Лекции.Орг


Поиск:




Категории:

Астрономия
Биология
География
Другие языки
Интернет
Информатика
История
Культура
Литература
Логика
Математика
Медицина
Механика
Охрана труда
Педагогика
Политика
Право
Психология
Религия
Риторика
Социология
Спорт
Строительство
Технология
Транспорт
Физика
Философия
Финансы
Химия
Экология
Экономика
Электроника

 

 

 

 


Биохимические признаки коринебактерий.




План

 

1.Таксономия возбудителей дифтерии.

2. Морфология и биологические свойства.

Культивирование. Токсинообразование.

3. Источники инфекции. Механизм заражения.

Патогенез, клинические формы дифтерии.

4. Особенности иммунитета. Профилактика дифтерии.

 

 

 

Дифтерия.

Таксономия возбудителя дифтерии.

Возбудитель дифтерии – Corynebacterium diphtheriaе (coryna – булава, bacterium – палочка, diphthera – пленка) относится к роду Corynebacterium семейству Corynebacteriасeae, отделу Firmicutes. Открыл коринебактерии дифтерии Э. Клебс в 1883 г., а выделил в чистой культуре

Ф. Леффлер в 1884 г. (палочка Клебса – Леффлера).

Кроме патогенных для человека и животных вида С. diphtheriaе в род Corynebacterium входят:

1) коринебактерии, патогенные для растений;

2) непатогенные коринебактерии:

а) дифтероиды – С. xerosis, C. ulcerans, C. pseudotuberculosis;

б) псевдодифтерийные (ложнодифтерийные, палочки Гоффмана) –

С. рseudodiphtheriticum (C. hoffmfni).

Биологические особенности возбудителя дифтерии, имеющие лабораторно-диагностическое значение.

Морфология.

Коринебактерии дифтерии представляют собой прямые, или слегка изогнутые, полиморфные палочки размером 1-8мкм в длину и 0,3 – 0,8 мкм в ширину, имеющие булавовидные утолщения на обоих концах или по ходу длины палочки (зерна Бабеша – Эрнста), т.е. зерна волютина.

При окраске по Леффлеру ( щелочным метиленовым синим в течение 10 мин.) эти полюсные включения окрашиваются в фиолетовый (темно-синий) цвет, а цитоплазма палочек – в голубой.

При окраске мазков по Нейссеру – зерна Бабеша-Эрнста окрашиваются в коричневый, черный или темно-синий цвет, а цитоплазма палочек – в желтый цвет; при окраске пиоктонином включения окрашиваются в темно-фиолетовый цвет, а цитоплазма палочек – в светло- фиолетовый цвет.

По Граму коринебактерии равномерно окрашиваются в фиолетовый цвет, т.е. грам +.

Спор и капсул не образуют, неподвижны. Благодаря разламывающему механизму деления их клетки в мазке располагаются под углом и образуют букву игрек, или римские V – Х, или принимают вид растопыренных пальцев.

Полиморфизм их проявляется в появлении ветвистых, нитевидных форм, кокковидных и дрожжеподобных образований.

В отличие от истинных палочек Леффлера дифтероиды и ложнодифтерийные палочки Гоффмана в мазках располагаются в виде частокола, а зерна волютина имеют на одном конце или совсем не имеют.

 

Культуральные свойства.

Коринебактерии дифтерии – факультативные анаэробы или аэробы; optim. t° = 370C, границы роста 15° – 400С; рН среды 7,2 – 7,6. Они не растут на обычных питательных средах. Культивируют их на средах, содержащих кровь или сыворотки, а также теллурит калия.

На основании культуральных и ферментативных свойств С. diphthemae подразделяются на 3 биовара: gravis, mitis, intermedius.

Первичные посевы материала при выделении коринебактерий дифтерии производят на пластинчатые элективные среды (в чашках Петри): кровяно-теллуритовый агар - КТА, среда Клауберга; сывороточный агар с теллуритом калия и цистином – «Т», среда Тинсдаля – Садыковой; кровяной агар 5 – 10%; 20% сывороточный агар, а также на дифференциально-диагностическую среду Бучина.

