Оптическая плотность (тетрациклина гидрохлорид)

10 мл 0,01 % раствора вещества в 0,01 моль/л. растворе хлористоводородной кислоты вносят в мерную колбу емкостью 100 мл, прибавляют 75 мл воды и 5 мл 5М раствора гидроксида натрия, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают. Оптическую плотность определяют при длине волны 380 нм в кювете с толщиной слоя 1 см точно через 6 минут после добавления раствора гидроксида натрия. Оптическая плотность при длине волны 380 нм должна быть не менее 0,36 и не более 0,38.

Окситетрациклин:

Реакция с концентрированной серной кислотой.

Равномерно нанести 0,5 мл концентрированной серной кислоты на внутреннюю поверхность цилиндра емкостью 50 мл. На слой кислоты равномерно распределить 0,01 г вещества. Появляется огненно-красное окрашивание, переходящее постепенно в красно-оранжевое. При добавлении примерно 10 мл дистиллированной воды окрашивание становится золотисто-желтым. Эффект реакции наблюдают в проходящем свете.

Реакция с концентрированной серной кислотой.

К 0,001-0,002 г вещества прибавляют 2 мл концентрированной кислоты серной; появляется фиолетовая окраска.

Реакция образования ангидротетрациклина с концентрированной соляной кислотой.

Помещают 0,005-0,01 г вещества в термостойкую пробирку, приливают 2 мл воды и 2 мл концентрированной соляной кислоты, перемешивают. Пробирку помещают в кипящую водяную баню на 2-3 минуты. Появляется оранжево-красная окраска и зеленовато-желтая флюоресценция, наблюдаемая в УФ-свете.

Реакция изомеризации под действием натрия гидроксида.

0,01 г вещества растворяют в 2 мл 10% раствора гидроксида натрия; появляется коричнево-желтое окрашивание; нагревают в кипящей водяной бане в течение 1 – 2 мин – появляется синяя флюоресценция, наблюдаемая в УФ-свете.

Реакция со спиртовым раствором хлорида окисного железа.

Помещают 2 мл 0,25% раствора вещества в цилиндр емкостью 50 мл, разбавляют дистиллированной водой до 25 мл, перемешивают и прибавляют пипеткой 0,2 мл спиртового раствора хлорида окисного железа. Раствор окрашивается в коричневый цвет. Эффект реакции наблюдают в проходящем свете.

Реакция с диазореактивом.

Помещают 5 мл 0,25% раствора вещества в пробирку и прибавляют 0,5 мл диазореактива. Через 3-4 минуты появляется яркое желтое окрашивание с зеленоватым оттенком. Эффект реакции наблюдают на белом фоне и в проходящем свете.

Реакция с аммиачным раствором нитрата меди.

Помещают 5 мл 25 % раствора вещества гидрохлорида в термостойкую пробирку и прибавляют 0,1 мл аммиачного раствора нитрата меди. Появляется оливково-зеленое окрашивание. Пробирку погружают в кипящую водяную баню на 3-4 минуты. Оливково-зеленое окрашивание переходит в темно-коричневое.

Оптическая плотность (окситетрациклина гидрохлорид)

Величина оптической плотности 0,002% раствора вещества в 0,01 моль/л хлористоводородной кислоте должна быть не менее 0,54 и не более 0,58 (удельный показатель поглощения от 270 до 280) при длине волны 353 нм

 

Задание II. Выполнить количественное определение стрептомицина сульфата.

Около 0,1 г вещества (точная навеска) растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 100 мл, доводят до метки тем же растворителем. К 5 мл этого раствора помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляют 5 мл 0,2 моль/л раствор гидроксида натрия и нагревают на водяной бане в течение 10 мин. Охлаждают во льду точно 5 мин, прибавляют 3 мл раствора железо-аммониевых квасцов и доводят водой до метки и перемешивают. Через 20 минут после прибавления железо-аммониевых квасцов измеряют оптическую плотность полученного раствора при длине волны 525 нм в кювете с толщиной слоя 1 см. В качестве раствора сравнения используют раствор приготовленный аналогичным образом, но без добавления испытуемого вещества. Рассчитывают содержание стрептомицина сульфата, используя величину поглощения .

Содержание стрептомицина сульфата рассчитывают по формуле:

где: А – оптическая плотность фотометрируемого раствора; V₁ и V₂ – объемы мерных колб, используемые для приготовления фотометрированного раствора, мл; V – объем аликвоты, взятый для приготовления фотометрируемого раствора, мл; а – навеска анализируемого вещества, г; l – толщина кюветы, см.

Содержание стрептомицина сульфата должно быть не менее 90,0%

Занятие №3.