,, .
1. " " - -- (--). , - , "" , . , , - - . "" , , . , - - (--).
2. , -.
:
() ( , , ). " " --: - (5') - , 3' - poly ( ) - - .
.
3. :
-
- -
- - -
- 2- ( ).
-
, , . - () - (, -) - "" . , -, , - .
"" - (" ).
, -, , , -, - . ...
, - (, , ),
- - .
- , .. .
4. - , , .
:
) ,
) - , -,
) ,
) 1 - ( - ), 3 -, .
|
|
14 ( ):
(, ).
: .
.. (), - ( ), ( "", ). : - - -.
?
1. .
) - "" -, , , -, - . --> .
) - , - --> -, -, -, --> ( ) .
"" , , - (, ).
2.
) - -, --> -, .
) ( ), "" - (+ ) --> - - - --> .
"", - .
() , , --> ( ) .
15 ( ?):
: 1) .2) , . 3) , .. -. ( ) 4)- , - 5) 6) 7) , - .
16 ( . , . . ):
: , , , , , , .
.
|
|
- , , . 1-3 . , 90% .
.
(G1), . , , . . , (2),
, . , 22;
(S) , , , , . , : 24; (G2) : , ; . , 24.
: , , .
. . . 24.
. 24.
, . 44.
. , . . (44) 22.
, . , , , .
, (, , , .) . - . - . - . . . - - ,
, , , .. ., . .
17 ( . , , , . ):
:
1. ( , , ).
2. , , , , (, , ). 40- 45
3. , , .
- , , , , , , . 5-35
|
|
- , . 0.2 0.5
-
18 ( - . . ):
.
Escherichia coli. ( ) (ori C, 245 ..) 13 9 (.5). 10-20 Dna A (9-mers) , ( , .. ). Dna C Dna B () . Dna B .
-. - b- . SSB-, , . II (), (..4), I, (..3) .
-. .
- III , - 1000 2000 . - . 5- c - I, -. 3- 5 , - . - II .
Tus-. , .
.
E.coli - (. .2).
in vitro. SV40 in vitro . E.coli. ; ; , . .7, SV40 , , , T antigen, Tag.
. A (RPA), - ( SSB- E.coli). - α (Pol α) . -, Pol α, , ori . Pol α C (RFC).
|
|
c 3-b Pol α - PCNA (proliferating cell nuclear antigen) Pol α , . Pol δ PCNA 3- . PCNA Pol δ , . , PCNA β- III E.coli, .. (), . , , ; PCNA-, β- III E.coli.
- Pol α. , RFC .
, E.coli , , . : 1. I 3- ( -- 5- ) 2. - I , (- ) 3. II ( ).
, , SV40 in vitro. , SV40 in vitro - T . . , ori 6 (ORC), . .
, - ; 25-200 TTAGGG. . , - , 5- , -, .. 3- . - , , . , , . , -, . . , , . , .
G1 2n2c
S
G2 2n4c
Gh 2n2n
: 2n4n à2n2c
19 ( . () ):
: ( , ) (, ). , .
20 (, . . , . ):
|
|
. . . 24. . 24. , . 44. . , . . (44) 22.
, . , , , .
- - .
- .
.
21 (, . . ):
I , , . .
- I .
- I , . , , - , , , , .
- I .
, : S- , .
- II , , , .
- II , .
- II .
- II .
() ; .
, , , .
( ), .
" ", .
1 2 . . .
22 ( ):
: , ( , ), , , . .