Б) Приготувати мазок із середовища Кітта-Тароцці з посівом ґрунту, пофарбувати за Грамом, мікроскопувати

Матеріали та обладнання: посів ґрунтової бовтушки на середовище Кітта-Тароцці, бактеріальна петля, стерильна піпетка Пастера, барвники за Грамом, спиртівка, сірники, марлеві серветки, склограф.

Порядок роботи:

1. Бульйонну культуру набрати пастерівською піпеткою, яку занурити через шар вазелінової олії на дно пробірки, затиснувши її.

2. Після занурення пастерівської піпетки відкрити її отвір, набрати бульйонну культуру, а потім знову затиснути піпетку.

3. Бульйонну культуру нанести на предметне скло, піпетку занурити в дезрозчин.

4. Приготувати фіксований препарат із суміші мікроорганізмів, дотримуючись усіх правил (див. практичну роботу 4 заняття 1) та пофарбувати його за методом Грама.

5. Результати мікроскопії (характеристику морфологічних та тинкторіальних властивостей бактерій) занести до таблиці:

Назва препарату, метод фарбування Рисунок Характеристика бактерій (мікроскопічна картина)

Мазок з ґрунтової бовтушки, фарбування за Грамом ________________________________________ ________________________________________ ________________________________________

Висновок: ______

Алгоритм виділення чистої культури анаеробних бактерій

Дослідний матеріал для накопичення анаеробів засівають у спеціальне поживне середовище для культивування анаеробів (середовище Кітта-Тароцці, бульон Мартена та ін.). Посіви заливають вазеліновою олією та інкубують у термостаті

Методи отримання ізольованих колоній

Метод Цейслера

Метод послідовних розведень Вейнберга

ІІІ етап

V етап

Урахування та аналіз результатів. Остаточна відповідь аліз результатів дослідження. Відповідь

ІV етап

Культуру, що виросла після інкубації у середовищі Кітта-Тароцці, перевіряють на чистоту та ідентифікують за морфологічними, тинкторіальними, культуральними, біохімічними, антигенними та іншими властивостями

Вивчають культуральні властивості бактерій. З найбільш типових колоній готують фіксовані препарати, фарбують їх за Грамом. Залишок колонії засівають на середовище Кітта-Тароцці для накопичення чистої культури

ІІ етап

Враховують зміни, які відбулися у середовищі накопичення (поява помутніння, газоутворення)

Бульонну культуру набирають пастерівською піпеткою, яку занують через шар вазелінової олії на дно пробірки

Готують фіксовані препарати, фарбують їх за Грамом з метою вивчення морфологічних властивостей

Пересів із середовища накопичення на спеціальні щільні поживні седовища (напр., агар Цейслера, середовище Вільсона-Блера) з метою отримання ізольованих колоній. Інкубація посівів у термостаті

І етап

Підпис чергового студента ______________

Підпис викладача ______________________

Практичне заняття ДАТА _______________

Тема. «БАКТЕРІОФАГИ. ГЕНЕТИКА БАКТЕРІЙ»

Питання для підготовки

1. Природа та властивості бактеріофагів.

2. Вірулентні та помірні фаги. Механізми їх взаємодії з бактеріальною клітиною.

3. Використання бактеріофагів (фагоідентифікація, індикація, профілактика, терапія).

4. Форми мінливості мікроорганізмів. Фенотипова мінливість.

5. Генотипова мінливість (мутації та генетичні рекомбінації).

6. Плазміди – позахромосомні фактори спадковості.

7. Практичне значення вчення про генетику мікроорганізмів.

8. Принципи генетичних методів діагностики інфекційних захворювань.

9. Основні принципи генної інженерії.

Список літератури

1. Медична мікробіологія, вірусологія та імунологія: підручник для студ. вищ. навч. закл. / за редакцією В.П. Широбокова. – Вінниця: Нова Книга, 2011. – С. 139 - 151.

2. П’яткін К.Д., Кривошеїн Ю.С. Мікробіологія. – К.: Вища школа, 1992. – С. 28 - 39.

2. Борисов Л.Б. Медицинская микробиология, иммунология, вирусология. - М.: МИА, 2002.– С. 84 – 120.

3. Коротяев А.И., Бабичев С.А. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология. – СПб., 2002. – СПб, 2002. – С. 85 - 106.

4. Поздеев О.К. Медицинская микробиология / под ред. акад. РАМН В.И.Покровского. – М.: ГЭОТАР, 2001. – С. 80 -89;1 07 – 112.

5. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология: учебник/ под ред. А.А. Воробьева. – М.:Медицинское информационное агентство, 2004. – С. 104 - 115.

6. Руководство к лабораторным занятиям по медицинской микробиологии / под редакцией Л. Б. Борисова. – М.: Медицина, 1993. – С. 54 – 59.

7. Клименюк С.І., Ситник І.О., Творко М.С., Широбоков В.П. Практична мікробіологія: посібник. – Тернопіль: Укрмедкнига, 2004. – С. 111 - 113.

Практична робота 1. «Вивчення демонстрації»