глюкозу, что отличает их от риккетсий, а также пировиноградную или глутаминовую кислоты.

Рост хламидий ингибируется антибиотиками тетрациклинового, эритромицинового ряда и др.

В цикле развития хламидий наблюдается три стадии:

1. мелкие (0,2-0,4 мкм) элементарные тела, окруженные трехслойной стенкой, которые содержат в компактном состоянии генетический материал нуклеоида и рибосомы;

2. первичные тела, крупные (0,8-1,5 мкм), имеют фибриллы нуклеоида и рибосомальные элементы, покрытые тонкой стенкой, размножаются путем деления; дочерние клетки реорганизуются в элементарные тела, которые могут находиться внеклеточно и проникать в другие клетки;

3. промежуточная (транзисторная) стадия между первичными и элементарными телами.

Мелкие (элементарные) тела обладают инфекционными свойствами, крупные (первичные) тела выполняют вегетативную функцию. Рост, размножение и созревание хламидий завершаются в течение 40 часов.

Размножение хламидий в клетке ведет к формированию микроколоний (включений).

Микроколонии локализуются в цитоплазматическом пузырьке, образованном из мембраны клетки-хозяина, примерно через 40 часов и позже после заражения.

Хламидии обладают специфическими антигенами:

1.термостабильный Аг является группоспецифическим и представляет собой липогликопротеид, устойчивый к 100^оС;

2. термолабильный Аг является видоспецифическим.

Заболевания, вызываемые хламидиями.

1. Возбудитель трахомы - Ch.trachomatis – имеет кокковидную форму, по Романовскому-Гимзе окрашивается в голубой или фиолетовый цвет, паразитирует в цитоплазме эпителиальных клеток конъюктивы и роговой оболочки глаза человека. В электронном микроскопе при исследовании ультратонких срезов в цитоплазме пораженных клеток обнаружены микроколоний крупных первичных и промежуточных тел хламидий, окруженных везикулярной мембраной, которые напоминают включения, описанные в 1907г. С.Провачеком и Л.Гальберштедтером. Микроколонии не прорываются в цитоплазму (отличие от микроколоний возбудителя орнитоза).

Трахома (trachys – шероховатый, неровный) – заразный специфический кератоконъюктивит, протекающий, как правило, хронически; часто заканчивается рубцеванием конъюктивы.

Трахомой болеет только человек! Источником инфекции является больной человек! Заражение происходит через грязные руки, общее полотенце, при умывании в общем тазу, также мухами.

Наиболее заразны больные на ранних стадиях заболевания при наличии конъюктивального отделяемого. Распространению трахомы способствуют антисанитарные условия.

Лабораторная диагностика осуществляется путем обнаружения включений в клетках эпителия конъюктивы.

Лечени е успешно проводится антибиотиками (тетрациклины, эритромицин) и сульфаниламидным препаратам.

Профилактика включает своевременное выявление и полноценное лечение больных, диспансерное обслуживание очагов, оздоровление условий труда и быта, повышение материального и культурного уровня населения.

Очень высокая заболеваемость трахомой отличается в Индии и других странах Азии, в Африке. Трахомой болеют 400-500 млн. людей, проживающих в развивающихся странах; она является основной причиной слепоты.

2. Конъюктивит новорожденных, или бленнорея с включениями, вызывает Ch.trachomatis, болезнь протекает с явлениями инфильтрации конъюктивы, особенно нижнего века. Продолжительность острой фазы 10-15 дней, но заметная инфильтрации сохраняется в течение 2-3 месяцев и дольше.

Источником заражения являются матери, у которых возбудитель сохраняется в мочеполовой системе и передается во время родов новорожденным детям.

Взрослые заражаются при купании в небольших прудах и дехлорированных бассейнах. Заболевание у них проявляется в виде острого фолликулярного конъюктивита и продолжается около года.

Лечение проводится сульфаниламидными препаратами и антибиотиками тетрациклинового ряда.

Введение нитрата серебра для профилактики гонорейной бленнореи не предупреждает конъюктивит с включениями.

3. Возбудитель венерического лимфогранулематоза - Ch.trachomatis.

Болезнь передается половым путем, встречается в жарких субтропических странах. В странах СНГ случаев заболевания нет. Этот микроорганизм может вызывать уретриты, проктиты, артриты.

Лабораторная диагностика проводится при помощи микроскопии с обработкой мазков по Романовскому-Гимзе. Диагностическое значение имеют реакция связывания комплемента и аллергическая проба. Используют внутримозговое заражение белых мышей, у которых развивается менингит со смертельным исходом.

Лечение. Применяют тетроциклины, пенициллин и сульфаниламидные препараты.

4. Возбудитель орнитоза – Ch.psittaci – вызывает заболевания у многих видов птиц. Возбудитель открыт в 1933г. К.Майером.