На этих средах С. diphtheriaе образуют колонии в зависимости от биовара; на среде Клауберга (через 24-48 часов):

var gravis - (грубый, шероховатый) формирует плотные сухие шероховатые (R – формы), розеткообразные колонии диаметром 1,5 – 2 мм, с волнистым краем серого или темно-серого (черного) цвета. Колонии хрупкие – при раздавливании петлей они крошатся на мелкие кусочки. Их можно также «двигать» петлей по поверхности агара без нарушения целостности. На средах с кровью не дают гемолиза.

var mitis (тонкий, гладкий)- образует серые матовые колонии диаметром 1,5 – 2 мм с ровным краем и гладкой поверхностью, блестящие (S – формы). Характерна вариабельность размеров колоний. Обычно на кровяном агаре имеют небольшую зону гемолиза.

var intermedius, (промежуточный) образует колонии RS – формы: мелкие, серые, прозрачные колонии диаметром 0,5 – 1 мм.

На среде Тинсдаля вокруг колоний всех биоваров образуется темно-коричневый ободок.

Кроме элективных сред первичные посевы материала можно производить на дифференциально-диагностическую среду Бучина (хинозольная среда). На ней колонии С. diphthemae приобретают фиолетовый цвет вследствие восстановления индикатора, т.е. как цвет среды. А дифтероиды и палочки Гоффмана образуют колонии бесцветные или голубоватые на фиолетовом фоне среды.

На сывороточном и сахарном бульонах биовар gravis образует пленку и зернистый осадок; биовар mitis – диффузное помутнение; биовар in termedius, - муть и зернистый осадок.

Чистую культуру коринебактерий выделяют на скошенных элективных средах Ру (свернутая лошадиная сыворотка) и Леффера (3 части бычьей сыворотки и 1 часть сахарного бульона), которые выглядят одинаково – косячки белого цвета. Можно использовать также и скошенный 20% сывороточный агар.

На средах Ру (Леффера) коринебактерии дифтерии через 8 – 14 часов вырастают в виде изолированных небольших (точечных) выпуклых желтовато-коричневых колоний с гладкой или слегка зернистой поверхностью, напоминающих «шагреневую кожу».

Ложнодифтерийные бактерии культивируются на всех средах, в том числе и на СПА, где образуют сухие мелкие колонии серого цвета, а на бульонах вызывают помутнение.

Ферментативные свойства.

Коринебактерии дифтерии всех 3-х биоваров не свертывают молоко, не разлагают мочевину, не образуют индол, слабо образуют сероводород, восстанавливают нитраты в нитраты, восстанавливают теллурит калия в сульфид теллурита, вследствие чего на среде Клауберга их колонии становятся серыми или черными; все обладают ферментом цистиназой, чтоиспользуется для дифференциации от непатогенных коринебактерий.

Все 3 биовара на обычном коротком «пестром» ряде Гисса ферментируют до кислоты глюкозу и мальтозу, но не ферментируют лактозу, маннит и сахарозу.

Однако для изучения ферментативных свойств коринебактерий используют жидкие среды (но без поплавков, т.к. ферментация проходит с образованием кислоты) и другой состав короткого пестрого ряда Гисса: сахароза, глюкоза, крахмал и мочевина.

Сахароза, глюкоза и крахмал до посева имеют светло-желтый цвет, при ферментации до кислоты цвет меняется на розовый. Мочевина до посева темно-желтого цвета, при расщеплении цвет меняется на ярко красный (малиновый).

Все три биовара ферментируют глюкозу, а var gravis, расщепляет и крахмал, что является дифференциальным признаком.

 

Биохимические признаки коринебактерий.

Вид коринебактерий Сахароза Глюкоза Крахмал Мочевина Цистиназа
С. diphtheriaе var gravis var mitis var intermedius - - - + + + + - - - - - + + +
C. pseudodiphtheriticum - - - + -
С. xerosis + + - -, + -
C. ulcerans - + + + +
C. pseudotuberculosis - + + + +




Поделиться с друзьями:


Дата добавления: 2016-11-24; Мы поможем в написании ваших работ!; просмотров: 1568 | Нарушение авторских прав


Поиск на сайте:

Лучшие изречения:

Человек, которым вам суждено стать – это только тот человек, которым вы сами решите стать. © Ральф Уолдо Эмерсон
==> читать все изречения...

2362 - | 2216 -


© 2015-2025 lektsii.org - Контакты - Последнее добавление

Ген: 0.01 с.