Качественная реакция на кровяные пигменты

К числу патологических составных частей мочи относятся также кровь (точнее, форменные элементы) и кровяные пигменты (гемоглобин или метгемоглобин). В тех случаях, когда появляется кровь в моче, говорят о гематурии, а при наличии кровяных пигментов — о гемоглобинурии. Наличие гемоглобина в моче в случае, как гематурии, так и гемоглобинурии, можно легко обнаружить спектроскопическим методом или с помощью специальных химических проб (гваякой, бензидиновой, пробы Геллера). Моча при гематурии непрозрачна, имеет красноватый оттенок, интенсивность которого зависит от количества форменных элементов крови. В осадке под микроскопом выявляются эритроциты и лейкоциты; в отличие от гемоглобинурии гематурия развивается при повреждении сосудов мочеполовых путей (мочевыми камнями, при раке мочевого пузыря, воспалении мочевого пузыря и цистите). Гемоглобинурия наблюдается при ряде заболеваний, связанных с усиленным гемолизом (распадом) эритроцитов. Моча при этом бывает окрашена в красный или, чаще, в кофейно-бурый цвет. В случае гематурии и гемоглобинурии моча дает положительную реакцию на белок.

Бензидиновая проба

Принцип метода: бензидиновая проба основана на окислении бензидина атомарным кислородом, который образуется при разложении пероксида водорода кровяным пигментом — гемоглобином, оказывающим пероксидазное действие.

Ход определения:

В пробирку накапайте 20 капель свежесобранной нефильтрованной мочи, охладите. Добавьте равный объем раствора бензидина в уксусной кислоте и несколько капель 0,5% пероксида водорода. При наличии гемопротеида моча окрашивается в синий или зеленый цвет.

Качественные реакции на желчные пигменты

Желчные пигменты (билирубин, биливердин и др.) появляются в моче в виде щелочных солей при желтухах. Эти соединения образуются в основном из гемоглобина при распаде эритроцитов. Патологическая моча имеет желтовато-коричневое или зеленое окрашивание. Большинство химических проб (Гмелина, Розенбаха), доказывающих их присутствие, основано на способности билирубина и биливердина легко окисляться с образованием различно окрашенных продуктов: биливердина (зеленого), билицианина (синего), холетелина (желтого) и др.

Проба Фуше

Принцип метода: В основе данной пробы лежит окисление билирубина хлорным железом после осаждения его хлоридом бария.

Ход определения

К 10 мл мочи прибавьте 5 мл 15% хлорида бария, смешайте, отфильтруйте. Вынутый из воронки фильтр разложите на сухой фильтровальной бумаге. На пятно хлорида бария нанесите 1-2капли реактива Фуше (хлорное железо FeCl₃ + трихлоруксусная кислота Сl₃CCOOH). В присутствии билирубина, на фильтре появляются сине-зеленые или голубоватые пятна (реакция положительная). Нормальная моча содержит очень малое количество билирубина, которое не обнаруживается обычными лабораторными методами.

Проба Розина

Принцип метода основан на окислении билирубина мочи в биливердин под действием йода.

Ход определения

В пробирку налейте 5 мл мочи и осторожно наслоите 1 мл 0,1% спиртового раствора йода. При наличии билирубина на границе между обеими жидкостями образуется зеленое кольцо (проба положительная). Подобный эффект наблюдается после приема антипирина и при наличии в моче крови.

Контроль выполнения лабораторной работы

1. При каких обстоятельствах появляется в моче гемоглобин?

2. Какая форма билирубина может появиться в моче? Почему?

3. Объясните причину появления глюкозы в моче?

4. Какой метод используют для количественного определения билирубина в сыворотке крови?

5. Что определяют бензидиновой пробой?

Темы рефератов:

1. Система ренин – ангиотензин – альдостерон.

2. Причины возникновения опухолей.

3. Факторы роста и онкогены.

4. Метастазирование.