Морфологически возбудитель представляет собой сферический тип клеток диаметром 0,2-1,5 мкм, размер клетки зависит от стадии развития. Элементарное тельце, являющееся инфекционной формой возбудителя, имеет в диаметре 0,2-0,4 мкм, инициальное тельце (вегетативная форма возбудителя) 0,8-1,5 мкм, грам-, хорошо окрашиваются по Романовскому-Гимзе в сине-фиолетовый цвет. В клетке-хозяине образуют микроколонии, или включения.

Экология и распространение. Орнитоз является зоонозной инфекцией, характеризующейся природной и хозяйственной очаговостью.

Источник инфекции – птицы, примерно 140 видов птиц. Большинство из них способно заносить инфекцию на большие расстояния по пути миграции. Образованию очагов орнитоза в природе способствуют колониальный образ жизни птиц, а также механизм распространения возбудителя среди них. У большинства переболевших птиц инфекция переходит в латентную форму, которая может генерализоваться в определенных условиях (при яйцекладке и высиживании птенцов, недостатке корма и др.), сопровождаясь выделением возбудителя с носовой слизью и экскрементами. Орнитоз у птиц может распространяться как алиментарным, так и аэрогенным путем, не исключается передача через эктопаразитов. Очаги заболевания могут возникать и в птицеводческих хозяйствах, где в основном и заражается человек.

В природе отмечена естественная инфицированность некоторых видов грызунов.

Различные штаммы Ch.psittaci, кроме орнитоза, способны вызывать такие заболевания, как энцефаломиелиты крупного рогатого скота, пневмонии некоторых животных, артриты и др.

Основными механизмами заражения человека воздушно-пылевой и воздушно-капельный (при вдыхании инфицированной пыли или пуха, при разделке птиц, уходе за птицей) и от больных людей.

Патогенез.

Орнитоз человека – острая инфекционная болезнь с характерным поражением легких. Возбудитель орнитоза поражает эпителиальные клетки бронхов, бронхиол, клетки легких и лимфоидной ткани. Размножение возбудителя в клетках приводит в конечном итоге к их разрушению. Возбудитель проникает в кровь и вызывает бактериемию, которая продолжается в течение недели, а иногда и дольше. В тканях и органах возбудитель проделывает сложные циклы, которые обусловливают нарушение клеточного метаболизма, развитие интоксикации и аллергии. Для орнитоза характерно возникновение пневмотического очага без одышки, кашля и болевых ощущений в грудной клетке. В разгар заболевания при рентгенологическом исследовании выявляется картина краевой лобулярной бронхопневмонии, рассасывание экссудата происходит медленно.

В результате бактериемии возбудитель может диссеминировать в паренхиматозные органы. Может длительно сохраняться в клетках лимфоидной ткани, обуславливая в последующем рецидивы болезни.

Иммунитет постинфекционный относителен и непродолжителен. Отмечены повторные заболевания, особенности среди лабораторных работников.

Лабораторная диагностика.

Основной лабораторной диагностики орнитоза являются методы возбудителя и обнаружения специфических антител в сыворотке больного.

Возбудитель обнаруживают в первые дни болезни в мокроте и крови. В крови он сохраняется до 5-7 дней, в мокроте – до 21-го дня болезни; отмечена максимальная длительность выделения хламидий с мокротой в продолжение 8 лет. Хламидии можно выделить из крови и мокроты больных людей внутримозговым заражением белых мышей и заражением куриных эмбрионов в желточный мешок. В мазках-отпечатках мозга или желточных мешков обнаруживают включения, которые выявляются по методу Романовскому-Гимзы.

Хороший результат дает и метод флюоресценции и аллергическая проба с орнитином, когда положительные реакции могут отмечаться у больных уже на 2-3 ий день болезни. Из серологических реакций применяют РСК, РТГА и РИФ.

Лечение. Назначаются тетрациклины, стрептомицин; при хронических формах рекомендуют вакцинотерапию.

Профилактика.

В очагах инфекции для профилактики орнитоза у людей используют антибиотики тетрациклинового ряда (экстренная профилактика), в настоящее время разработана инактивированная тканевая вакцина.

Профилактика орнитоза достигается предупреждением заноса инфекции в птицехозяйства, ранней диагностикой, изоляцией и госпитализацией больных в инфекционные больницы (в боксы). Обслуживающий персонал должен носить маски, руки регулярно дезинфицировать 0,5% раствором хлорамина (мокроту обеззараживают 4% раствором хлорамина, 5% раствором лизола).

II Микоплазмы

Отличительной от всех прокариотов особенностью микоплазм (Mycoplasma) является отсутствие клеточной стенки. Этот признак позволил выделить микоплазмы в самостоятельный класс Mollicutes, порядок Mycoplasmatales, семейство Mycoplasmataceae, род Mycoplasma, который включает патогенный вид M.pneumoniae и условно-патогенные – M.hominis и M.(Ureaplasma) u realyticum, а также комменсалов ротовой полости – M.orale, M.salivarium, и M.fermentans мочеполового тракта.

