70 , . , , . , Dicer (. ), . ( ) , , . , (. 26, ).
. (si ). , (), , . , - , . , Dicer 20-23 . si. . , , . , si, . , . , , , . , , , ( 26, ).
- . ? . , , . , . , . , Dicer - -, [O29] , . , . , , , , .
|
|
. , , (, , mi, si), . linc (. large intervening non-coding RNAs, ). , . , , . linc , , , , , , , . , , . linc . ( 27).
14. .
-. , , , . , , .
(. 6), , (. 27, ). , : 1) , , ; 2) ( 3'- 5'- ); 3) - , , 3'- 5'- . 5'→3'
, , .
. , , . , () , , . , . ( 27, ).
. , . - . , . , 46 2 10 , 5 30 !
|
|
. . , , , . . , , (. 27, ). . , .
, . . , . , . - , , - . () , () , (. 27, ). , , -, . .
. - , . , 3'--. 5'- ? -, - ( . primer ). (< 20 ) , -. - , -, 3'-- .
, . -, . , . , ( ) . SSB - , . SSB - (. single strand binding ) , 1968 ., 20-40º. SSB - . , , , . . , , . , , . , . , , , (. 27, ). SSB . , . , -.
|
|
. , . , , , (. 27, ). . , , , . ? .
. , . . : , , . . 360º . . , (. 28, -). , - . , .
, - , SSB -. ori (. origin ). 245 . . coli (. 28, ). - ( I, II III). III.
, , , . - III . - - I. .
15. .
. -, , - , . , . . , , . . , , ori , (. 29, . 4). -, , , , , ori. . , . ori. ori . , . E. oli , 1000 .
|
|
4. -
| |||
, . | ../. | ||
E. oli | 1 | 4200 | 50000 |
500 | 40 | 3600 | |
3500 | 40 | 2600 | |
15000 | 200 | 500 | |
25000 | 150 | 2200 | |
35000 | 300 | 2200 |
, . , (200-400 ) , (1000-2000 ), - , (. 4).
- - ( . hybrid), , , , , . -, .
3'- . -, 3'- , , 10-20 ( - ). 3- (. 30, ). . . , - , 3'-- , . , .
. 3'- . Tetrahymena thermophila, , . -, 3'- (6-8 ) . TTA. , , . . 150 1400 , 450 . , , , , .
,
3'- . - , , 3'-- , , , . , , .
? , , , , 3'--, , . . . , . , (. 30, ). , , . .
|
|
. (. 19). , . , . , .
16. .
, . . , , . , . , .
. . . 5000 , 10000. N- . .
- ( ). - 3- 5- . 5- , , , 2-3 . 3-4 -, 3- . , (. 31). - , , , . , .
. , , ( , ), , .
, . , , , . , , . (. 32). , . , ; , . . .
N- , . -N-, -N- -N-. , -. , .
. , . , , , , (. 33).
. . 300-600 , .
. . , ( ) , , 12-14 -, . , .
. . , , . , , . , .
. . , .
II.
17. .
. ? , , . , , , , . , , . , , , , . , , ʻ. , . , , . , (. 6). , .
, , (- ) . (, , ) . , - . , , , . , , , . . , , , ( ). ( ). 5- 3- .