Методические указания
по теме 2.19 «Возбудители вирусных инфекций. РНК-содержащие вирусы. Семейство ортомиксовирусов (вирусы гриппа) и семейство парамиксовирусов (вирусы парагриппа, эпидпаротита и кори)»
I Семейство ортомиксовирусов (вирусы гриппа)
1. Таксономия. РНК- содержащие вирусы, семейство Orthomyxoviridae, род I nfluenzavirus включает вирусы гриппа типов А и В и род I nfluenza – вирус гриппа тип С.
Ультраструктура.
Все 3 типа вирусов гриппа – сложные вирионы, имеющие сферическую форму, диаметром 80-120 нм. Нуклеоид представлен однонитчатой линейкой РНК, окружен капсидом. Нуклеоид имеет спиральный тип симметрии. Имеет суперкапсид с шипами.
3. Биологические свойства.
Культивируют вирусы гриппа:
- в амниотической и аллантоисной оболочках куриного эмбриона;
- в первично трипсинизированных культурах почечных клеток обезьян, эмбриона человека и телят. Через 48-72 часа вызывают ЦПД в виде накопления вакуолизированных клеток, которые затем дегенерируют или отделяются от стекла. Некоторые штаммы вирусов гриппа способны образовывать бляшки;
- реже в организме хорьков, белых мышей, сирийских хомяков (после интраназального заражения у животных развивается гриппозная пневмония).
Резистентность: вирусы гриппа в воздухе сохраняют инфекционные свойства в течение нескольких часов, чем выше tо и влажность, тем быстрее происходит инактивация вируса. Чувствительны к УФО, дезинфицирующим растворам, при tо 50-60оС погибают через несколько минут. Длительно сохраняется в замороженном состоянии и в глицерине.
4.Антигенные свойства.
Вирусы гриппа содержат внутренние сердцевидные типоспецифические Аг (S), по которым они и подразделяются на типы А, В, С. Вирусы типов А, В и С не имеют родственных антигенов, и между ними невозможна генетическая рекомбинация, поэтому их относят к разным видам. И есть поверхностные Аг, которые представлены антигеном (Н) и нейраминидазой (N) (оболочечный V антиген). В настоящее время описано около полутора десятков гемагглютининов и нейраминидаз. В зависимости от их комбинации вирус гриппа А имеет 4 подтипа: HON1, H1N1, H2N2, H3N2, которые в разные годы вызывали тяжелые эпидемии гриппа. Каждые 10-15 лет в результате генетических рекомбинаций между вирусом человека и вирусами животных и птиц происходят значительные антигенные сдвиги и появляются новые подтипы.
PS. Сейчас представляет возможную опасность штамм вируса гриппа H5N1, который вызывает птичий грипп.
Патогенез, клиника, иммунитет.
Грипп – острая инфекция дыхательных путей, периодически приобретающая эпидемический характер. Вирус гриппа тип А поражает человека и животных, вызывая интенсивные эпидемии. Вирусы типа В и С поражают человека, тип В вызывает небольшие эпидемические вспышки, а тип С – редкие спорадические заболевания. Восприимчивость, высокая, особенно зимой. В 1918 г. тип А (H1N1) вызвал пандемию «испанки», которая унесла жизни более 20 млн человек.
Источник инфекции – больной человек, больное животное.
Путь передачи – воздушно-капельный.
Патогенез: вирус внедряется в эпителиальные клетки слизистой оболочки верхних дыхательных путей, затем попадает в кровь – вирусенемия, с током крови разносится по всему организму, поражая различные органы.
Инкубационный период длится 1-2 суток.
Общие симптомы: лихорадка, озноб, головная боль, ломота в теле, разбитость. Затем присоединяются кашель и насморк. Грипп без осложнений длится 5-6 дней. Тяжесть заболевания обусловлена осложнениями: пневмония, отек легких, поражение ЦНС, миокардит Абрамова-Финдлера и др.
Иммунитет: постинфекционный носит видоспецифический характер и продолжается от 1-2 (А-вирус) до 3-5 лет (В-вирус) или пожизненно (С-вирус).
Перекрестный иммунитет к подтипам А-вируса не развивается.
6.Лабораторная диагностика.
Материал: мазки-отпечатки со слизистой оболочки носовой полости, отделяемое носоглотки, секционный материал (кусочки легкого).
Методы диагностики:
1.Экспресс-диагностика – выявление вирусного Аг с помощью РИФ в мазках-отпечатках (зеленовато-желтое свечение).
2. Серологический – ИФА, РСК, РТГА, РП в геле, РН – кровь берут в первые дни заболевания и в период выздоровления. У переболевших титр Ig увеличивается в 4 раза и более.
3. Вирусологический:
- носоглоточными смывами заражают 9-14 дневные куриные эмбрионы, культивируют при 33оС. Через 3-4 дня ставят РГА, добавляя к амниотической и аллантоисной жидкости эмбрионов эритроциты кур, морских свинок или О-группы крови человека. Вид вируса определяют с помощью РТГА, РН, РСК;
- носоглоточными смывами заражают культуру клеток и через 3-4 дня ставят реакцию гемадсорбции для обнаружения вируса. Идентификацию вируса проводят поэтапно: тип определяют с помощью РСК, а подтип – с помощью РТГА и РН.
4. Риноцитоскопия мазков-отпечатков, обработанных флюоресцирующими типоспецифическими антигриппозными сыворотками, и окрашенных по Романовскому-Гимзе. Микроскопируют и обнаруживают вирусные включения, которые в мазках, обработанных флюорохроном, становятся огненно-красными, а в окрашенных по Романовскому-Гимзе – сине-фиолетовыми.
7. Средства специфической терапии:
· противогриппозный донорский иммуноглобулин;
· противогриппозная сыворотка;
· лейкоцитарный интерферон;
· ремантадин, адапромин, дейтифорин, виразол, арпетол (противовирусные препараты);
· иммуномодулирующие препараты: дибазол, продигиозан, курантил (дипиридамол);
· антибиотики только при осложнениях.
Средства специфической профилактики:
· живая очищенная и концентрированная цельновирионная гриппозная вакцина (содержит по 20 мкг вируса гриппа А двух подтипов H1N1 и H3N2 и 26 мкг вируса типа В), она применяется подкожно однократно по 0,5 ил или двукратно – интраназально, по 0,25 мл в каждый носовой ход с интервалом 21-28 дней;
· трехвалентная полимер-субъединичная вакцина Гриппол, содержащая поверхностные антигены вируса гриппа трех типов с иммуностимулятором полиоксидонием. Вводят однократно подкожно по 0,5 мл детям с 3 лет и взрослым;
· инактивированная формолвакцина французской фирмы «Пастер-Мерье» Ваксигрип, содержащей вирус гриппа трех штаммов. Ею вакцинируют лица, старше 65 лет, взрослых и детей с хроническими заболеваниями. Вводят подкожно или внутримышечно 0,5 мл;
· ограниченно профилактика гриппа проводится ремантадином, арбидолом, оксолином, интерфероном, иммуноглобулином, декариесом.
