Правила подсчета

Количество клеток микроорганизмов подсчитывают с иммерсионным объективом 90´ в квадратах окулярной сетки или в поле зрения микроскопа. Правила подсчета аналогичны тем, которые изложены для метода Виноградского – Брида. Количество клеток в 1 мл исследуемого субстрата вычисляют по формуле:

где М – количество клеток в 1 мл исследуемого субстрата;

а – количество клеток в квадрате окулярной сетки (поле зрения);

s – площадь квадрата окулярной сетки (поля зрения), мм²;

F – площадь мембранного фильтра, мм²;

V – объем профильтрованной жидкости, мл;

10⁶ – коэффициент перевода [мм²] в [мкм²].

Метод микрокультур

Метод позволяет получить быстрый ответ о биологическом состоянии объекта. Для получения микрокультур в центр стерильного предметного стекла с начерченной миллиметровой сеткой площадью

5 см² наносят определенный объем (0,05 мл) разведенной культуры. Сюда же прибавляют две или три капли питательной среды, расплавленной и охлажденной до 45 ºС, перемешивают ее с посевным материалом и размазывают по всей поверхности сетки. Полученный препарат накрывают покровным стеклом, кладут в стерильную чашку и ставят в термостат при температуре от 30 ºС до 37 ºС на 8 ч. Затем его вынимают, подсушивают и микроскопируют. Колонии можно подкрасить метиленовым синим Леффлера, разбавленным в соотношении 1:4. Окрашенный препарат снизу протирают, мазок накрывают покровным стеклом и подсчитывают колонии под микроскопом.