Морфология. Размер 150-350 нм – несколько мкм.

Клетки весьма полиформны (шаровидные, кольцевидные, коккобациллярные, нитевидные, ветвистые, в виде элементарных телец). В поздней фазе роста образуются цепочки кокковидных телец. Микоплазмы не имеют клеточной стенки, покрыты трехслойной ЦПМ толщиной 7,5-10 нм; в цитоплазме содержатся ДНК и РНК, рибосомы и другие клеточные компоненты. Микоплазмы грамотрицательны, окрашивают медленно.

Культивирование.

Большенство видов – факультативные анаэробы. Для их роста необходимы белки, стеролы, фосфолипиды, муцины, пуриновые и пиримидиновые основания. Растут на искусственных питательных средах с добавлением лошадиной сыворотки. Микоплазмы растут на жидких и полутвердых (1-1,3% агара) средах.

На агаризированных средах образуют характерные колонии, мелкие (10-500 мкм в диаметре), круглые, врастающие центральной частью в питательную среду. Вид колонии напоминает яичницу-глазунью. Оптимальное значение рН питательных сред для большинства видов 7-7,5, для Ureaplasma urealyficum – 6,5, что является отличительным признаком этого рода микоплазм t optim=37^оС.

Размножаются в 2% сердечно-мозговом агаре или бульоне с 30% сыворотки крови или асцитической жидкости. В бульоне микоплазмы развиваются с образованием помутнения и мелкозернистого осадка. На кровяном агаре образуют зону гемолиза вокруг колонии.

В связи с отсутствием клеточной стенки рост микоплазмы не угнетается пенициллином.

Микоплазмы хорошо размножаются в хорион-аллантоисе куриного зародыша.

В клеточных культурах размножаются на поверхности клеток.

Ферментативные свойства.

Протеолитическими свойствами не обладают, большая часть штаммов ферментирует глюкозу, некоторые из них образуют аргиназу, фосфотазу.

Антигенная структура.

Микоплазмы обладают видовой и типовой специфичностью. В семейство микоплазм входит 36 видов. Микоплазмы дифференцируют с помощью реакций ингибиции антисыворотками.

Токсикообразование.

Образуют термостабильный эндотоксин и гемолизин.

Резистентность.

Микоплазмы мало устойчивы к высокой температуре, при 35^о-55^оС погибают через 15 минут. Очень чувствительны ко всем дезинфицирующим веществам, к высушиванию, ультразвуку и другим физическим воздействиям; устойчивы к пенициллину, метициллину; чувствительны к эритромицину и другим макролидам.

Заболевания у человека – микоплазма-инфекции – заболевания вызываемые микоплазмами. Патогенные микоплазмы поражают органы дыхания, сердечно-сосудистую, мочеполовую и центральную нервную системы. Источник – больной человек. Передается воздушно-капельным путем. M.pneumoniae вызывает острые респираторные заболевания (ринит, бронхиолиты, иногда круп) и очаговые (атипичные) пневмонии. Поражаются главным образом дети в возрасте 3-7 лет. Заболевания, вызываемые микоплазмами, характеризуются затяжным течением и сопровождаются осложнениями (воспаление среднего уха, эмфизема легких и др.). Среди изолированных или полуизолированных групп детского и взрослого населения наблюдаются эпидемические вспышки.

M.hominis встречается при плевропневмонии, воспалительных процессах гениталий, неспецифических уретритах, простатитах, негонококковых артритах, трихомонадоподобных поражениях, эндокардитах, септических и других заболеваниях. Вероятно, это микоплазма очень широко распространена среди животных и людей, но её выявление представляет большие трудности; она обладает условной патогенностью и вызывает заболевания у человека при резком снижении его общей резистентности.

Ureaplasma urealyticum часто высевают из урогенитального тракта и, возможно она вызывает уретриты и другие воспалительные процессы.

Иммунитет при заболеваниях человека не изучен. Продолжительность иммунитета непродолжительный. Он обусловлен гуморальными антителами, а также факторами клеточного иммунитета.

Лабораторная диагностика.

Основывается на данных серологических исследований. Для диагностики используют РСК, РИФ, РНГА (титр 1:32 и выше диагностические). Выделение возбудителя и постановка реакции ингибирования роста возможны только в специальных лабораториях. Выделение микоплазм проводится обычно в остром периоде болезни путем высева мокроты, отделяемого слизистой оболочки носоглотки, зева, уретры на специальные питательные среды.

Идентификация выросших культур осуществляется изучением культуральных свойств, ферментативной и гемолитической активности, определением видовой принадлежности с помощью специфических антисывороток в реакциях ингибиции роста, РСК и др.

Разработан метод экспресс – диагностики, проводимой с помощью специфических меченых флюоресцирующих антисывороток..

Лечение. Проводится окситетрациклином, стрептомицином, левомицетином, эритромицином.

Профилактика. В США получена вакцина из убитых микоплазм для специфической профилактики атипичных пневмоний.